紫外可见分光光度法.ppt

'第十三章紫外可见分光光度法紫外可见分光光度法 第一节概述通过测定被测物质在特定波长或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法称为分光光度法，包括紫外可见分光光度法、红外分光光度法、原子吸收分光光度法等。 灵敏度高准确度较高适用范围广操作简便快捷，设备成本低。分光光度法的特点 第二节基本原理一、吸收光谱的分类10～200nm的远紫外光谱；200～400nm的近紫外光谱；400～750nm的可见光谱；0.75～2.5um的近红外光谱2.5～5.0um的中红外光谱5.0～1000um的中红外光谱 二、溶液颜色与光吸收的关系溶液颜色决定与吸收光的颜色溶液的颜色与吸收光的颜色互补最大吸收波长：指某物质光的吸收曲线中光吸收程度最大处的波长 三、光的吸收定律光的吸收定律：A=lg（I0/It）=kbclg（I0/It）——光通过溶液时被吸收的程度,通常用A表示，称为吸收度k——比例系数b——液层厚度C——溶液的浓度 三、光的吸收定律光的吸收定律：A=kbc朗伯定律：光的吸收与吸收层厚度成正比比耳定律：光的吸收与溶液浓度成正比透射比：透过光强度与入射光强度之比。用T表示T=I0/It相关公式:A=lg（I0/It）=lg(1/T) 四、摩尔吸收系数摩尔吸收系数在入射光波长一定的条件下，溶液浓度为1mol/l、液层厚度为1cm时的吸收度。比吸收系数在入射光波长一定的条件下，溶液浓度为1%、液层厚度为1cm时的吸收度。反映物质对特定波长光的吸收能力 四、摩尔吸收系数精密称取干燥失重为5.0%的维生素B120.0075g，置50ml量瓶中，加水溶解稀释至刻度，摇匀，定量稀释5倍后，照分光光度法于361nm处测得吸收度为0.580。已知本品药品标准给定的吸收系数为207，求其百分比含量。 四、摩尔吸收系数解： 五、吸收度的加和性P92A总=A1+A2+A3+A4+A5…… 六、光吸收定律的使用范围偏离吸收定律的原因入射光为非单色光溶液的化学反应。 第三节目视比色法用目力观测比较溶液的深浅，确定物质含量的分析方法优点：简单、操作方便缺点：准确度差应用：限量分析。 第四节紫外可见分光光度仪器一主要部件P96光源——单色器——吸收池——检测器——测量系统 第四节紫外可见分光光度仪器一主要部件光源：氘灯200-375和碘钨灯320-2500单色器：入射狭缝、准光器、色散器、投影器、出射狭缝吸收池：玻璃吸收池、石英吸收池检测器：光电转换设备测量系统：放大器和结果显示装置。 第四节紫外可见分光光度仪器二、结构单波长单光束分光光度计：721、751单波长双光束分光光度计：自动消零，操作方便；能减小干扰和波动双波长分光光度计：有干扰组分时的定量分析三、紫外可见分光光度计型号与性能四、使用五、检验与维护 第五节可见分光光度法分光光度法利用物质本身对紫外可见光的吸收进行测定。利用显色剂进行显色，生成有色化合物后测定。 第五节可见分光光度法一|、显色反应——络合、氧化还原要求：1、选择性好2、灵敏度高3、有色络合物4、组成恒定，化学性质稳定5、显色剂颜色与生成物差别大6、显色反应条件易于控制。 第五节可见分光光度法二、显色剂分类：无机、有机、多元配合物三、多元配合物显色体系 第五节可见分光光度法四、显色条件的选择显色剂用量溶液酸度显色温度显色时间溶剂消除共存离子干扰 第五节可见分光光度法五、光度测定条件的选择入射光波长选择：考虑灵敏度、选择性吸光度范围控制理想的吸收度范围0.2～0.8调整方法1、调节溶液浓度2、使用不同浓度的吸收池六、定量分析方法——工作曲线P125七、误差——方法误差、仪器误差P130 第六节紫外分光光度法一、概述近紫外200-400nm远紫外10-200nm二、基本原理P132——电子跃迁三、定性分析P141利用光谱吸收峰的数目、峰位置、吸收强度等特征进行物质的鉴定。常用与标准图谱对比的办法进行定性。四、定量分析——与可见光光度法相同不同点：不需显色剂特点：快速、简便、灵敏度高、重现性好 原子吸收分光光度法 一、简介——方法原理原理：1、都基于被测物质对光的吸收－以朗伯特－比耳定律为基础；2、基于测量吸收光谱峰值吸收系数的相对定量方法。特点： 一、简介——方法特点与应用范围特点：1、灵敏度高。2、选择性好。3、测定元素范围广 二、仪器组成和结构 二、仪器组成和结构1、仪器组成光源——锐线光源原子化系统——火焰、无火焰分光系统——反射镜、狭缝、色散元件检测系统——检测器、放大器、对数转换器、显示装置。2、有单光束和双单光束仪器之分。 三、浓度校准（计算）方法常用校准方法标准曲线法标准加入法内插法直接比较法 四、技术术语吸收灵敏度定义为在最佳实验条件下产生1％吸收信号（0.0044Abs）时水溶液中元素的浓度或绝对量。前者称为相对灵敏度，常用于火焰原子吸收分析；后者用于石墨炉原子吸收分析。为了与分析化学中一般灵敏度概念相区别，现国内普遍采用分别用特征浓度和特征量代替。。'