示差分光光度法测定水样中非那西汀的含量

'示差分光光度法测定水样中非那西汀的含量指导教师权新军 实验目的1、通过标准曲线的绘制及样品溶液的测定，了解示差分光光度法的原理及特点2、掌握UV-2450型紫外-可见分光光度计的使用方法 实验原理一、紫外－可见分光光度法基本原理二、分光光度计基本组成及UV-2450型紫外－可见分光光度计操作规程三、示差分光光度法的原理 一、紫外－可见分光光度法基本原理紫外-可见分光光度法是指利用紫外-可见吸收光谱对物质进行定性和定量分析的方法。紫外-可见吸收光谱属于分子吸收光谱，由分子的外层电子跃迁产生。其中可见吸收光谱：波长范围400750nm，主要用于有色物质的定量分析。紫外吸收光谱：波长范围200400nm（近紫外区），可用于结构鉴定和定量分析。 物质的结构不同，紫外吸收光谱的形状不同，据此可进行结构鉴定。例如:不饱和脂肪族化合物在175~200nm处有吸收。芳香族化合物的苯环在紫外区有三个吸收峰，λmax=250nm，。 定量分析依据朗伯-比尔定律：A＝lg（I0/It)=εbc式中A：吸光度；b：液层厚度，通常以cm为单位；c：溶液的摩尔浓度，单位mol·L－１；ε：摩尔吸光系数，单位L·mol－１·cm－１朗伯-比尔定律是紫外-可见分光光度吸收法定量分析的依据。 二、分光光度计的基本组成及UV-2450型紫外－可见分光光度计操作规程光源单色器样品室检测器显示UV-2450型紫外－可见分光光度计 操作规程简介1.打开电源开关，打开电脑及软件，进入自检界面。2.单击确定开始自检，自检过程中不得打开样品室盖。3.完成自检后，单击波长扫描按钮，选择“方式”，设定波长及测量方式（Abs）4.将参比溶液放入参比池中，另一参比液放入样品池第一池内。点击自动清零键清零。5.取出样品池中参比，放入测量液，进行全波长扫描，找出最大吸收波长。6.取出测量液，将标准曲线的五个试样放入测量池中，打开定量分析界面，设定波长和测量方式Abs，测定各点吸收值，绘图。7.放入待测样品，测定。 三、示差分光光度法原理普通分光光度法一般测定痕量组分参比溶液浓度为零即朗伯—比耳定律只适用于稀溶液。 示差分光光度法用于测定浓度较高组分用浓度稍低于待测溶液的标准溶液作参比设：待测溶液浓度为cx，标准溶液浓度为cs(cs