磷钼蓝分光光度法测定海水中的活性磷酸盐无机磷.doc

'磷钼蓝分光光度法测定海水中的活性磷酸盐无机磷1适用范围和应用领域本法引自海洋监测规范，适用于海水中活性磷酸盐的测定。水样经0.45μm滤膜过滤后贮于聚乙烯瓶中。若样品采集后不能立即分析，则应快速冷冻至-20℃保存，样品熔化后立即分析。2方法原理在酸性介质中，活性磷酸盐与钼酸铵反应生成磷钼黄，用抗坏血酸还原为磷钼蓝后，于882nm波长测定吸光值。3试剂及其配制除非另作说明，所用试剂均为分析纯，水为二次水或等效纯水。3.1硫酸溶液：c(H2SO4)=6.0mol/L在搅拌下将300mL硫酸(H2SO4，ρ=1.84g/mL)缓缓加到600mL水中。3.2酒石酸锑钾-钼酸铵混合溶液钼酸铵溶液：溶解28g钼酸铵〔(NH4)6Mo7O24·4H2O〕于200mL水中。溶液变混浊时，应重配。酒石酸锑钾溶液：溶解6g酒石酸锑钾(C4H4KO7Sb·H2O)于200mL水中，贮于聚乙烯瓶中。溶液变混浊时，应重配。混合溶液:搅拌下将45mL钼酸铵溶液加到200mL硫酸溶液中，加入5mL酒石酸锑钾溶液，混匀。贮于棕色玻璃瓶中。溶液变混浊时，应重配。3.3抗坏血酸溶液溶解20g抗坏血酸(C6H8O6)于200mL水中，盛于棕色试剂瓶或聚乙烯瓶。在4℃避光保存，可稳定1个月。3.4磷酸盐标准贮备溶液：ρp=0.300mg/mL称取1.318g磷酸二氢钾(KH2PO4)，优级纯，在110～115℃烘1～2h)溶于10mL硫酸溶液及少量水中，全量转入1000mL量瓶，加水至标线，混匀，加1mL三氯甲烷(CHCl3)。此溶液1.00mL含0.300mg磷。置于阴凉处，可以稳定半年。3.5磷酸盐标准使用溶液：ρp=3.00μg/mL量取1.00mL磷酸盐标准贮备溶液至100mL量瓶中，加水至标线，混匀，加两滴三氯甲烷(CHCl3)。此溶液1.00mL含3.00μg磷。有效期为一周。4仪器及设备 分光光度计。5分析步骤5.1绘制标准曲线5.1.1量取磷酸盐标准使用溶液0，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00mL于50mL具塞比色管中，加水至50mL标线，混匀。各浓度依次为0，0.030，0.060，0.120，0.180，0.240mg/L。5.1.2各加1.0mL混合溶液，1.0mL抗坏血酸溶液，混匀。显色5min后，注入5cm测定池中，以蒸馏水作参比，于882nm波长处测定其吸光值Ai。其中零浓度为标准空白吸光值A0。5.1.3以吸光值(Ai-A0)为纵坐标，相应的磷酸盐浓度(mg/L)为横坐标，绘制标准曲线。5.2水样测定量取50mL经0.45μm微孔滤膜过滤的水样至具塞比色管中，按标准曲线绘制的步骤测定吸光值Aw。同时量取50mL水按相同步骤测定分析空白吸光值Ab。6记录与计算据(Aw-Ab)值在标准曲线上查得水样的磷酸盐浓度(mg/L)。7注意事项磷钼蓝颜色在4h内稳定。'