可见分光光度法测定药物酚磺乙胺的含量

'第31卷第1期沧州师范学院学报Vol．31，No．12015年3月JournalofCangzhouNormalUniversityMar．2015可见分光光度法测定药物酚磺乙胺的含量杨凤珍，袁华，张文育(沧州师范学院化学与环境科学系，河北沧州061001)摘要:酚磺乙胺本身无色，在碱性条件下易被空气中的氧氧化成有色化合物，并在470nm处有最大吸－1收，根据其吸收强度可对酚磺乙胺进行定量测定．其工作曲线线性范围为5．0-100．0μg·mL，线性回－1归方程为:A=0．0021C－0．00294(C的单位为μg·mL)，相关系数r=0．9976，检出限为3．0μg·－1mL．该测定方法可用于针剂药物中酚磺乙胺的定量测定，结果令人满意．关键词:分光光度法;酚磺乙胺;碱性条件中图分类号:O657．3文献标识码:A文章编号:2095-2910(2015)01-0047-03DOI:10.13834/j.cnki.czsfxyxb.2015.01.013酚磺乙胺(etamsylate)，分子式C10H17NO5S，又名止血敏，一种止血药物，能使血管收缩，降低毛细血管通透性，并能增强血小板聚集性和粘附性，促进血小板释放凝血活性物质，缩短凝血时间，达到止血效果．临床上酚磺乙胺常用于预防和治疗外科手术出血过多，血小板减少性紫癜或过敏性紫癜以及其他原因引起的出血，如脑出血、胃肠道出血、泌尿道出血、眼底出血、牙龈出血、鼻衄等．为此建立灵敏、快速、简便的酚磺乙胺［1-2］的测定方法具有非常重要的实际意义．目前酚磺乙胺的测定方法主要有紫外分光光度法、高效液相色谱［3］［4-5］［6］［7］法、电化学分析法、荧光分析法等．利用可见分光光度法对酚磺乙胺进行测定也有报道，但该方法是在用铁氰化钾-FeCl3体系对酚磺乙胺进行间接测定，所用试剂较多，方法相对复杂．利用酚磺乙胺在碱性条件下对可见光的吸收情况对其进行定量测定目前未见报道．酚磺乙胺在碱性条件下易被空气中的氧氧化成有颜色的化合物，根据其在470nm处的吸收强度对酚磺乙胺进行定量测定，方法简单，仪器操作简便．其－1－1工作曲线线性范围5．0-100．0μg·mL，检出限为3．0μg·mL．用于针剂药物中酚磺乙胺的定量测定，结果令人满意．1实验部分1．1仪器760双光束紫外分光光度计(上海精密科学仪器有限公司);722可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司);85-2A双向恒温磁力搅拌器(江苏省金坛医疗仪器厂);PHSJ-3F型实验室pH计(上海精密科学仪器有限公司)．1．2试剂与样品1．2．1试剂实验中所用试剂均为分析纯．酚磺乙胺标准品由中国药品生物制品检定所购买，酚磺乙胺针剂注射液由药店购买．1．2．2标准品的配制准确称取0．0150g酚磺乙胺标准品(精确至0．0001g)，用蒸馏水定容于100mL棕色容量瓶中，然后用pH=9．2的Na2CO3－NaHCO3缓冲溶液逐级稀释，以得到不同浓度系列的酚磺乙胺标准溶液．收稿日期:2014-10-17基金项目:2013年度河北省科技厅课题“促凝血药物酚磺乙胺的光度法检测研究”，编号:No．13274803．作者简介:杨凤珍(1963-)，女，河北沧县人，沧州师范学院化学与环境科学系教授，理学硕士，清华大学化学系分析中心访问学者，研究方向:药物化学发光分析研究．·47· 1．2．3样品的准备用移液管准确移取一定体积酚磺乙胺针剂注射液于250mL棕色容量瓶中，用蒸馏水定容，配成一定浓度的样品溶液．然后用pH=9．2的Na2CO3－NaHCO3缓冲溶液逐级稀释，以得到不同浓度系列的酚磺乙胺样品溶液，使所测样品浓度在工作曲线范围内．1．3实验方法准确移取适量的酚磺乙胺标准溶液或试样溶液于25mL容量瓶中，用pH=9．2的Na2CO3－NaHCO3缓冲溶液定容至刻度，摇匀，转移至50mL烧杯中用磁力搅拌器在800转/分钟的条件下不断搅拌，20分钟后，以试剂空白为参比，用1cm比色皿于470nm处测定其吸光度．2结果与讨论2．1最佳条件的选择2．1．1最大吸收波长的选择酚磺乙胺在中性及酸性条件下呈现无色状态，但在碱性条件下易被空气中的氧氧化成棕黄色化合图1酚磺乙胺碱性水溶液的可见吸收光谱图物，该物质在紫外可见分光光度计上扫描图谱如图1所示，在460nm-480nm处吸收最大，故定量分析选择波长为470nm．2．1．2最佳pH值及搅拌放置时间选择酚磺乙胺在中性及酸性条件下呈现无色状态，但在碱性条件下易被空气中的氧氧化，变成棕黄色化合物，并在470nm处有最大吸收，其变化程度与溶液pH值及搅拌放置时间密切相关．实验发现，当溶液pH＜8．0时，该物质产生最大吸光度需要时间较长，且最大图2搅拌放置时间及溶液pH值对酚磺乙胺氧化产物吸光度的影响吸光度值相对较小，不宜用于定量分析．(系列1pH=8．0，系列2pH=8．5，系列3pH=8．8)当溶液pH分别为8．0、8．5、8．8时，随着pH值的增大，氧化产物产生的吸光度逐渐变大，且达到最大吸光度所需的搅拌放置时间逐渐减少，如图2所示．当溶液pH分别为9．1、9．2、9．4、9．6时，如图3所示．随着pH值的增大，氧化产物产生的最大吸光度亦逐渐增大，达到最大吸光度所需的搅拌放置时间逐渐减少，但当pH=9．2时，吸光度达到最大值，此时达到最大吸光度所需的搅拌放置时间为20min，最大吸光度值维持时为20min．之后随着溶液pH的增图3搅拌放置时间及溶液pH值对酚磺乙胺氧化产物吸光度的影响大，虽然达到最大吸光度所需的搅拌放(系列1pH=9．1，系列2pH=9．2，系列3pH=9．4，系列4pH=9．6)置时间越来越少，但吸光度最大值不再·48· 增大反而减小，最大吸光度值维持时间也逐渐减少，故实验中溶液pH值不宜过大．综合考虑吸光度值、达到最大吸光度所需的搅拌放置时间以及最大吸光度值维持时间三方面因素，选择溶液pH=9．2为最佳pH值，搅拌时间20min，且吸光度测定在20min之内完成．2．2干扰研究为了考察该方法对实际药物质量检测的应用可靠性，对常用药剂其它成分如NaCl、HCl、Na2SO3、葡萄－1糖、淀粉等进行干扰研究，分别向20．0μg·mL酚磺乙胺溶液中加入上述各种物质，使其浓度分别达到2．－10mg·mL，发现100倍上述物质无干扰．2．3标准曲线及检出限－1在选定的实验条件下，酚磺乙胺的浓度在5．0-100．0μg·mL范围内与吸光度成良好的线形关系．其线－1性回归方程为:A=0．0025C－0．0094(C的单位为μg·mL)，相关系数r=0．9976．按照分析步骤，平行测定11份试剂空白溶液，由空白溶液测得值标准偏差的3倍除以工作曲线回归方程的斜率，计算其检出限为－13．0μg·mL．2．4样品测定准确移取适量酚磺乙胺样品储备溶液，按实验1．3配置所需浓度，进行吸光度测定，测定结果见表1．同时应用本法对样品进行加标回收检验，回收率见表1中，结果令人满意．表1针剂酚磺乙胺含量的测定a样品标示值/mg测定含量/mgＲSD加入量/mg测得总量/mg回收率/%针剂1500487．03．1250．0730．097．2针剂2500490．02．8250．0735．098．0aＲSD:相对标准偏差(n=5);针剂1、2均由山东方明药业集团股份有限公司生产．2．5反应机理酚磺乙胺注射液本身无色，其水溶液在中性及酸性条件下也呈现无色状态，但在碱性条件下易变成棕黄色，其可能的机理为酚磺乙胺中的2，5-二羟基苯磺酸在碱性条件下被溶解氧氧化成醌类化合物，显示棕黄色．如图4所示．图4酚磺乙胺在碱性条件下与溶解氧反应方程式3结论利用酚磺乙胺在碱性条件下对可见光的吸收对其含量进行测定，其可能的反应机理为酚磺乙胺中的2，5-二羟基苯磺酸在碱性条件下被溶解氧氧化成醌类化合物显示棕黄色，根据其氧化产物对470nm光的吸收，测定酚磺乙胺的含量，方法简单，不需昂贵的仪器，且操作简便．用于针剂药物中酚磺乙胺的定量测定，结果令人满意．为实际应用中酚磺乙胺的生产检验提供了一种简单、方便的检测方法，具有一定的实际意义．(下转第64页)·49· ［9］李佐邦，肖继君，丁晓君．聚酰亚胺型耐热感光高分子的热分解动力学［J］．河北工学院学报，1989，(01):40-48．［10］李佐邦，肖继君，白宗武．耐热感光高分子的合成与应用［J］．河北工学院学报，1988，(3):68-75．TheＲesearchonHolographicDataStorageCharacteristicsAfterPMMA/PQPhotosensitivePolymerDopedwithP-nitroanilineQINXu(TheAgricultureandForestryTechnicalCollege，LongnanTeachersCollege，Chengxian，Gansu724500，China)Abstract:Thispaperdescribesanapproachtowardimprovingthecharacteristicsofaphotopolymerforholo-graphicdatastorageapplicationonthebasisofdifferentnitroanilinestructure，suchasN，N-dimethyl-4-nitroaniline(DMNA)，N-methyl-4-nitroaniline(MNA)and4-nitroaniline(pNA)，byaddingPMMA/PQphotosensitivepoly-mersandusinglaserlightofawavelengthof532nm，withdifferentopticalexperiments，forexample，thediffractionefficiencyandmeasureddynamicstoragerange(M#)．Thematerialpreparedintheholographicrecordingcharac-teristicsisexplored．Theresultsshowsthat:thediffractionefficiencyofincorporationnitroanilinephotosensitivepolymermaterialsanddynamicstoragerangearesignificantlyimprovedwiththeincorporationofthediffractioneffi-ciencyofthesampleDMNAincreasingfrom38%to71%，andthedynamicstoragerangeupgradedfrom2．7to7．3．Keywords:holographicrecording;poly(methylmethacrylate);nitroaniline［责任编辑:尤书才］櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅(上接第49页)参考文献:［1］许自超，李晓哗，施炯，等．紫外分光光度法测定兔胃粘膜组织中止血敏含量［J］．分析化学，1994，(4):420．［2］阳泽平，刘忠芳，刘绍璞．重铬酸钾氧化紫外分光光度法测定酚磺乙胺［J］．药物分析杂志，2008，(4):327-329．［3］任心慈，费玉全．高效液相色谱法测定酚磺乙胺片的含量［J］．安徽医药，2009，(5):506-508．［4］汪振辉，张岱，张岩．聚对氨基吡啶化学修饰电极上酚磺乙胺的电化学行为及其溶出伏安法测定［J］．分析化学，2001，(1):83-86．［5］韩慧，李锦州，孙仁霞．聚吡咯-酰基吡唑啉酮复合膜修饰玻碳电极测定酚磺乙胺的研究［J］．化学与黏合，2012，(2):19-22．［6］陈亚红，田丰收，范晓瑞．酶催化荧光法测定酚磺乙胺［J］．药物分析杂志，2011，(5):973-976．［7］潘自红，马丹丹，李子贺，等．FeCl3-铁氰化钾体系分光光度法测定酚磺乙胺［J］．分析试验室，2013，(1):111-113．DeterminationofEthamsylatebyUsingaVisibleSpectrophotometryMethodYANGFeng-zhen，YUANHua，ZHANGWen-yu(DepartmentofChemistryandEnvironmentalscience，CangzhouNormalUniversity，Cangzhou，Hebei061001，China)Abstract:Colorlessetamsylatecanbeoxidizedbyoxygenintheairintothecoloredcompoundinalkalinecon-ditionsandamaximumabsorptionat470nm．Theetamsylatecontentcouldbedeterminedbytheabsorptionintensi-－1－1ty．Thequantitationrangeisfrom5．0to100．0μg·mLwithadetectionlimitof3．0μg·mLforetamsylate．Theproposedmethodwassuccessfullyappliedtothequantitationofetamsylateininjections．Keywords:spectrophotometry;etamsylate;alkalinecondition［责任编辑:尤书才］·64·'