紫外分光光度法测定饮料中的苯甲酸.doc

'紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂—苯甲酸一、目的要求1．了解和熟悉紫外可见分光光度计。2．掌握紫外可见分光光度法测定苯甲酸的方法和原理。3．学习掌握用标准曲线定量分析的方法。二、实验原理为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。我国规定了苯甲酸（盐）在碳酸饮料中最大使用量为0.2g/kg。苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有强吸收由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。本实验测定雪碧中苯甲酸，含有人工合成色素、甜味剂等，但一般在紫外区无吸收，故不干扰测定，样品不用处理，苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。三、仪器与试剂日立UV-3010紫外-可见光谱仪；1cm石英比色皿；苯甲酸（AR）；市售饮料四、操作步骤1.苯甲酸标准储备液配制：称取0.1000g苯甲酸于100mL容量瓶中，加适量蒸馏水定容，配制成1mg/mL溶液，吸取此液5mL于50mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，每毫升溶液相当于苯甲酸100ug。2.标准曲线绘制： 取苯甲酸标准储备液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00mL，分别置于50mL容量瓶中，用蒸馏水溶液稀释至刻度。以水为对照液，测定其中5号标准溶液的紫外可见吸收光谱（测定波长范围为200~350nm），找出λmax，然后在λmax处测定五个标准溶液的吸光度A。3.样品处理和测定：雪碧饮料除二氧化碳后，准确移取2.5mL于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容，在λmax处测定吸光度。五、结果与计算从曲线上找出相应的苯甲酸浓度Cx，按下列公式计算样品中苯甲酸含量。w=Cx×V1/V2V1样品定容后体积V2所取样品体积六、提问1.举例说明日常生活中遇到的哪些食品中有防腐剂？2.用什么方法从样品中把苯甲酸分离出来？3.食品中苯甲酸检测还有哪些方法？4.苯甲酸通过什么排泄？5.如何利用一元线性回归法绘制标准曲线及计算样品中苯甲酸含量？'