分光光度法测定中草药中硒（iv）的含量

'　　分光光度法测定中草药中硒（IV）的含量【关键词】催化动力学分光光度法硒　　Abstract：ObjectiveTodescribeaspectrophotometricmethodforthedeterminationofselenium(IV).MethodsTheselenium(IV)ethylbuleedium.Astheredoxreactionproceeded,thebluecolourofthedyeountofselenium.Thedetectionrangeofthemethod-3-3.Mostofthecations,suchas,copper,potassium,iron,etc.cancoexistinthesystemduringthedeterminationofSe(IV).ConclusionThemethodissimple,satisfactoryandcanbeusedforthedeterminationofSe(IV)inChineseherbaldrugs.　　Keyethod;Spectrophotometricdetermination;Selenium　　硒是生物体必需的一种营养元素,在体内能保护细胞膜的结构和功能,对心血管功能、生育、视力等有重要作用，并且还有预防和抗癌作用。测定Se（IV）的方法有萃取分光光度法，火花中子荧光测定法［1］，电感耦合等离子体发射光谱分析法，原子吸收分光光度法［2］，色谱法，氢化物发生法，X-射线荧光光度法，电热法等。一些方法有很好的选择性和灵敏度，但因操作复杂费时，或需要大型仪器而使其应用受到限制。近年来，催化动力学光度法发展很快，因其灵敏度高、重现性好、操作简单、仪器普遍等特性，已广泛用于多种元素的分析［3～5］。本文研究了硒催化KBrO3氧化亚甲兰的褪色反应是一种简单，灵敏，快捷的测定Se（IV）的方法。本文给出了反应过程，并已用于一些中草药的测定。　　1仪器与试剂　　UV-8500I分光光度计(上海,天美)，在测定吸光度时采用1cm的比色皿。501型超级恒温水浴；pHS-2型酸度计。　　所用化学试剂均为分析纯（纯度大于99%）。分析用水为二次蒸馏水。　　硒储备液1000μg·ml-1：称取0.1405gSeO2用水溶解,稀释至100ml的容量瓶中，加二次水至刻度，配成硒储备液。此溶液作为测定标准液［6］。　　亚甲蓝的储备液（100μg·ml-1）：把适量亚甲蓝溶解，置于100ml容量瓶中，用水稀释至刻度。此溶液作为测定标准液。用二次水适当稀释得到工作溶液。　　0.1mol·dm-3KBrO3溶液；0.025mol·dm-3HNO3溶液。　　2实验过程　　在10ml测定管加入3.0ml亚甲蓝和2.0ml适量硒标准液，稀释至10ml，同时置68℃的恒温水浴中，以试剂空白作参比，用1cm比色皿，在最大吸收波长662 nm处，用分光光度计测量非催化体系和催化体系的吸光度A0和A，并计算lg(A0/A)，利用lg(A0/A)与硒溶液浓度的关系计算硒的含量。　　3结果与讨论　　3.1实验条件的选择　　3.1.1硝酸溶液用量的影响　　实验研究HNO3用量在0.2～1.0ml时酸性的影响。数据显示，HNO3用量0.2～0.8ml，lg(A0/A)一直增大，说明硒的催化作用增强。当HNO3用量在0.8ml时，lg(A0/A)达到最大，并趋于平衡，本实验选0.025MHNO3用量0.8ml。　　3.1.2KBrO3和MB反应体系的影响　　在KBrO3和MB反应体系，MB和KBrO3分别做还原剂和氧化剂，有合适的反应比率。保持其他条件不变，分别改变KBrO3用量1.2～3.0ml，MB用量从2.0～4.5ml。数据显示MB3.0ml和KBrO32.0ml时，催化体系和非催化体系的吸光度明显不同，且有较高灵敏度。　　3.1.3反应温度的选择　　实验表明，本反应低于60℃几乎不反应，MB被KBrO3氧化的反应速率是随着反应温度的升高而增大。反应的最佳温度范围在62～70℃之间。数据显示，68℃是最佳反应温度。在70℃以上，重现性较差。　　3.1.4反应时间的选择　　确定了［Se］，［KBrO3］，［MB］的酸度和温度时，与logA0/A对应的时间显示，随着反应时间的增加，lg(A0/A)增大。当反应时间在4～8min时，反应线性加快;反应时间过长不利于实验的控制和测量。所以综合以上情况7min是最佳反应时间。　　综上所述，实验的最佳反应条件为：3.0mlMB，2.0mlKBrO3，0.8mlHNO3，反应时间7min，反应温度为68℃。　　3.2标准曲线的绘制因为亚甲蓝的氧化反映在室温下不反应，可以通过流水冷却有效地终止反应。室温下反应终止24h之内，溶液的吸光度改变值小于5%。在最佳反应条件下，测定不同含量的硒标准液并绘制标准曲线：logA0/A=0.14328CSe(IV)(μg·dm-3)+0.04953(r=0.9995)。　　该方法的灵敏度为0.3527μg·dm-3，Se（IV）浓度在0～5μg·dm-3之间与logA0/A呈线性关系。　　3.4 催化动力学反应Se（IV）催化KBrO3氧化MB反应中，MB的褪色速度为：　　-dCMB/dt=kCαMBCγkBrO3CβSe(IV)CδH+（1）　　根据催化反应的特性CrKBrO3和CδH+在反应中的改变可忽略，且β=1。由方程（1）可得方程（2）：　　-dCMB/dt=kCαMBCSe（IV）（2）　　根据B定律：A=εLCMB，则　　-dA/dt=k1AαCSe（IV）（3）　　log（-dA/dt）=αlogA+logk1（4）　　以△A/△t代替dA/dt，以表示一定时间区间的平均吸光值，以log（-△A/△t）对-log作图，可得一条直线（相关系数=0.9994），其斜率为α值，见表2。表2α的测定（略)　　根据表2，以log（-△A/△t）对-log的直线方程式为：log（-△A/△t）=1.0287×（-log）+0.7735（r=0.9994）。此反应对亚甲蓝为一级反应。　　4样品含量分析　　抗癌中草药（保定中药材公司提供）三棱（CPV），长春花（MPH）和冬凌草（RRH）按照以下方法进行处理［8］：准确称取1.5g左右样品混合粉末，加入浓HNO330ml浸泡，放置过夜，在150℃加热3h，再加入HNO3-HClO4（3∶1）的混合酸10ml，在150℃加热浓缩至1～2ml，冷却至室温，加水稀释至10～15ml，通过阳离子交换树脂除去干扰离子［9］，将洗脱液加水稀释至50ml，按上述实验方法测定样品中的Se（IV）含量。　　样品中Se（IV）的含量可通过相对应的标准曲线获得。中草药中硒（IV）含量的测定结果列于表3。表3中草药样品回收率的分析（略）【参考文献】　　［1］ManishH,RamachandranKNGuptaVK,Talanta,1994，(41)：1623.　　［2］TummalapalliCM,ousaviMF,GhiasvandARJahanshahiAR,Tanlanta,1998，(46)：1011.　　［8］李成平,施青红,刘文涵.催化动力学光度法测定痕量硒［J］.光谱实验室,2006,23(1):104.　　［9］王艳娟,张渝阳,田明,等.离子交换树脂分离测定硒中硫［J］.渤海大学学报(自然科学版),2006,27(2):97.'