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'紫外分光光度法在药物分析中的研究进展紫外分光光度法是通过可见一紫外分光光度计,产牛可见光、紫外线照射某些不同物质,由于不同浓度的吸收光谱的不同,可获得不同吸收光谱的曲线⑴。紫外与可见光区的光谱•主要是由具有共辘结构有机化合物分子的电子跃迁而产生的。因此分光光度法对于这些化合物的定性分析、定量分析、结构鉴定等具有重要意义。分光光度法是药物分析中应用较多的一类方法。1.定性方法及应用一些药物分子本身带有吸收紫外或可见光的基团,在选择合适的溶剂之后做吸收光谱,在吸收峰入nu.处溶剂及其它干扰组分的吸收很小,这时则可直接利用入max进行测定该药物⑵。因此一般采用紫外分光光度法对总提取物或部分提取物中具有紫外吸收化合物的分析,并可对一些中药材进行真伪鉴别。1.1比较光谱一致性袁久荣⑶等在对中草药进行紫外光谱测试研究中发现一些不同中药材的同一种溶剂浸泡液的紫外吸收光谱出现相同的谱图像,即岀现相同的紫外吸收峰数目及峰位值,因此无法实现鉴别。他们以屮医药理论为基础.遵照“物质相似溶于相似”及混合物各组分的紫外吸收光谱具叠加性原理,建立了中药鉴别的紫外谱线组法。不同种中药及其复方制剂的各种成分的质和量不尽相同,则其对应的各浸泡液中成分应有差界,由各种成分的紫外吸收光谱叠加而成的紫外吸收光谱应呈现出差异性和特异性.其紫外吸收谱线组上的全部吸收峰数目及峰位值应有差异。1.2比较最大吸收波长及吸收系数或吸收度比值的一致性赖德有⑷研究了鸡血藤的紫外光谱,结果表明,只有在(279±l)nm波长处有最大吸收者为鸡血藤,否则为伪品。在此波长处吸收度达0.45以上,为合格品,否则为劣品。2.定量方法及应用在遵循朗伯比尔定律的基础上,紫外分光光度法可以采用多种研究方法,如双波长、导数、显色及层析一紫外联用等方法,对药物中相关成分进行定量分析。2.1单波长法
张俊贞⑸等用TU-1901分光光度计对盐酸苯海拉明糖浆中主药的含量进行测定。结果表明,盐酸苯海拉明糖浆在415nm波长左右有最大吸收,并且吸收值与盐酸苯海拉明屮主药含量在10〜50ug/mL范围内有良好线性关系,r=0.9994;平均回收率为101.4%。日内、日间RSD分别小于1.89%和3.12%。从分析方法的精密度,样品的稳定性,浓度与吸收值之间的线性关系及回收率来看,紫外分光光度法测定盐酸苯海拉明糖浆中主药的含量是一个可行的分析方法。2.2双波长法杨继章⑹等采用紫外双波长分光光度法测定加替沙星和替硝卩坐两种药物的含量,以考察注射用加替沙星在替硝畔葡萄糖注射液中配伍的稳定性。加替沙星测定波长为290.3nm,参比波长为344.3nm;替硝哇测定波长为317.9nm,参比波长为369.3nm。加替沙星线性范围为4-8mg/L,r二0.9996,替硝卩坐线性范围为10-20mg/L,"0.9998。加入相应量的加替沙星和替硝卩坐,加替沙星的平均回收率为102.9%,RSD二1.21%;替硝卩坐的平均回收率为102.1%,RSD二1.13%。2.3显色比值法一些药物能与某些显色剂进行反应而显色,所以如果显色剂选择适当,且具有专一性,就能避免分析过程中其它成分或杂质的干扰。在可见区,有机药物分析的显色反应涉及到离子缔合反应、重氮.偶合反应、荷移配位反应、氧化还原反应、金属离子作显色剂的显色反应等几大类⑺91。女山安乃近在80°C加热条件下可将磷钳酸还原为磷钳蓝,在700run处有最大吸收,可用于安乃近制剂的含量分析"叫半夏药材采用超声提取、依据酸性染料比色法的原理,在pH二5・4缓冲液中加入0.1漠麝香草酚蓝显色剂,可在416nm处测定药材中总生物碱的含2.4导数法由于同一种中药或中成药所含化学成分的质和量基本相同,故其导数光谱应有一定的相似性,而由于导数光谱具有可消除干扰、分辨率高的特点.所以不同种中药或中成药的导数光谱因所含化学成分质和量不同而有差界,故可作为中药和中成药质量鉴定的手段之一。姚文[⑵等采用碱化一紫外分光光度法及一阶导数紫外分光光度法,对青黛药材及青黛超临界提取物进行含量测定。样品经磺化反应后,用零阶光谱在623run波长处测定靛蓝的含量,用一阶导数紫外分光光度法在482nm波长处测定靛玉红的含量。药典法选择610nm波长测定靛蓝,通过扫描发现:在610nm波长处,靛玉红也有吸收,由于青黛药材中,靛蓝与靛玉红含
量相差较大(约10倍),靛蓝测定的线性范围内靛玉红的影响可忽略,故在测定青黛药材吋可以采用此波长。而在超临界提取中,以靛玉红为主要成分,两者之间的差距缩小,因此,用药典法势必产生较大误差,故而选择623nm波长测定靛蓝的含量,而在此,靛玉红儿乎没有吸收。一阶导数光谱中,在482nm波长处,靛蓝的振幅几乎为零,因此选择482nm为靛玉红的测定波长。2.4层析分离技术和紫外分光光度法的联合使用常军民[⑶等采用薄层分离新疆鼠尾草中6,7-去氢罗列酮,于330run处采用紫外分光光度法测定其含量.含量为0.37%,在10-15Pg的范围内具良好的线性关系,r=0.9988,平均回收率为98.3%,RSD二2.58%。3.小结紫外分光光度法作为药物的一种常用分析方法,在单一成分的测定屮,具有很好的稳定性、重现性,而且快速、简捷,结果准确。对于成分复杂的药物,由于仪器自动化,数据计算机化处理,应用紫外光光度法进行多组分含量测定更加简便。从目前紫外分光光度法法在药物分析中的发展趋势来看,随着现代分析仪器的发展和电子计算机的应用,其发展方向是采用专屈性较强的分析方法,不经过分离直接进行对药物成分或含量进行测定。比如:多波长法、导数法、偏最小二乘法、小波变换法、人工神经网络法等[⑷。参考文献:1.王雷,杨新建,寇欣•紫外分光光度法在屮药分析屮的应用进展[J]・天津药学,2003,15(5):62・632.郑健.紫外一可见分光光度法在药物分析中的应用[J].中国医学物理学杂志,23(6):432-4333.良久荣主编冲药鉴别紫外谱线组法及应用•北京:人民卫生出社,1999,130-1704.赖德有.紫外分光光度法测定鸡血藤的吸收度•药物分析杂志,1998,18(10):545.张俊贞,冯锐等.紫外分光光度法测定盐酸苯海拉明糖浆中主药的含量[J].中国药房,2008,19(22):1741-17426.杨继章,刘瑞琴,杨树民•紫外双波长分光光度法考察注射用加替沙星在替硝畔葡萄糖注射液中配伍的稳定性[J]冲国医院药学杂志.2006,26⑼:1061・10627.HowellJ-A,SuttonR—E.Analehem[J],1998,70:107R8.屮国药学会药物分析专业委员会.屮国药学杂志卩],1997,32(11):7059.GilpinR-K,PaehlaL一A.Andchem[J],1997,69(12):14510.马卫兴,韩冬梅.安乃近针剂、片剂含量的分光光度法测定叫.中国医药工业杂志.1996,27(7):321-32211.王宇,张明,于超,等.紫外可见分光光度法测定不同产地半夏药材中生物碱的含量[U]・重庆中草药研究,2001,43:3412•姚文,王晓波,袭荣刚.青黛超临界提取物中靛蓝和靛玉红的含量测定研究
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