分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量

'分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量（湖北中医药大学药学院药学（2）班）一、实验综述摘要：以邻二氮菲为显色剂用分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量。研究表明，在pH=2～9的溶液中，铁（Ⅲ）可用盐酸羟胺还原至铁（Ⅱ），生成的铁（Ⅱ）与邻二氮菲生成稳定的橘红色络合物，，其最大吸收波长为506nm,铁浓度在0.31~16.00mg/L范围内与溶液吸收光度呈良好的线性关系，线性回归方程为A=________________________相关系数r=______，检出限为_______mg/L，相对标准差RSD=_____，表观摩尔吸收系数=___________L（mol-1cm-1）关键词：邻二氮菲；分光光度法；铁铁元素是人体内重要的元素之一。人体缺铁容易导致一些贫血症状甚至一些疾病，所以适当补铁对人体健康有着非常重要的意义。如果人体缺铁，可影响血红蛋白、肌红蛋白的合成，使某些酶的活性降低，引起人体生理上的变化，从而导致免疫力降低，智力降低和机体抵抗力下降等引起的各种疾病的产生。测定新血宝胶囊中的铁含量对于人体的健康有着十分重要的意义。测定铁的含量由很多方法。本文采用邻二氮菲分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量，该法具有操作简单、灵敏度高等特点，结果令人满意。二、实验目的1.了解分光光度法侧铁的选择2.熟悉显色反应条件与测量条件的选择方法3.熟悉实验设计的基本内容与方法4.掌握分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量三、实验原理亚铁离子与邻二氮菲反应生成橘红色络合物，其反应式为：332+橘红色lmax邻二氮菲四、实验仪器和试剂仪器：721(722)分光光度计、50ml容量瓶、刻度吸管（1ml、5ml），pH精密试纸。实验试剂：铁标准储备液(Fe2+=100.0μg/ml).0.15%邻二氮菲水溶液(显色剂).10%盐酸羟胺溶液(还原剂)醋酸缓冲溶液.3mol/mlHCl.1mol/mlNaOH.五、实验设计方案（一）测定波长的选择：在50mL容量瓶中，准确加入0．40mL铁标准溶液(I)，分别加入1mL10％盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2min后，再加入2mL0．15％邻二氮菲溶液、5mL1．0mol／L醋钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。用lcmlocatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame 吸收池，以去离子水为空白溶液作参比溶液，在不同波长(从440一560nm)下测定一次吸光度。绘制吸收曲线。表1λ/nm440450460470480490492494Aλ/nm496498500502504506508510Aλ/nm520530540550560A绘制A—λ曲线Aλ/nm图1由图1可以看出，随着波长的增加，吸光度值逐渐增加，在____nm处有最大吸收，此后随着波长的增加，吸光度值降低。因此选择_____nm为最佳吸收波长。（二）邻二氮菲的用量对吸光度的影响取6个50mL容量瓶，各加10-3mol／L标准铁溶液2mL及1mL10％NH20H·HCI溶液，摇匀，放置2min后，再分别加入0．10mL、0．30mL、0．50mL、1．0mL、2．0mL及4．0mLO．15％邻二氮菲溶液，和5mLlmol／LCH3COONa溶液，以去离子水稀释至标线，摇匀。在722型分光光度计上用lcm吸收池，在选定的波长_____nm，测定溶液的吸光度(A)。绘制吸光度一显色剂用量曲线。表2邻二氮菲用量的不同对吸光度的影响V邻二氮菲0.100.300.501.02.04.0AlocatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame 根据实验数据绘制A—V曲线Aλ/nm图2根据表2和图2可知邻二氮菲的用量在1.0,—4.0范围时，溶液的吸光度最大且恒定不变，故选2.0mL作为其最佳用量。（三）显色反应的时间取一个50mL容量瓶，加入2mL10qmol／L标准铁溶液，及lmL10％NH20H·HCI溶液，摇匀放置2min后，再加2mL0．15％邻二氮菲溶液，5mL1.0mol/L醋酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上，在选定波长____nm下，用lcm吸收池，以去离子水为空白溶液作参比溶液，测定吸光度．以后每隔半小时再测定一次。表3不同显色时间对溶液吸光度的影响时间0h0.5h1h1.5h2.0h2.5h3.0h3.5h4.0hA根据实验数据绘制A—t曲线AlocatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame t/h图3根据实验结果，为了实现快速并且准确分析，本实验选择室温下最佳测定时间为显色后______h。（四）溶液pH的选择取6个50mL容量瓶，每个加入2mL10-3mol/L标准铁溶液，及lmL10％NH：OH·HCI溶液，摇匀放置2rain后，再加2mL0．15％邻二氮菲溶液，摇匀。分别从滴定管中加入10mL、12mL、14mL、16mL、18mL、20mL0．1mol／LNaOH溶液，以去离子水稀释至标线，摇匀。在选定波长____nm下，用1cm吸收池。以去离子水为空白，测定各溶液的吸光。表4不同酸度对吸光度的影响V/mL101214161820ApH根据实验数据绘制A—pH曲线ApH图4由图4中可知，在pH值为___________范围内吸光度最大并基本恒定，故本实验取pH为_________作为最佳显色pH。所以我们就可以得出加入____________mol／LNaOH溶液时为最适宜用量。（五）标准曲线的绘制取5个50mL容量瓶，用刻度移液管分别加入0．00mL、0．40mL、0．80mL、1．20mL、1．60mL、1．80mL(II)标准铁溶液注<3>(含铁100ug／mL)。在分别加入1mL10％NH20H·HCl溶液，摇匀放置2min后，再加2mL0．15％邻二氮菲溶液，5mL1．0mol／LlocatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame 醋酸钠溶液，以去离子水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上，在选定波长______nm下，用lcm吸收池，以去离子水为空白溶液作参比溶液，测定各溶液吸光度。以含铁量为横坐标，相应吸光度为纵坐标，绘制出工作曲线。表5标准曲线V/mL0.400.801.21.601.80A由标准铁溶液(II)在波长______nm处测定吸光度，做标准曲线。数据见表5和图5，其线性较好。回归方程为：A=_______________________，r=_______。根据实验数据，以含铁量为横坐标，相应吸光度为纵坐标，绘制曲线AC/ug/L用移液管量取20mL新血宝样品溶液于50mL容量瓶中，加入lmL10％NH：OH·HCl溶液，摇匀放置2min后，再加2mL0．15％邻二氮菲溶液，5mL1．0mol／L醋酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上，在选定波长______nm下，用lcm吸收池，去离子水为空白溶液作参比溶液，放置_____h后，测邻二氮菲的用量，图4不同显色时间对溶液吸光度的影响定吸光度。测得吸光度为A=________，由回归方程为：A=___________________________，得C=_____ug/mL，则自来水中铁的含量_____ug/mL：六、实验结论：本实验的最佳实验条件是：①最大吸收波长为_____nm，②显色剂最佳用量为______mL；③选择在室温下_____h为最佳时间。④最适宜的pH值范围为__________；[参考文献]locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame [1]胡小明，潘自红分光光度法测定发样中的微量铁[J]广州化工2012,40（6）：166~167[2]李建雄自来水中铁含量测定的实验研究[J]内蒙古石油化工2011，6：5~6[3]李咏梅，施鹏飞，李人宇双波长分光光度法测定饲料中铁的含量[J]中国饲料2012，23：33～34locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame'