邻二氮菲分光光度法测铁

'邻二氮菲分光光度法测铁南华大学预防医学与放射卫生实验教学中心 教学对象：高等医学院校卫生检验专业学生实验课时：6学时课程类型：专业基础实验课课程要求：必修每组人数：2人 实验目的和意义掌握分光光度法测定铁的原理和技术熟悉分光光度法的条件控制和测定方案的拟定方法了解分光光度计的使用方法 实验原理在pH2-9的溶液中，邻二氮菲能与Fe2+反应生成稳定的配合物。邻二氮菲+Fe2+→[邻二氮菲-Fe2+]配合物（无色）（红色）用分光光度计测定溶液吸光度，根据Beer定律A=Kc采用标准曲线法测定铁的含量。 常用测定方法：直接进样－GC法溶剂解吸－GC法热解吸－GC法PID－GC法优点：简单，方便，费用低缺点：采集后样品放置时间短共同点：均用吸附剂（活性碳，多孔聚合物）采集样本，解吸后进样。采样样品稳定时间较长，但采样率受采样现场湿度影响较大；解吸率有差异特点：前者：操作简便，不需特殊解吸仪器，但检出限较高后者：需热解吸仪，检出限降低100倍PID为非破坏性检测器，常用于便携式气相色谱仪 实验内容1.标准溶液的配制2.吸收光谱的测定和波长选择3.溶液吸光度的测定4.标准曲线的绘制5.样品含量的测定6.分析数据处理和结果计算 仪器723型分光光度计,1cm比色杯50ml容量瓶,10ml,5ml，2ml吸量管；试剂邻二氮菲溶液，醋酸钠溶液,盐酸溶液,氢氧化钠溶液,盐酸羟胺溶液,铁标准溶液。(均为分析纯试剂)问题：化学试剂按纯度可分为哪几类？分析化学应使用哪些？化学纯(CP蓝色)，分析纯(AR红色)优级纯（CR深绿色)专门用途高纯试剂，如：光谱纯、色谱纯、电解纯等 测量条件参比溶液：蒸馏水波长扫描范围：400-700nm比色杯厚度：1cm测量波长：~510nm（参考值）测量速度：快 50ml容量瓶试剂加入反应显色测定实验步骤1–溶液配制配制高、中、低三个样品体积的溶液，选择吸光度适中一种进行测定按照浓度从小到大需要配制6种溶液标准溶液样品溶液1ml盐酸羟胺+5ml醋酸钠+3ml邻二氮菲+加水至刻度室温下静置反应30min在分光光度计上进行，见后面提问：除容量瓶之外还可以用什么？ 比色杯加入溶液选择波长测定实验步骤2-测定吸光度选择测量波长后，作定波长下测定用于选择测量波长，根据吸收光谱中最大吸收波长选择吸收光谱吸光度测定用溶液润洗，加入溶液体积不超过2/3以最大吸收波长为测量波长以蒸馏水为参比进行吸光度测定提问：比色杯有几种类型和型号？ 操作步骤3-标准曲线绘制和样品测定AcAxcx标准曲线绘制样品测定 计算A=a+bCA为吸光度a为截距b为斜率C为浓度 注意事项分光光度计测量前应预热30min。仪器操作应在教师指导下进行。手拿比色杯的粗糙面。本实验的试剂加入顺序不能随意改变。反应时间应严格控制足够长，保证反应完全。测定顺序是从稀到浓。 仪器简介'