邻菲罗啉分光光度法测定铁.doc

'邻菲罗啉分光光度法测定铁中文名称:1,10-菲罗啉[1] 中文别名：邻菲罗啉又叫邻二氮菲英文名称：1,10-Phenanthrolinemonohydrate英文别名：1,10-PhenanthrolinehydrateCAS号：5144-89-8分子式：C12H8N2.H2O分子量：180.21分子结构：1,10-phenanthroline危险品标志:TN说明风险术语：R25;R50/53;说明安全术语：S45;S60;S61主要用途：邻菲罗啉与亚铁离子在PH2~9的条件下生成桔红色络合物，然后用分光光度法测定铁含量。物理化学性质：一水合物为白色结晶性粉末。熔点93-94℃，无水物熔点为117℃，溶于300份水，70份苯，溶于醇和丙酮。能与多种过渡金属形成配合物，由于形成的配合物为螯合物，所以较为稳定。与铜形成的配合物及其衍生物因为对DNA有一定的切割活性，可以用作非氧化性核酸切割酶，进而有一定的抗癌活性。实验原理邻二氮菲(phen)和Fe2+在pH3～9的溶液中，生成一种稳定的橙红色络合物Fe(phen)32+，其lgK=21.3，ε508=1.1×104L·mol-1·cm-1，铁含量在0.1～6μg·mL-1范围内遵守比尔定律。其吸收曲线如图所示。显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe3+全部还原为Fe2+，然后再加入邻二氮菲，并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。有关反应如下：2Fe3++2NH2OH·HC1＝2Fe2++N2↑+2H2O+4H++2C1－测定时，控制溶液酸度在pH=2～9较适宜，酸度过高，反应速度慢，酸度太低，则Fe2+水解，影响显色。Bi3+、Ca2+、Hg2+、Ag+、Zn2+离子与显色剂生成沉淀，Cu2+、Co2+、Ni2+离子则形成有色络合物，因此当这些离子共存时应注意它们的干扰作用。 分光光度计---试剂1盐酸溶液-（180克/L）2氨水溶液-（85克/L）3乙酸-乙酸钠（HAc-NaAc）缓冲溶液（pH=4.5）：称取164g分析纯无水乙酸钠，500mL水溶溶解后，加入240mL冰乙酸，加水稀释至1000mL。4w=1%的盐酸羟胺水溶液，因不稳定，需临用时配制。抗坏血酸溶液，100克/L,一周内5.0.1%邻菲罗啉水溶液：1.0克/L先用少许乙醇溶解后，用水稀释至1000，新近配制，避光，使用无色溶液。6、铁标准溶液（含铁0.200g/1000mL）方法1、准确称取1.727g分析纯硫酸铁铵[(NH4)Fe(SO4)2·12H2O]于200mL烧杯中，加入水200mL ，完全溶解后，移入1000mL容量瓶中，加20mL稀释至刻度，摇匀。方法2、7、铁标准溶液（含铁0.020g/1000mL）--临用时配制试样中铁的含量测定1称样，供试液制备2空白试验3、标准曲线吸取铁盐标准溶液mL于50mL烧杯中，加10mL蒸馏水，盐酸溶液-（180克/L）精密PH试纸移入100mL容量瓶中，加入1mL抗坏血酸溶液，依次加入20mLHAc～NaAc缓冲液、10mL邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度。摇匀，用1cm比色皿以为参比，在510nm测量吸光值。 分光光度计型号编号:波长510nm供试品溶液预计（含铁g/mL）铁盐标准溶液（含铁g/mL）编号1234567吸取体积/mL铁含量吸光度/A4、供试品液制备供试品液，mL于于50mL烧杯中，加10mL蒸馏水，盐酸溶液-（180克/L）或氨水溶液-（85克/L），精密PH试纸移入100mL容量瓶中，加入1mL抗坏血酸溶液，依次加入20mLHAc～NaAc缓冲液、10mL邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度。摇匀， 计算标准曲线方程：'