顺序注射分光光度法测定左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美

'　　顺序注射分光光度法测定左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美【摘要】本文基于左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星分别与Fe(III)作用形成黄色络合物的现象，建立了简单、快速测定药物中左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星的顺序注射分光光度新方法。讨论了物理因素和化学因素对方法灵敏度的影响。测定左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星的工作曲线的线性范围均为10～250μg/ml。采用摩尔比法和连续变换法测定络合物的组成，Fe(III)与药物的组成比为1∶2。将方法用于药物中左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星的测定，并与参考方法进行了对照。【关键词】顺序注射分析技术；分光光度法；左氧氟沙星；氧氟沙星；洛美沙星ABSTRACTAsimpleandrapidsequentialinjectionspectrophotometricmethodforthedeterminationoflevofloxacin,ofloxacinandlomefloxacininpharmaceuticalpreparationicalandphysicalconditionsthataffectedthereactionlforlevofloxacin,ofloxacinandlomefloxacin.ThepositionoftheplexesolarratiomethodandJob′smethodofcontinuousvariation.Themethodination oflevofloxacin,ofloxacinandlomefloxacininpharmaceuticalmercialformulations.Theresultsobtainedethods.KEYAZ型流通池。称取1.2055gNH4Fe(SO4)2·12H2O置于0.2ml浓硫酸中加适量水，加热溶解，定容于100ml容量瓶中，即得到0.025mol/LFe(III)的0.036mol/L的硫酸溶液。取此溶液2.0ml于5.0ml0.036mol/L的硫酸中，稀释至10ml作为工作液。准确称取适量左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星对照品(中国药品生物制品检定所)，分别用3%乙醇溶解并定容于100ml容量瓶中，配制成500μg/ml的标准液。1.2实验步骤采用顺序注射测定左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星的步骤见Fig.1。以50μl/s吸取1700μl水作载流，再以50μl/s分别吸取50μlFe(III)溶液和200μl标准溶液或样品溶液，以20μl/s推动1000μl样品塞到达检测器，再以30μl/s推出剩余载流清洗流路。在437nm处测定体系的吸光度。2结果与讨论 当Fe(III)溶液分别与左氧氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星溶液共存时，溶液立即显示黄色，说明Fe(III)和药物形成了新的络合物。扫描溶液的紫外可见吸收光谱发现，三种络合物的最大吸收波长均位于紫外区，并延伸到可见区，其中Fe(III)洛美沙星络合物在437nm有一个肩峰存在；Fe(III)左氧氟沙星和Fig.1SchematicdiagramofsequentialinjectionsystemFe(III)氧氟沙星络合物没有明显的肩峰存在。考虑到三种药物分别在络合物的最大吸收波长处存在吸收，产生干扰，本文均在437nm测量体系的吸光度。2.1反应管和储存管的影响考察了内径分别为0.5和0.7mm的储存管对体系灵敏度的影响，结果表明，0.5mm内径的储存管具有更高的灵敏度，故选用200cm×0.5mm的储存管。与内径为0.7mm的反应管相比，内径为0.5mm的反应管灵敏度更高，因此本实验选用0.5mm的反应管。在24～90cm范围内研究了反应管长度对体系灵敏度的影响。反应管长度在40～70cm内，灵敏度最高且吸光度保持不变，本实验选用50cm的反应管。2.2流速的影响在15～60μl/s范围内考察了流速对体系灵敏度的影响。实验发现，流速慢时反应灵敏度较高。本实验采用流速为20μl/s。2.3试剂体积的影响和样品体积的影响在15～95μl内考察了Fe(III)溶液体积对体系灵敏度的影响，当Fe(III)溶液的体积大于40μ l时，体系吸光度达到最大并保持恒定，实验选用吸入50μlFe(III)溶液。样品体积对检测灵敏度也有影响。随着样品体积的增加，形成了更多络和物，体系吸光度增大。当样品体积大于190μl时，吸光度变化缓慢，故本实验选用200μl的样品溶液。2.4Fe(III)和硫酸浓度的影响考察了Fe(III)溶液浓度的影响。随着Fe(III)溶液浓度的增加，反应的灵敏度也随之增大。当Fe(III)溶液浓度大于2.5×10-3mol/L时，吸光度变化缓慢。实验选用Fe(III)溶液浓度为5.0×10-3mol/L。在0.75×10-2～3.25×10-2mol/L内考察了硫酸浓度对体系的影响。硫酸浓度对体系灵敏度几乎没有影响，实验选用2.52×10-2mol/L硫酸溶液。2.5工作曲线和方法的灵敏度及精密度在最佳实验条件下，分别绘制了洛美沙星、左氧氟沙星和氧氟沙星的工作曲线。结果表明，上述三种药物均在10～250μg/ml范围内遵守朗伯比尔定律，其线性回归方程和回归系数分别为：A洛美沙星=0.020+0.00592Cr=0.9993(n=5)A左氧氟沙星=0.0409+0.00548Cr=0.9996(n=5)A氧氟沙星=0.0368+0.00546Cr=0.9996(n=5)检测限分别为1.28、1.38和1.39μ g/ml。11次平行测定100μg/ml的洛美沙星、左氧氟沙星和氧氟沙星的相对标准偏差分别为1.33%、1.63%和1.07%。完成一次循环分析测定需要140s，因此，方法的进样频率为26/h。2.6络合物组成的测定应用摩尔比法和连续变换法分别测定了药物和Fe(III)的络合物的组成比，结果表明，药物与Fe(III)的组成比均为2∶1。3应用分别取10片含有上述组分的药片，研磨后，准确称取相当于主成分50mg，用3%乙醇定容于100ml容量瓶中。过滤，取适量中段滤液，定容于10ml容量瓶中，按实验方法进行测定。取适量注射液，用3%乙醇定容于50ml容量瓶中，取适量该溶液用水定容于10ml容量瓶中直接测定，同时进行回收率实验，并将测定结果与参考方法对照，结果见Tab.1。由Tab.1可见，该方法的分析结果令人满意。【004,516(1～2):237～243.［11］冯琳，储秋萍，邵志高.荧光分光光度法测定盐酸洛美沙星胶囊含量［J］.中国抗生素杂志，1996，21(1)：17～19.［12］RizkM,BelalF,AlyFA,etal. Differentialpulsepolarographicdeterminationofofloxacininpharmaceuticalsandbiologicalfluids［J］.Talanta,1998,46(1):83～89.［13］RadiA,ElSherifZ.Determinationoflevofloxacininhumanurinebyadsorptivesquaremetryonaglassycarbonelectrode［J］.Talanta,2002,58(2):319～324.［14］VllchezJL,AraujoL,PrietoA,etal.Differentialpulseadsorptivestrippingvoltammetricdeterminationoftheantibacteriallomefloxacin［J］.JPharmBiomedAnal,2001,26(1):23～29.［15］LiangYD,SongJF,YaXF.Floiluminescencedeterminationoffluoroquinolonesbyenhancementofiluminescencefromperoxynitrousacid［J］.AnalChimActa,2004,510(1):21～28.［16］YiL,ZhaoHC,ChenSL,etal.Flo(III)onchemiluminescenceofthepotassium permanganate/sodiumsulfitesystem［J］.Talanta,2003,61(3):40～409.［17］NieLH,ZhaoHC,,BorrullF,CalullM.Determinationofquinolonesinplasmasamplesbycapillaryelectrophoresisusingsolidphaseextraction［J］.JChromatogrB,2000,742(2):255～265.［21］SolichP,PolasekM,KlimundovaJ,etal.Sequentialinjectiontechniqueappliedtopharmaceuticalanalysis［J］.TrendsAnalChem,2004,23(2):116～126.［22］张龙，张成.盐酸洛美沙星胶囊的紫外分光光度测定法［J］.药物分析杂志，1999，19(3)：201～202.［23］金鹏.盐酸左氧氟沙星胶囊含量测定方法的改进［J］.海峡药学，2005，17(5)：63～64.［24］中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典(二部)［S］.北京：化学工业出版社，2000:711 '