紫外分光光度法测定混合物中非那西汀和咖啡因的含量11

'紫外分光光度法测定混合物中非那西汀和咖啡因的含量指导教师权新军 实验目的掌握二组分混合物的吸收峰相互重叠时，测各组分含量的分析方法。学会UV-2450型紫外-可见分光光度计的使用方法。 实验原理实验原理-----多组分的同时测定1.若两组分的吸收曲线互不重叠，则可在各自最大吸收波长处分别进行测定。即本质上与单组分测定没有区别。 实验原理2.若两组分的吸收曲线相互重叠，只要两种组分没有相互作用，则溶液的吸光度等于两种组分各自吸光度之和，这就是吸光度加合原理。可求解联立方程组得出各组分的含量。 实验原理在非那西汀（a）和咖啡因(b)的二组分混合物中，二组分的分别测定就属上面这种情况。 实验用品UV-2450紫外-可见分光光度计石英比色皿（1cm）容量瓶（50ml，500ml）移液管（5ml、10ml）未知样品液。吸耳球，洗瓶，胶头滴管，玻璃棒烧杯（100ml）非那西汀，咖啡因，乙醇 实验方法及步骤1．标准溶液配制非那西汀标准溶液（100μg·ml-1）：准确称量非那西汀0.0500g于小烧杯中，加少许乙醇溶解，转移到500ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀备用。咖啡因标准溶液（150μg·ml-1）：准确称量0.0750g咖啡因于小烧杯中，加蒸馏水溶解后，转移到500ml容量瓶中，定容备用。 2．吸收曲线的绘制分别移取5.00mL非那西汀和咖啡因标准溶液于2个50mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，则非西汀质量浓度为10μg·ml-1，咖啡因质量浓度为15μg·ml-1。在紫外－可见分光光度计上，以蒸馏水为空白，从300nm至200nm，分别对非那西汀和咖啡因进行扫描，绘出二者的吸收曲线，选出二者的最大吸收波长。 3．样品分析移取未知样品10.00ml（c非那西汀≈40～60μg·ml-1，c咖啡因≈60～90μg·ml-1）于50mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。分别在二者的最大吸收波长测定其吸光度值A。 实验结果1．根据吸收曲线，选出咖啡因和非那西汀的最大吸收波长。2．计算未知样咖啡因和非那西汀的浓度（mol·L-1）。1）根据吸光度公式列出联立方程组2）解方程组，求出浓度C非那西汀和C咖啡因。3.完成实验报告并交给指导教师。'