SNT0989-2001-出口中成药中铜、铅、汞、砷含量检验方法原子吸收分光光度法.pdf

'出口中成药中铜、铅、汞、砷含量检验方法原子吸收分光光度法Methodforthedeterminationofcopper,lead,mercuryandarsenicintraditional-preparedChinesemedicineforexport—AtomicabsorptionspectrophotometerSN/T0989—2001前言本标准是按照GB/T1.1—1993《标准化工作导则第1单元：标准的起草与表述规则第1部分：标准编写的基本规定》及SN/T0005—1996《出口商品中农药、兽药残留量及生物毒素生物学检验方法标准编写的基本规定》的要求进行编写的。本标准测定方法系参照国内外有关文献，经反复研究、实验和验证后而制定的。本标准同时制定了抽样和制样方法。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国厦门出入境检验检疫局。本标准主要起草人：吴抒怀、蔡怡鹃。本标准首次发布。1范围本标准规定了出口中成药中铜、铅、汞、砷含量检验的抽样、制样和原子吸收分光光度测定方法。本标准适用于六味地黄丸、新癀片等出口中成药中铜、铅、汞、砷含量检验。2引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。SN/T0005—1996出口商品中农药、兽药残留量及生物毒素生物学检验方法标准编写的基本规定3定义本标准采用下列定义。检验批：同一生产批号为一检验批。同一生产批号的商品应具有相同的特征，如品名、包装、标记、产地、规格和等级等。4抽样和制样4.1抽样数量总箱(件)数在100件以下的，取样3件；100件～1000件，按3%取样；超过1000件的，超过部分按1%取样；不足3件的，逐件取样。4.2抽样方法按4.1规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。颗粒状、粉末状的中成药可用取样器抽取样品，在每一箱(件)的不同部位至少抽取2份～3份样品。每一箱(件)的取样量一般按下列规定：一般中成药10g～50g；贵重中成药2g～5g。每一检验批样品应加封，标明标记、批次，送实验室。 4.3试样制备将抽取样品混合均匀，分出两份，一份作为存查样品，另一份用粉碎机或玛瑙研钵粉碎，磨成粉末，过孔边长0.45mm(40目)筛，装入洁净容器内，作为检验样品，密封，并标明标记。4.4样品保存样品密封保存于室温。注：在抽样和制样过程中，必须防止样品受到污染。5铜的测定5.1方法提要样品经消化处理后，导入原子吸收分光光度计中原子化，吸收324.8nm共振线，在一定浓度范围内，其吸收值与铜含量成正比，与标准系列比较定量。5.2试剂a)硝酸：优级纯。b)高氯酸：优级纯。c)过氧化氢：分析纯。d)1%硝酸溶液。e)10%硝酸溶液。f)铜标准储备溶液：国家标准溶液，1mL含铜1000μg。g)铜标准工作溶液：吸取10.00mL铜标准储备液〔5.2f)〕，置于100mL容量瓶中，用1%硝酸溶液〔5.2d)〕稀释至刻度，摇匀，如此多次稀释至每毫升铜含量相当于10μg。本实验用水均为去离子水，电阻率大于16mΩ/cm。5.3仪器所用玻璃容器均以10%硝酸溶液〔5.2e）〕浸泡24h以上，用去离子水冲洗、晾干，备用。a)原子吸收分光光度计，附铜空心阴极灯。b)微波消化系统(备有压力控制系统)。c)电热板。5.4分析步骤5.4.1样品消化——微波消化法称取样品0.25g(精确到0.001g)，于微波消化罐中，加入3.0mL硝酸，2.0mL过氧化氢，旋紧消化罐，置于微波消化炉中消化(消化条件可参考表1)。消化完毕后，把消化罐移入冰箱中冷却至室温，再把消化液移入25mL容量瓶中，用去离子水洗涤消化罐，洗涤液合并于容量瓶中，定容。随同做试剂空白试验。表1微波消化系统工作条件步骤12345功率/W100100100100100消化罐压力/psi406080100120保持时间/min351055注1上述功率为100%即微波系统工作功率为630W时，可同时消化12个样品。酸的用量、功率的大小和消化时间的长短可视样品的数量及样品消化的难易程度作适当改变。原则上，消化完毕后，消化液应呈浅黄色或无色透明溶液。2消化罐压力应逐渐增加，以免反应过于激烈，引起消化罐爆裂。3消化完毕后应让消化罐于微波炉中冷却10min～20min后方可取下。 5.4.2样品消化——湿法消化法称取样品1g(精确到0.001g)于三角瓶中，放入数粒玻璃珠，加8mL硝酸，2mL高氯酸，于电热板上75℃加热30min。在三角瓶上方盖一小漏斗，升温至150℃消化(若变棕黑色，应补加硝酸)，直至消化液呈浅黄色透明状，移去小漏斗，升温至220℃继续加热至冒白烟，近干。冷却后，用1%硝酸溶液〔5.2d)〕溶解白色残渣并洗涤消化容器，洗液合并于50mL容量瓶中(必要时过滤)，用1%硝酸溶液〔5.2d)〕定容，混匀备用；随同做试剂空白试验。5.4.3测定吸取0.0mL、0.1mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL铜标准工作液〔5.2g)〕，分别置于10mL容量瓶中，以1%硝酸溶液〔5.2d)〕稀释至刻度，摇匀。此容量瓶中每毫升溶液的铜含量分别相当于0.00μg、0.10μg、0.50μg、1.00μg、1.50μg。将试剂空白液、铜标准溶液和处理后的样液分别导入调至最佳条件的火焰原子化器进行测定。参考条件：灯电流4mA，波长324.8nm，光谱通带0.5nm，空气流量13.5L/min，乙炔流量2L/min。以铜含量和对应吸光度比较计算，求得铜含量。5.5计算火焰法样品中铜的含量按式(1)计算：………………………(1)式中：X1——样品中铜的含量，mg/kg；c1——测定用样品溶液中铜的含量，μg/mL；c0——试剂空白液中铜的含量，μg/mL；V1——样品处理后的总体积，mL；M1——样品质量，g。5.6方法的测定低限、回收率5.6.1测定低限微波消化法为10mg/kg，湿法消化法为5mg/kg。5.6.2回收率铜的添加浓度在10mg/kg时，回收率为98.8%；铜的添加浓度在50mg/kg时，回收率为96.8%；铜的添加浓度在150mg/kg时，回收率为99.4%。6铅的测定6.1方法提要样品经消化处理后，注入原子吸收分光光度计石墨炉中，电热原子化后吸收283.3nm共振线，在一定浓度范围内，其吸收值与铅含量成正化，与标准系列比较定量。6.2试剂a)硝酸：优级纯。b)高氯酸：优级纯。c)过氧化氢：分析纯。d)铅标准储备溶液：国家标准溶液，1mL含铅1000μg。e)铅标准工作溶液：吸取10.00mL铅标准储备液〔6.2d）〕置于100mL容量瓶中，用1%硝酸溶液〔5.2d）〕稀释至刻度。此溶液每毫升铅含量相当于100μg。f)铅标准系列溶液：每次吸取铅标准工作溶液〔6.2e)〕1.00mL于100mL容量瓶中，加入1%硝酸溶液〔5.2d)〕至刻度，如此多次稀释至每毫升含铅量为0.0ng，20.0ng，40.0ng，60.0ng，80.0ng，100.0ng。 g)1%磷酸二氢铵溶液。实验用水均为去离子水，电阻率大于16mΩ/cm。6.3仪器所用玻璃容器均以10%硝酸溶液〔5.2e）〕浸泡24h以上，用去离子水冲洗、晾干，备用。a)原子吸收分光光度计(附石墨炉、自动进样器及铅空心阴极灯)。b)微波消化系统按5.3b)。c)电热板。6.4分析步骤6.4.1样品消化——微波消化法按5.4.1。6.4.2样品消化——湿法消化法按5.4.2。6.4.3测定6.4.3.1仪器条件：根据仪器的不同性能将其调至最佳状态。参考条件为：波长283.3nm，狭缝0.5nm，灯电流5mA，设置进样温度90℃，干燥温度(Ⅰ)120℃，升温10s；干燥温度(Ⅱ)300℃，升温15s，持续30s；灰化温度600℃，升温10s，持续10s；原子化温度2150℃，升温1.4s，持续2s；清扫温度2150℃，持续2s；背景校正为氘灯或塞曼效应。6.4.3.2校准曲线绘制：石墨炉自动进样器分别吸取铅标准溶液0.0ng/mL，20.0ng/mL，40.0ng/mL，60.0ng/mL，80.0ng/mL，100.0ng/mL各10μL，1%磷酸二氢铵溶液〔6.2g)〕各4μL，注入石墨炉测定其吸光值，以铅含量对应吸光度比较计算，求得铅含量。6.4.3.3样品测定：以自动进样器分别吸取试剂空白溶液、样液各10μL，1%磷酸二氢铵溶液〔6.2g)〕4μL，注入石墨炉测定其吸光值，与曲线比较或代入方程求得铅含量。6.5计算样品中铅含量按式(2)计算：………………………(2)式中：X2——样品中铅的含量，mg/kg；c2——测定用样品溶液中铅的含量，μg/mL；c0——试剂空白液中铅的含量，μg/mL；V2——样品处理后的总体积，mL；M2——样品质量，g。6.6方法的测定低限、回收率6.6.1测定低限微波消化法为1mg/kg，湿法消化法为0.5mg/kg。6.6.2回收率铅的添加浓度在1.00mg/kg时，回收率为103.6%；铅的添加浓度在10mg/kg时，回收率为92.9%； 铅的添加浓度在20mg/kg时，回收率为93.1%。7汞的测定7.1方法提要汞蒸气对波长253.7nm的共振线具有强烈的吸收作用。样品经消化处理，除去残余的氮氧化物和过氧化氢，在强酸性介质中，用氯化亚锡将离子态汞还原成原子态(汞蒸气)，以氩气作为载体，把汞蒸气导入石英管，进行冷原子吸收测定。在一定浓度范围内，该吸收值与汞含量成正比，将其与标准系列比较确定汞含量。7.2试剂a)硝酸：优级纯。b)硫酸：优级纯。c)过氧化氢：分析纯。d)0.1%重铬酸钾溶液：称取1.00g重铬酸钾，溶于水中，加入5.0mL硝酸，用去离子水稀释至1000mL。e)汞标准储备溶液：国家标准溶液，1mL含汞1000μg。f)汞标准工作溶液：由汞标准储备液〔7.2e〕〕以0.1%重铬酸钾溶液〔7.2f〕〕逐级稀释而成，现用现配。g)五氧化二矾：分析纯。h)饱和高锰酸钾溶液。i)20%盐酸羟胺溶液。j)氯化亚锡溶液：称取20g氯化亚锡，于200mL烧杯中，加入20mL盐酸，于电热板上加热至完全溶解，再加入去离子水至100mL。现用现配。实验用水均为去离子水，电阻率大于16mΩ/cm。7.3仪器所用玻璃容器均以10%硝酸溶液〔5.2e〕〕浸泡24h以上，用去离子水冲洗、晾干、备用。a)原子吸收分光光度计(附连续流动氢化物发生装置、石英管、汞空心阴极灯)。b)微波消化系统按5.3b)。c)电热板。7.4分析步骤7.4.1样品消化——微波消化法称取样品0.25g(精确到0.001g)，置于微波消化罐中，加入3.0mL硝酸，2.0mL过氧化氢，旋紧消化罐，置于微波消化炉中消化(消化条件可参考表1)。消化完毕后，把消化罐移入冰箱冷却至室温。旋开消化罐，加入5mL去离子水，把消化罐置于水浴中加热至溶液微沸并保持10min，除去残余氮氧化物和过氧化氢，冷却，转移至25mL容量瓶中，用去离子水洗涤消化罐，合并洗液于容量瓶中，滴加饱和高锰酸钾溶液〔7.2h)〕保持数分钟不褪色，测定前以盐酸羟胺溶液〔7.2i)〕还原至无色，定容至刻度备用。随同作试剂空白试验。7.4.2样品消化——回流消化法称取样品1g(精确到0.001g)，置于三角瓶中，加10mL硝酸，2mL硫酸，40mg五氧化二矾〔7.2g)〕，转动三角瓶防止局部炭化。装上冷凝管后，于电热板上低温加热，开始发泡时停止加热，发泡停止后，加热回流2h～3h。如加热过程中溶液出现棕色，应补加硝酸继续加热回流，至溶液透明澄清或略带浅黄色，冷却后，从冷凝管上端小心加入10mL去离子水，继续加热回流约10min，用适量去离子水冲洗冷凝管，洗液并入消化液中，将消化液移入50mL容量瓶中(必要时经玻璃棉过滤)，用少量水洗三角瓶、滤器，洗液并入容量瓶中，滴加饱和高锰酸钾溶液〔7.2h)〕保持数分钟不褪色，测定前以盐酸羟胺溶液〔7.2i)〕还原至无色，加水至刻度混匀备用。随同做试剂空白试验。7.4.3测定吸取0.0mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL汞标准工作液〔7.2f)〕，分别置于50mL容量瓶中，加入5mL硝酸，1mL0.1%重铬酸钾溶液〔7.2d〕〕，用水稀释至刻度，混匀。此溶液每毫升中汞含量分别相当于0.0ng，1.0ng，2.0ng，4.0ng，6.0ng，8.0ng。将上述试剂空白液、汞标准溶液和样品溶液分别导入氢化物发生系统，以氯化亚锡溶液〔7.2j)〕为还原剂进行连续流动冷原子吸收测定。仪器参考条件为：原子吸收波长253.7nm，狭缝0.5nm，灯电流4mA，测量延迟时间55s；氢化物发生器参考条件为：三通道中，去离子水流速1.0mL/min，样品流速7.0mL/min，氯化亚锡溶液〔7.2j)〕流速1.0mL/min。以汞含量和对应吸光度比较计算，求得汞含量。 7.5计算汞含量按式(3)计算：………………………(3)式中：X3——样品中汞的含量，mg/kg；c3——测定用样品溶液中汞的含量，μg/mL；c0——试剂空白液中汞的含量，μg/mL；V3——样品处理后的总体积，mL；m3——样品质量，g。7.6方法的测定低限、回收率7.6.1测定低限微波消化法为0.1mg/kg，回流消化法为0.05mg/kg。7.6.2回收率汞的添加浓度在0.10mg/kg时，回收率为107.8%；汞的添加浓度在0.20mg/kg时，回收率为103.5%；汞的添加浓度在0.50mg/kg时，回收率为106.7%。8砷的测定8.1方法提要样品经微波消化后，砷以五价形式存在。当溶液氢离子浓度大于1.0mol/L时，加入碘化钾-硫脲混合溶液，将五价砷还原为三价，加入硼氢化钠，形成砷化氢气体，用氩气为载体，导入乙炔焰加热的石英管原子化器中原子化，用原子吸收分光光度计于波长193.7nm处测定其吸光值，该吸光值与砷含量成正比。取其与标准系列比较确定砷含量。8.2试剂a)硝酸：优级纯。b)盐酸：分析纯。c)高氯酸：优级纯。d)过氧化氢：分析纯。e)6mol/L盐酸溶液。f)1mol/L盐酸溶液。g)砷标准储备液：国家标准溶液，1mL含砷1000μg。h)砷标准工作液：取1mL砷标准储备液〔8.2g）〕置于100mL容量瓶中，用1mol/L盐酸〔8.2f）〕稀释至每毫升溶液中砷含量相当于0.100μg。i)硼氢化钠(0.6g/50mL)溶液与氢氧化钠(0.5g/50mL)溶液1∶1混合。j)碘化钾(250g/500mL)溶液与硫脲(25g/500mL)溶液1∶1混合。实验用水均为去离子水，电阻率大于16mΩ/cm。8.3仪器 所用玻璃容器均以10%硝酸溶液〔5.2e)〕浸泡24h以上，用去离子水冲洗、晾干，备用。a)原子吸收分光光度计(附氢化物发生器，测砷T型石英管，砷空心阴极灯)。b)微波消化系统按5.3b)。c)电热板。8.4分析步骤8.4.1样品消化——微波消化法称取样品0.25g(精确到0.001g)，置于微波消化罐中，加入3.0mL硝酸，2.0mL过氧化氢，旋紧消化罐，置于微波消化系统中进行微波消化(系统参考条件见表1)。消化完毕后，把消化罐移入冰箱中冷却至室温。旋开消化罐，把消化液移入100mL三角瓶中，用去离子水洗涤消化罐，洗涤液合并于三角瓶中。滴加0.5mL高氯酸，置于电热板上220℃加热至冒白烟，近干。此时溶液应澄清无色或略带有少量白色结晶固体。冷却后，加入约15mL1mol/L盐酸溶液〔8.2f)〕溶解白色残渣，1mL碘化钾-硫脲混合液〔8.2j)〕，转移入25mL容量瓶，同时用1mol/L盐酸溶液〔8.2f)〕清洗三角瓶，洗液一并移入容量瓶，定容，摇匀。把容量瓶移入75℃的水浴中加热15min后取出冷却至室温，或在室温下放置50min。随同做试剂空白试验。8.4.2样品消化——湿法消化称取样品1g(精确到0.001g)于三角瓶中，放入数粒玻璃珠，加8mL硝酸，2mL高氯酸，于电热板上75℃加热30min。在三角瓶上方盖一小漏斗，升温至150℃消化(若变棕黑色，应补加硝酸)，直至消化液呈浅黄色透明状，移去小漏斗，升温至220℃继续加热至冒白烟，近干。残余消化液应呈无色透明或带少量白色残渣。用1mol/L盐酸溶液〔8.2f)〕洗涤三角烧瓶，洗涤液一并移入50mL容量瓶中。加入2mL碘化钾-硫脲混合液〔8.2j)〕，用1mol/L盐酸〔8.2f)〕溶液定容摇匀。随同做试剂空白试验。8.4.3测定吸取0.0mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL砷标准工作液〔8.2h)〕，分别置于25mL容量瓶中，加入1mL碘化钾-硫脲混合液〔8.2j)〕。用1mol/L盐酸溶液〔8.2f)〕稀释至刻度，混匀(每毫升溶液中砷含量分别相当于0.0ng，2.0ng，4.0ng，6.0ng，8.0ng，10.0ng)，移入75℃的水浴锅中加热15min，取出冷却至室温，或在室温下放置50min。将上述试剂空白液、砷标准溶液和处理后的样品溶液导入调至最佳条件的氢化物发生器进行火焰原子化器测定。参考条件：波长193.7nm，灯电流10mA，狭缝0.2nm，测定延长时间30s，空气流量13.5L/min，乙炔流量2.0L/min。氢化物发生器参考条件为：三通道中盐酸溶液〔8.2e)〕流速1mL/min，硼氢化钠与氢氧化钠混合液〔8.2i)〕流速1mL/min，样品溶液流速7.0mL/min。以砷标准溶液含量和对应吸光度比较计算，求出砷含量。8.5计算砷含量按式(4)计算：………………………(4)式中：X4——样品中砷的含量，mg/kg；c4——测定用样品溶液中砷的含量，μg/mL；c0——试剂空白液中砷的含量，μg/mL；V4——样品处理后的总体积，mL；m4——样品质量，g。8.6方法的测定低限、回收率8.6.1测定低限微波消化法为0.5mg/kg，湿法消化法为0.25mg/kg。8.6.2回收率砷的添加浓度在0.5mg/kg时，回收率为99.1%；砷的添加浓度在2.0mg/kg时，回收率为102.7%； 砷的添加浓度在5.0mg/kg时，回收率为103.4%。'