分光光度法测定3种颜色桑葚中的总多酚

'万方数据第28卷，第1期2011年1月光谱实验室ChineseJournalofSpectroscopyLaboratoryV01．28，No．1January，201分光光度法测定3种颜色桑葚中的总多酚闫祝炜①(新疆产品质量监督检验研究院鹿毅杨涛乌鲁木齐市新华南路167号830004)摘要桑葚含有丰富的多酚类化合物(含量因部位不同而有差异)，这类化合物具有抗动脉硬化、降低胆固醇、抗氧化和抗辐射等作用，可用来有效地评价桑葚的活性。采用Folin-Ciocalteu法对桑葚中的总多酚进行检测。以没食子酸为对照品，校准曲线的回归方程为y=99．65x+0．02990(r=0．9997)；对稳定性、精密度，重现性、回收率进行了实验，该方法简便、快速、准确，是检测桑葚中总多酚的可靠方法。关键词红色桑葚；黄白色桑葚；黑紫色桑葚；总多酚f分光光度法中图分类号：0657．32文献标识码：B文章编号：1004—8138(2011)01-0325—041引言桑葚又名桑枣、桑果、桑实、葚子、乌葚等，系桑科、桑属植物[1]。它起源于亚洲的温带，为落叶乔木，高3—7m或更高，树皮灰褐色，叶互生，卵圆形，边缘粗钝锯齿，在世界各处都有分布。据《本草纳要》记载“桑葚味甘，性微寒，能生津，有滋阴补血、安魂镇神之效。”近代科学测定，桑甚含有丰富的果糖、葡萄糖、多种维生素和人体所必须的氨基酸，对减轻神经衰弱、动脉硬化、性功能衰弱等均有显著疗效。现代医学对桑葚进行药理、药效毒理测试的结果表明，桑葚能提高动物体内酶的活性，抑制有害物质生成，增强抗寒、耐寒能力，延缓细胞衰老，防止血管硬化以及提高机体免疫功能等。桑葚含有多酚类化合物，这类化合物具有抗动脉硬化、降低胆固醇、抗氧化和抗辐射等作用。近年来，国内外亦多用桑葚制桑葚罐头、桑葚汁饮料，以及汽水、酒、果酱、软糖、糕点等，并可提取果胶、紫红色天然色素以及其他营养成分。用桑葚加工成的产品，天然，无公害，有显著的医疗保健功能。同时，我国桑葚资源丰富，目前还没有好好开发利用，仅仅有对其总花色苷领域的研究[2]，而没有对其总多酚等领域的研究。因此，开发利用桑葚资源的前景十分广阔。2实验部分2．1药材、试剂与仪器红色桑葚、黄白色桑葚、黑紫色桑葚(产于新疆，新疆医科大学中医学院李永和主任药师鉴定)。20％的Na。CO。；99％的没食子酸(天津光复精细化工研究所)；福林试剂；0．1mg／mL没食子酸，其他试剂均为分析纯。实验用水为蒸馏水。BSIIOS电子天平(北京赛多利斯公司)；SpectrumLab22可见分光光度计(上海棱光公司)；CSl01型电热鼓风干燥箱(重庆试验设备厂)；KQ2400DB超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；HY282回旋振荡器(金坛市医疗仪器厂)。①联系人．手机：(0)13095002187；E-mail：tagyz@aina．eonl作者简介：闫祝炜(1963一)，女，天津市人。高级工程师．学士．主要从事食品检验及质量评价工作．收稿日期：2010—07—21；接受日期t2010--08—11 万方数据光谱实验室第28卷2．2实验方法2．2．1福林试剂的配制E33称取209钨酸钠和59钼酸钠于圆底烧瓶中，用140mL蒸馏水溶解，加入10mI。85％的磷酸溶液和20mL浓盐酸，文火回流10h，然后加入39硫酸锂及15mL双氧水，加热沸腾15min至亮黄色，不得带微蓝和绿色。冷却，移入250mi，容量瓶中，用蒸馏水定容，贮于棕色瓶中。2．2．2标准溶液的配制以没食子酸为对照品，准确称取0．0059没食子酸，蒸馏水定容至50mL。该标准溶液浓度为0．1mg／mL。2．2．3最大吸收波长的测定以蒸馏水为溶剂，以福林试剂、碳酸钠为显色剂，作标准品没食子酸的吸收曲线，在740--790nm波长下扫描其吸光度，结果表明在760nm处有强吸收峰，故选择760nm作为测定波长。2．2．4校准曲线的建立[41准确量取上述标准液0．2、0．4、0．6、0．8、1．0mL于10mL容量瓶中，各加6mL水，摇匀，再加0．5mI，福林试剂，充分摇匀。lmin之后，加入20％碳酸钠溶液1．5mL，混匀，用水定容。在75℃下反应10min，于760nm波长下测定吸光度，建立校准曲线。2．2．5样品溶液的制备[51分别准确称取红色桑葚鲜果、黄白色桑葚鲜果、黑紫色桑葚鲜果各259，加入200mL60％乙醇，回流提取3次，每次1h，合并滤液，5000r／min离心10min，用60％乙醇定容至600mI。。2．2．6样品的测定分别准确量取制备好的红色桑葚、黄白色桑葚、黑紫色桑葚鲜果样品溶液0．5mL，置于10mL容量瓶中，加入6mL蒸馏水，再加入0．5mL福林试剂，摇匀，加入1．5mL20％Na：C0。溶液，用水定容至刻度，充分混匀，75C水浴上加热10min，冷却后于760nm处测定吸光度。3结果与讨论3．1校准曲线的建立以总多酚浓度C为横坐标，吸光度A为纵坐标建立校准曲线，见图l，回归方程：j，=99．65z+0．02990(，-=0．9997)。3．2稳定性实验取红色桑葚，黄白色桑葚，黑紫色桑葚鲜果样品按上述样品溶液制备及测定方法，于4‘C放置0、2、4、8、12、24h测定吸光度值，随着时间的延长，吸光度值有下降趋势，但下降幅度不大，其RSD值分别为1．96％、1．79％、0．92％，表明24h内溶液稳定性良好。3．3精密度实验取红色桑葚，黄白色桑葚，黑紫色桑葚鲜果样品按上述样品溶液制备及测定方法，重复测定5次，其RSD值分别为0．62％、0．73％、0．53％。3．4重现性实验分别称取质量相同的红色桑葚，黄白色桑葚，黑紫色桑葚鲜果各3份，按上述样品溶液配制方法及测定方法，测定吸光度值，其RSD值分别为1．03％、1．67％、0．89％。 万方数据第1期闰祝炜等。分光光度法测定3种颜色桑葚中的总多酚3．5回收率实验1．2采用加标回收法，将已知总多酚含量的红色桑葚鲜果样品6份，各加入对照品25mL，按上述样品溶液制备与测定方法检测总多酚浓度，并计算回收，0．8率，结果如表1所示。彗3．6样品含量测定9准确吸取各供试品溶液适量于10ml。容量瓶0．4中，依法测定，每样平行测定3份，计算样品中总多酚的含量，结果见表2。4结论该实验以没食子酸为对照品，采用Folin—Ciocalteu比色法测定3种颜色桑葚中的总多O0．0040．008浓度／mg·mL。1图1没食子酸校准曲线酚的含量，该法操作简单、实用性强、效率高、实验设备要求低，是检测桑葚中总多酚的可靠方法，可用于桑葚的质量评价。测定结果表明：桑葚中以黑紫色桑葚鲜果总多酚含量较为丰富，可作为开发抗氧化制剂的原料，具有一定的价值。桑葚在我国新疆的资源丰富，具有药食两用的价值。目前，对桑葚的研究较少，故本实验研究可为进一步研究与开发桑葚奠定基础，具有一定的参考价值。衰1加样回收实验结果血=6)编号样苫量样慧量加入怒品量实篙量鼍尝于平均值(％)RSD(％)65．0Z7．982．5010．4096．80参考文献[1]陈小全．周鲁．超声波作用下桑葚红色素的提取及稳定性实验[J]．西南民族大学学报(自然科学版)，2004，30(4)；458--459．E23霍琳琳．苏平。吕英华．分光光度法测定桑葚总花色苷含量的研究[J]．酿酒。2005，32(4)t88—89．[3]田文礼．孙丽萍．董捷等．中国农业科学院蜜蜂研究所口]．食品科学，2007。28(2)：258--260．[4]刘顺航，孟宪军，牛涛等．葡萄籽中总多酚成分的测定i-J"]．中华中医药杂志(原中田医药学报)，2007，22(10)：715—716．E5I陈丛瑾．胡华字，黎跃等．马占相思树叶中总多酚的溶剂回流提取工艺D]．光谱实验室，2008，25(5)t828--832．0O24820●728929O9O1■1O35824545●O0O01■1■l1lO0O5●278O79O9●787l1o‘叠ulO0O●5l23t5 万方数据328光谱实验室第28卷DeterminationofTotalPolyphenolinThreeColorsofMulberriesbySpectrophotometryYANZhu—WeiLuYiYANGTao(XinjiangInstituteofSupervisionandInspectionforProductQuality。Urumqi830004．P．R．China)AbstractTherearepolyphenoliccompoundsindifferentpartsofmulberry(1evelsdifferbyloeation)，whichhavemulti—functions，suchasanti—arteriosclerosis，loweringcholesterol，anti—oxidationandanti—radiation．Thepolyphenoliccompoundscouldbeevaluatedfortheactivitiesofmulberryeffectively．TotalpolyphenoliccompoundsinmulberriesofdifferentcolorsweredeterminedbyFolin—Ciocalteumethod．Thestandardreferencewasgallicacidandtheregressiveequationofstandardcurvewasy一0．02990+99．65x(r一0．9997)．Thestability，precision，repetitionandrecoveryweretested．Themethodisconvenient，fast，exact，andreliableforthedeterminationofthetotalpolyphenolinmulberry．KeywordsRedMulberry；YellowWhiteMulberry；DarkPurpleMulberry；TotalPolyphenol；Speetrophotometry；欢迎您投稿“高效、保质、宽容’’的中文核心期刊；《光谱实验室》；这是您的发明、发现获得“优先权"的可靠保障!{发表周期多数(50％一75％)为5～9个月，；少数(20％-45％)为1—5个月，极少数(0～7％)为15—30天}!及时发表科技论文，是尽早实现其社会效益的前提，也是作者创造性劳动得到尊重，为在世界上取得“优：先权”的保障，因为发明、发现的“优先权”通常是以出版时间为准的。因此，本刊把尽快发表作者的论文，视为》自己的神圣职责。；确保论文质量是论文早日发表的条件。作者发表论文总是要反映自己在工作中有所发明、有所发现和有；所创造的成绩，而不是去暴露自身的“缺欠”和“毛病”。换言之，作者发表论文总是要为自己“争光”，而不是让f自己“蒙羞”。因此，作者投稿之前，除了自己要反复检查外，一定要多请您周围的同事、专家挑“毛病”，把“毛《病”消灭在投稿之前，再投本刊才能发表得快。如果本刊挑出毛病，再请作者修改，反复“折腾”，不仅消耗双方{精力。而且必然延长发表时间。保证质量的基本要求就是论文要做到“齐、清、定”。“齐”即文字、表格、图片等齐：全．并符合本刊《投稿须知》的各项要求；“清”即文字、图片打印清楚，不得有模糊不清的图片(包括上面的文；字和数字)；若有彩色图片及彩色曲线，请转化为清晰的黑白图片和黑色曲线，并清除图片和曲线上的背景，便；于排版和复制；“定”即做到稿件内容(文字、表格、图片等)完整，无需再作增删修改。}来稿请用Word排版．用电子邮件发到本部电子信箱(E—mail：gpsys@263．net)。≠本刊收到作者来稿后，都会在3日(遇公休日顺延)内发出“收稿通知”。因此，作者发送稿件后7日以上都{没有消息。一定要及时来电查询。l～篇论文出版，常常需要反复沟通“作者一编辑部一审者一编辑部一作者”之间的联系．其中与作者的联；系是最重要的一环，一旦脱节．必然中断编辑过程。因此作者来稿时。务必将联系人的正确的姓名和详细地；址、办公室电话、手机号码、传真号码和电子信箱等(通讯方式要尽可能全)告诉编辑部，以便能与您及时联系。；否则，由此而产生的不良后果由作者自已负责。本刊发表论文的宗旨是学术交流，提倡“高效、保质、宽容”精神，而不是应付“评职称”、“拿文凭”等。《光谱实验室》编辑部 分光光度法测定3种颜色桑葚中的总多酚作者：闫祝炜，鹿毅，杨涛，YANZhu-Wei，LUYi，YANGTao作者单位：新疆产品质量监督检验研究院,乌鲁木齐市新华南路167号,830004刊名：光谱实验室英文刊名：CHINESEJOURNALOFSPECTROSCOPYLABORATORY年，卷(期)：2011,28(1)参考文献(5条)1.陈小全;周鲁超声波作用下桑葚红色素的提取及稳定性实验[期刊论文]-西南民族大学学报（自然科学版）2004(04)2.霍琳琳;苏平;吕英华分光光度法测定桑葚总花色苷含量的研究[期刊论文]-酿酒2005(04)3.田文礼;孙丽萍;董捷中国农业科学院蜜蜂研究所[期刊论文]-食品科学2007(02)4.刘顺航;孟宪军;牛涛葡萄籽中总多酚成分的测定[期刊论文]-中华中医药杂志2007(10)5.陈丛瑾;胡华宇;黎跃马占相思树叶中总多酚的溶剂回流提取工艺[期刊论文]-光谱实验室2008(05)本文读者也读过(1条)1.严赞开.YanZankai仙人掌中多酚的分光光度法测定[期刊论文]-安徽农业科学2006,34(13)本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_gpsys201101080.aspx'