一阶导数分光光度法测定洗涤液中三氯生的含量

'一阶导数分光光度法测定洗涤液中三氯生的含量李淼，金义光作者简介：李淼，女，硕士，实验师，主要从事药物新剂型和新技术研究，Tel：010-66931220，E-mail：kitten_lm@126.com*通讯作者：金义光，男，副研究员，博士，硕士生导师，主要从事新型药物传递系统的研究，Tel：010-66931220，E-mail：jinyg@sina.com,杜丽娜（军事医学科学院放射与辐射医学研究所，北京100850）摘要：目的建立一种测定洗涤液中三氯生含量的方法。方法用一阶导数紫外分光光度法消除洗涤液中其他成份的干扰，准确测定三氯生的含量。结果该方法准确度和精密度较高，三氯生高、中、低三个浓度的回收率分别为94.0％，98.4%，102.6％；RSD分别为0.74％，1.11％，0.24%。结论可以用一阶导数分光光度法测定某些含香精的洗涤液中三氯生的含量。消除香精对三氯生含量测定的干扰。关键词：三氯生；一阶导数分光光度法；洗涤液；香精中图分类号：R9文献标识码：A文章编号：DeterminationofTriclosaninCleaningSolutionsbytheFirst-orderDerivativeUltravioletSpectrophotometryLIMiao，JINYi-guang*，DULi-na(BeijingInstituteofRadiationMedicine,Beijing100850)ABSTRACT：OBJECTIVEToestablishamethodfordeterminationoftriclosanincleaningsolutions.METHODSTriclosanwasdirectlydeterminedwiththefirst-orderderivativeUVspectrophotometrytodiminishthedisturbanceofotheringredientsincleaningsolutions.RESULTSThefirst-derivativespectrophotometryshowedgoodaccuracyandrepetition.Theaveragerecoveriesathigh,mediumandlowconcentrationswere94.0％,98.4%and102.6％,respectively,withRSD0.74％,1.11％and0.24%(n=3).CONCLUSIONThismethodcanbeusedintheanalysisofsomecleaningsolutionscontainingbothtriclosanandsomeotherfragrantwithoutseparationprocess.Theinterferenceoffragrantinthepreparationwaseliminated.KEYWORDS：Triclosan;FIrst-orderderivativeUVspectrophotometry;Cleaningsolutions;fragrant三氯生（triclosan），化学名为三氯羟基二苯醚（2’,4,4’-tricloro-2-hydroxydiphenylether），汽巴精化有限公司生产，商品名为玉洁新。三氯生具有高效、广谱抗菌作用，并可持续发挥效力。目前世界上已有50多个国家应用三氯生于医用、日用产品中，我国也采用了三氯生抗菌剂和含三氯生的消毒剂[1]。欧共体（EEC）和GB7917-87标准规定化妆品中三氯生最大允许浓度质量分数为0.3％。因此，要求洗涤液4 中的三氯生的含量测定方法有高选择性和灵敏度。目前，对于低剂量的三氯生含量的测定方法，文献报道常用的有紫外可见分光光度法[2]、高效液相色谱法[3,4]和电化学法[5]。后两种方法操作复杂，对仪器要求较高。用紫外分光光度法测定三氯生含量，洗涤液中使用的香精经常会对测定产生干扰，故本研究采用一阶导数紫外分光光度法消除了香精的干扰，此方法简便、快速，易于推广，适用于其他含有香精的洗涤液中三氯生的含量测定。1材料与方法1.1仪器及材料紫外可见分光光度计（UV-2501，日本岛津）；三氯生为瑞士汽巴精化公司产品，含量大于99.5％；其余试剂都为分析纯；蒸馏水。洗涤液样品是本实验室模拟商品处方制备得到，其中含有常用香精和三氯生。1.2实验方法精密称取样品1.5g（精确至0.0001g），于10mL小烧杯中，加入3mL蒸馏水，搅拌使其分散均匀，倒入25mL分液漏斗中，用少量蒸馏水洗小烧杯两次，洗液并入分液漏斗中，加入10mL氯仿，剧烈振荡2min，静置2h以上，分出下层氯仿层于25mL烧杯中，放置20min使其澄清，从中取出1mL以无水乙醇稀释至10mL，进行紫外扫描，测其在294.6nm处的一阶导数值。1.3标准曲线的绘制准确称取0.3g三氯生晶体（精确至0.0001g），配成0.3％的三氯生氯仿溶液。精确吸取上述三氯生氯仿溶液1mL，以无水乙醇稀释至10mL，从中分别取出0.25、0.5、0.8、1.0、1.2、1.5mL，以无水乙醇稀释至10mL，测定各自在296.4nm处的一阶导数值。以浓度（µg·mL-1）对一阶导数值（Ａ）绘制标准曲线并回归成标准曲线方程。2结果与讨论2.1吸收光谱的绘制按1.2项下方法于200nm～400nm分别作样品和空白辅料的零阶（图1A）和一阶导数光谱图（图1B）。零阶光谱图中，三氯生在282nm处有明显的紫外吸收，但空白辅料在282nm处有一较小吸收，经考查是样品中加入的香精产生的干扰。而在一阶导数光谱图中，空白辅料在三氯生最大吸收波长294.6nm处的一阶导数值接近于零，对三氯生测定无干扰。故本文选择294.6nm为一阶导数分光光度法的测定波长。图1空白辅料和含三氯生样品的零阶及一阶紫外图谱A：零阶紫外扫描图谱；B：一阶导数紫外图谱4 1：空白辅料；2：洗涤液样品Fig.1UVspectraandthefirst-orderderivativecurvesofblankexcipientandtriclosanincleaningsolutions.A:ultravioletabsorptionspectra;B:thefirst-orderderivationcurves.Curve1:blankexcipient;Curve2:thesampleofcleaningsolutions.2.2不同溶剂对一阶导数值的影响分别用氯仿、二氯甲烷、环己烷、石油醚和乙醚作萃取剂。考察萃取效果和一阶导数值的大小。结果表明用乙醚作萃取剂，空白对照品一阶导数有吸收；二氯甲烷萃取后样品一阶导数值较小，说明萃取不完全；氯仿、石油醚和环己烷的萃取回收率较高，一阶导数值较大，而且空白对照品的一阶导数值在三氯生最大吸收波长处接近于零，都可用来作萃取剂。但环己烷和石油醚易挥发，其蒸汽与空气混合易形成爆炸物，而且对人体有麻醉作用，故不易使用。氯仿作溶剂更为普遍，所以本实验中选择氯仿作萃取剂。2.3pH值对一阶导数值的影响称取空白辅料和样品各三份，每份1.5g，加入3mL蒸馏水搅拌使其分散均匀，测其pH值约为4，用稀HCl和NaOH将其中两组分别调至pH3和6.5，用10mL氯仿萃取，以下操作同1.2。结果表明随着pH值的增加，样品和空白辅料的一阶导数值均增大，所以调节pH值对改变三氯生的一阶导数值没有太大意义。2.4标准曲线及线性范围在294.6nm处一阶导数分光光度法测定三氯生的标准曲线为：A=﹣9.18951×10-5－0.00192C(C：µg·mL-1)，相关系数r=0.9993，结果表明在7.5～45µg·mL-1范围内，三氯生浓度与一阶导数值线性关系良好。2.5回收率回收率及精密度实验：取洗涤液空白样品1.5g，加入精密配制的高、中、低3个浓度的三氯生溶液，每个浓度配制三个样品，于紫外分光光度计上分别测定其在294.6nm处一阶导数值。计算回收率和精密度，结果见表1。可见本方法的回收率和精密度较高。表1　三氯生的回收率及精密度测定结果.n=3Tab.2RecoveriesandRSDoftriclosanbyfirst-orderderivativeUVspectrophotometry.n=3Added/µg·mL-1Detected/µg·mL-1Recovery/％averagerecovery/％RSD/%24.122.995.094.050.7422.693.822.693.830.129.397.398.401.1129.899.029.899.032.333.2102.8102.60.2433.1102.533.2102.82.6稳定性实验按1.2项下实验方法配制洗涤液样品3份，放置0、2、4、6、8、24h后测定294.6nm处一阶导数值，结果表明其值在24h内稳定，吸收度几乎无变化，RSD为1.08%。4 2.7重现性配制30.1µg·mL-1的洗涤液样品溶液，按实验方法平行测定10次，10次测定的平均值为29.7µg·mL-1，RSD为1.25%。2.8洗涤液样品的测定本实验室自制了主要成分为0.3%三氯生的洗涤液，该洗涤液具有杀菌、止汗、除臭功能，国内未见有同类产品上市。该产品中同时含有常用的香精，用上述一阶导数分光光度法测定三氯生的含量。测定3批洗涤液样品中三氯生的平均含量为0.296%，RSD为1.12%。3讨论在样品前处理中，曾考察过用加热或减压蒸馏的方法消除香精的干扰，但处理后的样品在282nm处的零阶紫外图谱仍有吸收，不能消除香精的干扰。还尝试用碱液提取三氯生的方法消除香精的干扰，用pH12的碱液提取样品，不能把三氯生完全萃取出来，而且其吸收值很小，这可能由于三氯生在氯仿中比在碱液中存在形态更稳定。改用pH13的碱液提取，虽然吸收值增加了，但空白样品的干扰也随之增大，而且最大吸收波长也改变了。所以此方法也不可行。本试验采用一阶导数分光光度法测定洗涤液中三氯生的含量，消除了香精的干扰，此方法经济、快速、准确、可靠，可广泛适用于含有香精的洗涤液中三氯生的含量测定。参考文献[1]WUXJ,ZHANGTF,ZHANGYX,etal.EffectofanewTriclosan-containingmouthrinseonoralinfection[J].ChinJStomatol（中华口腔医学杂志）,2001,36(4):301-303.[2]TIANPY,PENGGK,LIJ,etal.Quickmeasurementoftriclosancontentindisinfectantbyultravioletspectrophotometry[J].ChinJDisinfection（中国消毒学杂志）,2003,20(1):62-63.[3]WANGAO,YUWH,BAIM,etal.Measurementoftriclosanindisinfectionproductsbyhighperformanceliquidchromatography[J].ChinJDisinfection（中国消毒学杂志）,2006,23(6):551-552.[4]PICCOLI，FIORIJ，.ANDRISANOV，etal．Determinationoftriclosaninpersonalhealthcareproductsbyliquidchromatography(HPLC)[J].IlFarmaco,2002(57):369–372.[5]SAFAVI，MALEKIN，SHAHBAAZIHR.Electrochemicaldeterminationoftriclosanatamercuryelectrode[J].AnalyticaChimicaActa,2003(494):225–233.4'