用重量法和分光光度法测定黄藤中巴马汀的含量的研究

'用重量法和分光光度法测定黄藤中巴马汀的含量的研究鸭怡珊(云南蒙自红河学院2002级化学教育B班.661100)摘要：采用重量法和分光光度测定黄藤中巴马汀的含量，同时两种方法进行比较，两者有显著的差异。实验表明：用分光光度法测定含量，该方法简化了操作步骤，操作简便、快捷、灵敏度高、重现性好，结果稳定可靠，可用于成品或半成品中巴马汀含量的快速测定和质量控制，本方法测定效果优于重量法测定。关键词：重量法分光光度法巴马汀DaterminatonofFibraureatecisapierreinFibrauretinuminjectionbyGravimetricmethodandabsorptionspectrophotometryYAYi-shanabstract:FiaurearecisepirreinFibrauetinuminjectionwasdetertminedbyGravimetricmethodandabsorptionspectrophotometryandthedifferentresultsasdeterminedbymethodinGravimetricmethoandabsorptionspectrophotometrywereobtained.Inthismethodiseasytooperatewithhighsensitivtyandrepeatabilithy.DateminationofrecisapierreinFibrauretinum.UsableBaMating"scontentfastmeasurementandqualitycontroltothefinishedproducteitherinthsemi-manufacturedgoodsinjectionbyabsorptionspectrophotometryisbetterthanGravimetricmethodKeywords：Gravimetricmethodabsorptionspectrophotometryhydrochloride黄藤为防己科植物藤黄莲（FnbraureatinctoriaLour）的根和茎，含有较多量的生物碱，其主要成分为巴马汀（即掌叶防己碱、盐酸棕榈碱）[1,2]，分子式为C21H22NO4 。味苦，性寒，其药理作用有：抗菌作用、降压作用、致浮肿作用、巴马汀有明显的增加白细胞吞噬能力的作用。民间作清热解毒、抗菌消炎方面疗效显著。常用于疮疡肿毒，妇科炎症、外伤感染、菌痢、肠炎、呼吸道感染及泌尿道感染、扁桃体炎、咽喉炎、结膜炎及黄疸等。用重量法测定其含量，此方法操作繁锁。耗时长，产率也较低，使用乙醇量较大，成本较高，不利于生产控制。本文讨论了使用重量法和分光光度法测定其中巴马汀含量的方法。1．材料与仪器黄藤粗根；721型分光光度仪（上海分析仪器厂）；MP200A电子分析天平，精密度0.0001g；黄藤素注射液(产址：云南个旧生物药业有限公司，规格为2ml：20mg批准文号：国药准字Z53020217）。2．方法2.1.1冷浸：取黄藤粗根80g，用1%醋酸溶液冷浸24h，过滤后，再加1%的醋酸溶液浸泡24h，合并冷浸液。2.1.2盐析和碱化：将冷浸液过滤，滤液中加食盐至7%，搅拌使溶解，再用40%氢氧化钠溶液调至pH=9,此时溶液变成砖红色,并有黄色不溶物析出，静止,倾出上清液,过滤后可得掌叶防己碱粗品。2.1.3精制：将掌叶防己碱置200ml烧杯中，加80%乙醇100ml，加热，使之溶解，倾出上层溶液，趁热过滤，继续用80%的乙醇热溶数次（每次50ml），直至溶液的颜色变浅为止（2-3次），合并溶液，滴加盐酸（HCL：6M、AR）调至pH=2，放置。没有现象产生，加热，使部分溶液蒸发，放置一段时间后有黄色细状结晶析出。抽滤，即得含有杂质的氯化钠掌叶防己碱。2.1.4重结晶：将含有杂质的氯化钠掌叶防己碱结晶置于200ml的烧杯中，加80%的乙醇溶液使其溶解，过滤，滴加盐酸（HCL：6M、AR）调至pH=2，放置一段时间，即有金黄色针状的晶体析出，抽滤，及得氯化钠掌叶防己碱纯品，干燥后称量。2.2分光光度法2.2.1冷浸：取黄藤粗根80g，用蒸馏水冷浸泡24h，过滤，得冷浸液340ml。2.2.2对照品溶液的制备取黄藤素注射液4ml于100ml容量瓶中，加水稀释至离刻度20ml，摇匀。即为含巴马汀0.5mg/ml对照品溶液。2.2.3测定波长的选择精密量取对照品溶液1ml置于50ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。置于1cm比色皿中，以水为空白，于370nm~500nm记录可见光谱（图1）。吸收曲线表明，巴马汀在上述波长范围内有2个最大吸收峰。其中424nm处为特征峰，本法选定424nm波长测定吸收度，测定结果如下表：波长370380390400410420422424吸光度(A)0.0950.1020.1110.1230.1400.1440.1440.146波长426428430440450460470500吸光度（A）0.1430.1410.1420.1260.1050.0780.0650.046 2.2.4标准曲线分别精密量取对照品溶液0.25ml，0.5ml，1.0ml，1.5ml，2.0ml，分别置于50ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。以水为空白，测定吸收度，其结果如下表：V（ml）0.250.51.01.52.0浓度（c）0.00250.00500.01000.01500.0200吸光度（A）0.0960.1410.2110.2670.346绘制标准曲线（图2），以吸收度（A）对取用量（c）进行线性回归，得回归方程：A=15.3C+0.0582.2.5测定冷浸液的吸收度将340ml的冷浸液用水稀释至5400ml，摇匀。置于1cm比色皿中，以水为空白，于424nm测定吸收度（A=1.85）。2.2.6样品的测定结果用重量法和分光光度法测定同一批样品，其结果如下表：样品重量法分光光度法黄藤（g）含量（mg）含量（mg）80531671.58重量法与分光光度法测定结果对照 3．讨论3.1通过实验,在原材料质量相同的情况下,不同的方法,其测定结果相差很大,用重量法测定其结果为531mg,而用分光光度法测定的结果就为671.58mg。其原因有：（1）原材料用醋酸溶液浸泡的时间未达到24h；（2）pH值和盐析时用的食盐的量对粗碱得产率也有影响。3.2在用重量法测定时,有些现象很不明显,比如,在将粗碱用80%乙醇洗涤,热过滤后,滤液的颜色没有多大的变化,最后得不到晶体,是因为乙醇的量太多。在蒸发一部分乙醇后，才有晶体析出，但是黄色针状，而不是金黄色针状的，原因是：（1）晶体中杂质含得太多，洗涤次数不够，还需要重结晶才能得到纯品。从这俩种方法和上表中的数据可以看出，分光光度法既省时间，又简单，因此提示用该方法测定黄藤中巴马汀的含量具有可行性。参考文献[1]苗明.法定中药药理与临床[M],北京：世界图书出版社，1998：1656．[2]国家医药管理局中草药情报中心站，植物药有效成分手册[M]，北京：人民卫生出版社，1986：800．[3]周敏．等．紫外分光光度法测定黄藤素注射液中盐酸巴马汀含量的探索[M]．合成化学，2001，9（4）：379~381．[4]唐爱莲．等．用箭煮法和冷浸法对黄藤中巴马汀成分提取的比较研究[M]．华夏医学，1（16）．感谢郭亚力教授、苏一兰老师的指导同时也感谢实验室的各位老师的大力支持和浦丽同学的共同完成'