分光光度法测定板栗刺壳中的单宁含量

'33卷第3期西部皮革Vol.33No.62011年6月WESTLEATHER西部皮革Mar.2011第33卷分光光度法测定板栗刺壳中的单宁含量11,2*111高龙，王全杰，许长通，张姝，范怀林（1.烟台大学化学生物理工学院，山东烟台264005；2.国家制革技术研究推广中心，山东烟台264005）摘要：采用显色分光光度法测定板栗刺壳中单宁的含量的方法。在弱碱性条件下，板栗刺壳中单宁与钨酸钠-磷钼酸形成稳定的蓝色配合物，在766nm处测定显色液的吸光度确定单宁的含量。以单宁酸为标样，单宁量在0.0004～0.002mg/mL范围内服从比耳定律，回归曲线方程Y=47.913X-0.0503，相关系数R2=0.997。关键词：板栗刺壳；单宁；钨酸钠-磷钼酸；分光光度法中图分类号：TQ94；TS57文献标识码：A文章编号：1671-1602（2011）6-0016-04QuantitativeDeterminationofTannininChestnutShellThornsbySpectrophotometry11,2*111GAOLong,WANGQuan-Jie,XUChong-tong,ZHANGShu,FANHuai-lin(1.ChemistryandBiologyCollege,YaitaiUniversity,Yantai264005,China;2.StateResearchandPromotionCenterofLeather-makingTechnology,Yantai264005,China)Abstract:Spectrophotometrydeterminationoftannincontentinchestnutshellthornswasestablishedwithsodiumtungstate-phosphomolybdateacid.Underweakalkalinecondition,tanninandsodiumtungstate-phosphomolybdateacidcanformastablebluecomplex,whoseabsorbancecanbemeasuredat766nmtodeterminethetanninconcentration.Withtannicacidasthestandardsample,Beer′sLawisobeyedintheconcentrationrangeof0.0004-0.002mg/mLoftannin,theregressionequationwasY=47.913X-0.0503andthecorrelationcoefficientwas0.997.Keywords:chestnutshellthorns;tannin;sodiumtungstate-phosphomolybdicacid;spectrophotometry板栗（Castaneamollissima创造更多的经济效益就显得很有本文通过钨酸钠-磷钼酸显Blume）属壳斗科（Fagceae）栗属乔意义。色分光光度法测定板栗刺壳中的木经济植物，主要分布于北半球温单宁是一类多元酚化合物，具单宁含量，旨在寻找一种简便、准带及亚热带。我国大部分地区均有有多种生物活性，是皮革鞣制栲胶确的测试方法；同时，为通过生产[2~4]分布，2005年底总产量达80万吨的主要成分。大量研究表明，栲植物栲胶，实现板栗刺壳的资源化[1]以上，据粗略统计，2010年产量达胶与其它无机或有机鞣剂结合鞣，利用提供一定的理论基础。120余万吨，因此如何充分利用板可以获得较高的成革收缩温度，成1实验部分栗加工生产中大量废弃的板栗壳，革的性能也基本接近铬鞣革，从而[5~7]达到少铬或无铬排放的目的。但1.1仪器与试剂是我国缺乏生产栲胶的优质原料，752单光束紫外可见分光光栲胶产品的产量和质量还难以满度计（上海菁华科技仪器有限公收稿日期：2010-11-15足制革业的需要，急需寻找新的栲司）；石油醚（30～60℃沸程），基金项目：烟台大学大学生科技创新基金资助项目胶生产原料。NaOH，H3PO4，无水碳酸钠，钨酸16 第6期高龙，等：分光光度法测定板栗刺壳中的单宁含量材料·应用钠，磷钼酸，无水乙醇，单宁酸（C76H52O46），所用试剂均为分析纯，电子天平（万分之一），吸量管。[8,9]Folin-Denis显色剂：50g钨酸钠，10g磷钼酸，加入375mL蒸馏水溶解，再加入25mL85%的H3PO4，水浴回流2h，冷却后定容至500mL棕色瓶中保存待用。原料：板栗刺壳，2010年9月采自烟台牟平，去杂洗净后，置于恒温干燥箱中，60℃烘干，捣碎至图1最佳波长的选择60目备用。1.2实验部分准确称取单宁对照品5.9mg，用适量蒸馏水将其溶解，完全转移至500mL容量瓶中，加入蒸馏水定容至刻度，摇匀，得0.0118mg/mL标准溶液。称取20g板栗刺壳粉末放入250mL锥形瓶中，加入蒸馏水浸提3次，每次2h，过滤，洗涤滤渣，合并滤液和洗液，得板栗刺壳单宁提取液418mL。准确移取一定量的单宁标准溶液或板栗刺壳单宁提取液于25mL容量瓶中，加入3.0mL显色剂，图2显色剂用量的选择用蒸馏水定容至刻度，充分摇匀，见图1。标准溶液显色后的吸光度影响很静置20min后，以空白试剂（0.0由图1可知：单宁标准溶液在小，本试验选用Folin-Denis显色mL单宁标准液）作参比，用1cm766nm附近有最大吸收，本实验选剂3.0mL。比色皿在一定波长处测其吸光度。取766nm为测量波长。2.3显色pH的选择2.2Folin-Denis显色剂用量的选取5个25mL容量瓶，用吸量2结果与讨论择管加入1mL单宁标准溶液，加入2.1测定波长的选择取5个25mL容量瓶，用吸量3.0mL显色剂，再分别加入1.0用吸量管吸取1.0mL的单宁管加入1mL单宁标准溶液，再分mL，2.0mL，3.0mL，4.0mL，5.0mL标准溶液按于25mL容量瓶中，再别加入1.0mL，2.0mL，3.0mL，4.0饱和NaCO3溶液，定容，摇匀，放置加入3.0mL显色剂，用蒸馏水定容mL，5.0mLFolin-Denis显色剂，定20min，以蒸馏水为参比测其吸光至刻度，用1cm比色皿，以试剂空容，摇匀，放置20min，以蒸馏水为度。白为参比溶液，在波长700～820参比测其吸光度。由图3可知：Na2CO3溶液用量nm之间每隔6mL测一次吸光度。由图2可知：Folin-Denis显色在2.5～4.0mL范围内，对标准溶得单宁标准溶液显色后扫描曲线剂用量在2.5～3.5mL范围内，对液显色后的吸光度影响很小，本试17 材料·应用西部皮革第33卷验选用3.0mL。2.4显色时间的选择用吸量管吸取1.0mL的标准溶液于25mL容量瓶中，加入3.0mLFolin-Denis显色剂，再加入3.0mLNa2CO3摇匀，显色不同时间后测定吸光度。由图3可知：在15min以后，显色时间对标准溶液显色后的吸光度影响较小，本试验选用显色时间20min。2.5单宁标准曲线的绘制在6个25mL容量瓶中，用吸量管分别NaCO3体积/mL加入0.0mL，1.0mL，2.0mL，3.0mL，4.0mL，图3pH的选择5.0mL，单宁标准液，分别加入3.0mLFolin-Denis显色剂，再加入3.0mL饱和Na2CO3溶液，用蒸馏水定容至刻度，摇匀放置20min，以试剂空白（即0.0mL单宁标准溶液）为参比溶液，在766nm波长下，测各溶液吸光度。以单宁质量浓度为横坐标，吸光值A为纵坐标绘制标准曲线图。得标准曲线方程Y=47.913X-0.0503，相关系数R2=0.997，线性范围为：单宁质量浓度0.0004～0.002mg/mL。2.6单宁含量的确定准确移取一定量板栗刺壳单宁提取液，稀释一定倍数后，定容至25mL容量瓶，加入3.0mL显色剂，3.0mL饱和Na2CO3溶液，静置图4显色时间的选择20min后，以空白试剂作参比，用1cm比色皿在766nm波长处测其吸光度。样品稀释250倍后测得吸光度为0.723，计算得提取液质量浓度为4.045mg/mL，板栗刺壳样品中单宁含量为8.45%。3结论采用了钨酸钠-磷钼酸显色分光光度法测定板栗刺壳中单宁含量的方法，最佳条件为：波长766nm，显色时间20min，25mL溶液需要Folin-Denis显色剂用量3.0mL，饱和Na2CO3用量为3.0mL。经测定，板栗刺壳样品中单宁含量为质量浓度/mg·mL-18.45%，具有一定的开发利用价值。图5标准曲线18 第6期高龙，等：分光光度法测定板栗刺壳中的单宁含量材料·应用中的应用[J].皮革科学与工程，新疆无花果叶中的单宁[J].分析试验参考文献：2007，17（2）：34-41.室，2009，28：188-190.[1]蔡荣，虢佳花，祁春节.板栗产业发展现[7]林栩.植物单宁[J].中国皮革，2007，36[9]张纵圆，张玲，彭秧.分光光度法测定新状、存在问题与对策分析[J].中国果菜，（7）：5-6.疆紫花苜蓿中单宁[J].理化检验-化学2007，1：52-53.[8]张纵圆，李茂华，张涛.分光光度法测定分册，2010，46（1）：99-100.[2]陈新民，李宏，杨磊，等.单宁及其生物活性[J].植物杂志，1994，（5）：8.[3]毕良武，吴在嵩，陈茹鸿，等.单宁在抗第一作者简介艾滋病研究中的应用[J].林产化工通高龙（1988-），男，山东沂水人，中共党员，高分子讯，1998，（2）：11-15.[4]王书园，俞凌云，朱云.单宁的分析研究材料与工程专业07级本科生，师从王全杰教授，研究方现状[J].江苏调味副食品，2008，25（5）：向为天然产物的提取及其在皮革中的应用。在大学本科16-19.期间负责完成大学生科技创新基金项目两项，发表多篇[5]Herumuuto,Hansuugenorukukurits.学术论文，现任烟台大学大学生科技协会会长，曾获得Aidsfordissolovingdyesandprinting“挑战杯”竞赛国家级铜奖一项，省特等奖、一等奖各一compositionscontainingthemforim-项。先后参加了第五期、第六期全国制革专业研究生动provedlevelingandcoloryield[P].JP手能力学习班，并参与了第八届全国皮革化学品会议的0649775,22Feb,1994.组织工作。[6]梁发星.栲胶在无铬少铬结合鞣※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※广东盛方化工有限公司诚聘英才※※※※※※※※※※制革工程师※※※※皮革技术员※※※※※※※——————工作职责——————※——————工作职责——————※※1、皮革化工市场开发与维护；※※1、皮革化工市场开发与维护；2、皮革化工产品推广应用试验。※※2、皮革化工产品推广应用试验。※※——————应聘条件——————※※——————应聘条件——————※※1、大专以上学历，轻化工程（皮革方向）等专业，欢迎应届毕业生；※1、大专以上学历，制革类相关专业；※2、制革专业知识扎实；※※2、八年以上制革或皮革化工企业相关工作经验；3、具有良好的团队合作精神，踏实苦干，能适应出差、驻厂工作。※※3、丰富的制革应用技术服务工作经验，熟悉水场及※※涂饰技术；——————公司待遇—————※※※4、具有较强的沟通、组织、协调及管理能力；1、工资：面议；※※※5、具有良好的团队合作精神，能适应出差、驻厂工2、福利：享受公司各种津贴及社保等福利待遇；※※作。3、公司提供食宿。※※※——————公司待遇——————联系方式：※※※1、电话：0750-6802287，13686925211※1、工资：面议；※2、传真：0750-6802287※※2、福利：享受公司各种津贴及社保等福利待遇；3、联系人：蒋小姐※※3、公司提供食宿。4、电子邮箱：jj2389688@163.com※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※※19'