分光光度法测定咳尔康口服液中多糖的含量

'分光光度法测定咳尔康口服液中多糖的含量作者：巩丽虹李孟全李春彦石秀梅于万君金秀东【摘要】　　［目的］建立咳尔康口服液中多糖含量的测定方法。［方法］采用改良的苯酚硫酸法，以葡萄糖为对照品，考察方法的线性、稳定性及加样回收率。通过检测葡萄糖的含量，反映样品中多糖的含量。［结果］葡萄糖浓度在18.2～91.0mg·ml-1范围呈线性关系（R2=0.9952）；平均回收率99.94%；相对标准偏差RSD=1.10％。［结论］运用改良的苯酚硫酸法测定三批咳尔康口服液中多糖的含量分别为36.32，30.90，32.75mg·mL-1，方法简便，重现性好，可以作为咳尔康口服液中多糖成分的质量控制方法。【关键词】咳尔康口服液；多糖；含量测定　　Abstract：［Objective］TodeterminethecontentoftotalpolysaccharideinKeerkangOralLiquid.［Methods］Takingglucoseascontrast，thedeterminationwasperformedwiththeimprovedpheno1sulfuricacidmethod.Thecontentofpolysaccharidewasreflectedwithcontentofglucose.［Results］Thelinearrangeforthedetectionofglucosewas18.2～91.0mg·mL-1（R2=0.9952）andtheaveragerecoverywas99.94%;therelativestandarddeviationwas6 1.10％.［Conclusion］ThismethodwassimpleandaccurateanditcouldbeusedforqualitycontroloftotalpolysaccharideinKeerkangOralLiquid.　　Keywords：KeerkangOralLiquid；polysaccharide；contentdetermination咳尔康口服液是在名方“六君子汤”基础上，经过临床多年反复实践研究衍化而成的一种纯中药制剂，本课题组前期研究结果表明该产品具有止咳、祛痰、平喘作用［1］。多糖是该制剂的主要有效成分，为建立其质控标准。笔者对咳尔康口服液中多糖含量的测定方法进行了探讨。　　1材料　　1.1药品与试剂　　咳尔康口服液，课题组提供。葡萄糖标准品，中国药品生物制品检定所批号110833。其它试剂均为分析纯。　　1.2仪器6 　　紫外分光光度计，美国瓦里安Cary100。离心机，上海天美科技有限公司。　　2方法与结果　　2.15%苯酚溶液的配制　　称取苯酚晶体5.00g，溶解，定容至100ml，摇匀即得，置于棕色瓶中备用。　　2.2葡萄糖标准贮备液的配制　　精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖标准品91.0mg置于100ml量瓶中，加纯化水溶解并稀释至刻度，摇匀即得浓度为0.91mg/ml的标准贮备液。　　2.3样品液的制备　　精密量取咳尔康口服液0.5ml，加无水乙醇至10ml，搅拌，于离心机中以3000r/min离心15min，弃去上清液，沉淀用乙醇洗涤至无色，挥干乙醇。将沉淀用纯化水溶解，定容至100ml，移取定容液20ml，定容至50ml即为样品液。　　2.4葡萄糖含量的测定6 　　取标准贮备液或样品液0.5ml置于10ml具塞试管中，加入5％苯酚溶液1ml，摇匀，迅速加入浓硫酸5ml，立即混合均匀，室温放置30min；另取0.5ml纯化水同法加入试剂操作，得空白对照液，在487nm处测定吸收度A值。　　2.5线性关系考察　　精密量取标准贮备液2.0，4.0，6.0，8.0ml，分别置于50ml量瓶中，摇匀。取稀释液各0.5ml按2.4项下的方法测定A值。以A为纵坐标，葡萄糖浓度C为横坐标进行回归处理，求得回归方程：Y=0.0485X+0.143（R2=0.9952）。　　2.6稳定性试验　　精密量取标准贮备液，按2.4项下的方法测定A值，每隔10min测定1次，直至1h，测得A值基本不变，RSD=0.93％，说明A值在60min内稳定。结果见表1。2.7精密度试验取按2.3项下处理的样品液4份，测定吸收度，求得RSD=4.65％。结果见表2。表1稳定性试验（略）表2精密度试验（略）　　2.8加样回收率试验6 　　精密量取已知含量的样品5份，每份定量加入葡萄糖对照品，振摇使溶解。加纯化水至刻度，摇匀。按2.4项下的方法操作，测得平均回收率为99.94％，RSD=1.10％。结果见表3。表3加样回收率试验（略）　　2.9样品多糖的含量测定　　精密量取纯化水及样品液各0.5mL，照2.4项下的方法测定吸收度，样品多糖的含量根据下列公式计算（以葡萄糖量计算）。多糖含量（mg/ml）=标准曲线查得含量×200×2.5。三批样品多糖含量分别为36.32，30.90，32.75mg/ml。　　3讨论改良苯酚硫酸法测定样品中多糖的含量［2］，原理是多糖在浓硫酸水合产生的高温下迅速水解，产生单糖，单糖在酸性条件下与苯酚反应生成橙色衍生物，该衍生物在487nm处和一定浓度范围内，吸收度值与浓度呈线性关系。本实验测得葡萄糖浓度在一定范围内呈线性关系，稳定性试验、精密度试验、加样回收率试验结果良好，测定三批样品多糖含量分别为36.32，30.90，32.756 mg/ml，测定结果表明：其含量稳定，该方法快速简便，准确可靠，为控制咳尔康口服液的内在质量提供了科学依据。【参考文献】　　［1］孙展鹏，李孟全，王元奕，等.咳尔康口服液止咳、祛痰、平喘的实验研究［J］.医药导报，2009，28（3）：2931.　　［2］张华.补气生血口服液中不同药物组合方式提取液中的多糖含量测定［J］.山东中医杂志，2004，23（9）：556557.6'