紫外分光光度法测定长白楤木根、茎、叶中总黄酮含量

'　　紫外分光光度法测定长白楤木根、茎、叶中总黄酮含量作者：宁德利阮洪生韩承伟黄金仁殷奎德【摘要】　　目的对长白楤木根、茎、叶中所含总黄酮的含量进行测定。方法采用紫外分光光度法于360nm波长处测定。结果总黄酮在4.08～32.64μg/ml范围内线性关系良好，其回归方程为：A=0.0183C+0.0127,R2=0.9992；平均加样回收率为100.63％(RSD=1.93％)。结论该方法简便、准确，可用于长白楤木的质量控制。【关键词】长白楤木；紫外分光光度法；总黄酮　　Abstract：ObjectiveToestablishamethodforthedeterminationofthetotalflavonoidsinroots,stalksandleavesofAraliacontinentalisKitaginedbyspectrophotometricmethodat360nmplesizeshol，andthecurveethodiseasyandaccurate，andcanbeusedforqualitycontrolofAraliacontinentalisKitagetricmethod；Totalflavonoids　　长白楤木AraliacontinentalisKitagal/g药材左右，浓缩液加2倍量水稀释，静置24 h。抽滤除去不溶性物质，滤液再次浓缩后加水至一定体积，即得长白楤木样品溶液［4］。　　2.2对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品10.2mg，置于50ml容量瓶中，加入95%乙醇定容至刻度，超声溶解5min，配成0.204mg/ml标准品溶液，冷藏保存备用。　　2.3测定波长选择稀释到一定浓度的对照品和样品溶液分别加10%AlCl3溶液1ml，以95%乙醇定容，摇匀，显色30min。在200～600nm波长范围内紫外扫描。发现360nm处出现最大吸收波长，实验中选择测定波长为360nm。　　2.4线性关系考察精密吸取芦丁标准品溶液0，0.5，1，1.5，2，2.5，3，3.5，4ml于25ml容量瓶中，分别加入10%AlCl3溶液1ml，95%乙醇定溶至刻度，摇匀。显色30min后于紫外分光光度计下测定吸收值，以吸光度为纵坐标，芦丁对照品溶液的浓度为横坐标，绘制标准曲线。结果以吸光度A对浓度C作最小二乘法回归，标准曲线方程为：A=0.0183C+0.0127，R2=0.9992，线性范围为4.08～32.64μg/ml。　　2.5稳定性实验取2ml样品液于25ml容量瓶中加10%AlCl3溶液1ml，用95%乙醇定容至刻度，于室温条件下每隔10min测定1次吸光值，结果发现供试品溶液放置30min后显色完全，且在1h内稳定，RSD=2.13%。　　2.6 精密度实验配制一定浓度样品溶液测定吸光度，连续测定5次其RSD=1.25%，说明仪器精密度良好。　　2.7加样回收率实验分别精密量取已知总黄酮含量的提取溶液5份，分别加入一定量的芦丁标准品，按上述操作方法进行，用紫外法测得吸光度，得出总黄酮含量，根据回收率公式计算出加样回收率。结果见表1。结果表明，本方法具有良好的加样回收率。　　表1加样回收率实验（略）　　2.8样品溶液中总黄酮的含量测定按“2.2”项方法分别制备1年生、2年生、3年生、5年生根茎叶样品溶液分别取适量样品溶液于25ml容量瓶中加入10%AlCl3溶液1ml，以95%乙醇定容摇匀，室温显色30min，在紫外分光光度计下测定吸光值，根据标准曲线方程计算结果见表2。　　表2长白楤木总黄酮含量测定结果（略）　　表2可知随着生长时间的增加，长白楤木中总黄酮含量有所增加。其中根、茎中总黄酮含量以3年生最多，生长时间不同有所波动，叶中总黄酮含量随生长时间增长而增加，平均含量中3年生的长白楤木总黄酮含量最多。因此，长白楤木根、茎、叶最佳采收时间应为其生长3年和5年时。　　3结论 　　关于长白楤木成分分析的研究目前仅有关于多糖的有关报道，而关于其黄酮的含量测定一直未见报道。本文所采用的方法测定结果表明的叶中总黄酮含量最多，为开发利用黄酮类药物和保健品植物资源提供理论依据。本实验采用紫外-分光光度法测定长白楤木中总黄酮的含量，精密度、稳定性、重复性良好，加样回收率合格，为长白楤木中总黄酮的含量测定提供了一种简便可行的方法，为长白楤木的质量控制提供了评价手段。【参考'