浊点萃取—K矩阵分光光度法同时测定水中孔雀石绿和结晶紫毕业论文

'南华大学化学化工学院毕业论文浊点萃取—κ矩阵分光光度法同时测定水中孔雀石绿和结晶紫【摘要】本文提出了浊点萃取—κ矩阵分光光度法同时测定水样中孔雀石绿和结晶紫的新方法，研究了非离子表面活性剂TritonX-114浊点萃取的最佳条件，如pH、试剂用量、平衡时间和温度等。孔雀石绿和结晶紫的最大吸收波长分别为624nm和579nm，标准曲线的线性范围分别是118-1500ng·mL−1和135-1500ng·mL−1，检测限是35ng·mL−1和40ng·mL−1。孔雀石绿和结晶紫的浓度在500ng·mL−1和1000ng·mL−1时的相对标准偏差分别为8.6%和6.1%，8.4%和10.5%(n=8)。该方法应用于测定池塘水中痕量孔雀石绿和结晶紫，结果令人满意。【关键字】浊点萃取；κ矩阵；孔雀石绿；结晶紫；分光光度法DeterminationofMalachiteGreenandCrystalVioletbySpectrophotometryafterCloudPointExtractionUsingκ-matrixAbstract：Anewmethodforthesimultaneousdeterminationoftraceamountofmalachitegreenandcrystalvioletfromaqueoussolutionbyspectrophotometryaftercloudpointextractionusingκ-matrixhasbeenproposed.Theoptimumextractionandreactionconditions,suchaspH,reagentsconcentrationandeffectoftimeandtemperatureandsoon,havebeenstudiedwiththenonionicsurfactantTritonX-114.Themaximumwavelengthofabsorptionofmalachitegreenandcrystalvioletis624nmand579nm.Linearitywasobeyedintherangeof118-1500ngmL-1and135-1500ngmL-1withlimitofdetectionof35ngmL−1and40ngmL−1,respectively.Therelativestandarddeviation(R.S.D)forthesimultaneousdeterminationof8testsamplesfor500and1000ngmL−1ofmalachitegreenandcrystalvioletwas8.6%and6.1%,8.4%and10.5%,respectively.Themethodwasappliedtothesimultaneousdeterminationofmalachitegreenandcrystalvioletinpoolwatersampleswithsatisfactoryresults.Keywords:Cloud-pointextraction;κ-matrix;malachitegreen；crystalviolet;spectrophotometry第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文毕业设计（论文）原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重承诺：所呈交的毕业设计（论文），是我个人在指导教师的指导下进行的研究工作及取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或组织已经发表或公布过的研究成果，也不包含我为获得及其它教育机构的学位或学历而使用过的材料。对本研究提供过帮助和做出过贡献的个人或集体，均已在文中作了明确的说明并表示了谢意。作者签名：　　　　　日　期：　　　　　指导教师签名：　　　　　日　　期：　　　　　使用授权说明本人完全了解大学关于收集、保存、使用毕业设计（论文）的规定，即：按照学校要求提交毕业设计（论文）的印刷本和电子版本；学校有权保存毕业设计（论文）的印刷本和电子版，并提供目录检索与阅览服务；学校可以采用影印、缩印、数字化或其它复制手段保存论文；在不以赢利为目的前提下，学校可以公布论文的部分或全部内容。作者签名：　　　　　日　期：　　　　　第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权　　　　大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。涉密论文按学校规定处理。作者签名：日期：年月日导师签名：日期：年月日第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文1　前言水是一切生物体所必须的基本物质，是人类生存的重要环境因素。由于人类生产、生活产生的各种废弃物进入水体，造成污染，危害水生资源和人类健康，水环境污染已成为当今世界面临的主要环境问题之一。改革开放以来，我国水产养殖业迅速发展，取得了举世瞩目的成就，到2003年我国人工养殖水产品量已稳居世界第一。随着水产养殖规模不断扩大，养殖品种不断增加，伴随养殖产品出现的疾病逐年加剧，已成为阻碍水产养殖业进一步发展的主要障碍。在此形势下，渔药的出现与渔药市场的形成成了水产养殖业发展的必然要求。孔雀石绿和结晶紫作为工业染料问世以来，广泛应用于制陶业、纺织业、皮革业和细胞化学染色等；同时，它们也是一类抗菌效力强大的渔用药物。作为外用药，孔雀石绿、结晶紫曾广泛应用于受伤鱼体抗细菌、真菌和抑制寄生虫等[1]它们的抑菌机理是：当细菌或真菌处于分裂增殖期时，孔雀石绿、结晶紫能抑制分裂细胞内的谷氨酸转变为肽类和有关产物，使细菌的分裂繁殖受阻。从上世纪九十年代开始，国内外学者陆续研究发现，孔雀石绿、结晶紫等染料对人和动物具有高毒、高残留和致畸、致癌、致突变性，是一类潜在致癌物。美国、日本以及英国等许多国家已禁止用于水产养殖业。中华人民共和国农业行业标准无公害食品渔用药物使用准则(NY5071-2002)中已将孔雀石绿、结晶紫列为禁用药物。我国水产药品研究与开发起步较晚，产品的科技含量不高，目前，许多病虫害尚无良好的针对性药物，由于孔雀石绿、结晶紫在水产养殖中抗菌效果较好，价格低廉，宣传力度不够等原因，使得不少业户还在小范围使用，对水环境和水产品造成严重污染，因此对于孔雀石绿、结晶紫的监控就显得格外重要。近几年我国因药物残留出口的动物源性食品屡遭禁运。欧盟派到中国的专家组，曾多次强烈要求中国政府对孔雀石绿、结晶紫残留进行监控。目前，孔雀石绿和结晶紫的检测方法主要是高效液相色谱法[2-3]和高效液相色谱-质谱法[4-5]。这些方法灵敏、准确，但仪器设备要求高，操作难度大，在全国范围内推广使用有一定困难。因此，研究灵敏度高、选择性好、仪器设备要求低、操作简便的孔雀石绿和结晶紫检测新方法具有十分重要的现实意义。第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文1.1孔雀石绿和结晶紫的性质孔雀石绿(malachitegreen，MG)又称苯胺绿、碱性绿、维多利亚绿或中国绿等，为金属光泽的结晶体，是药用染料中抗菌效力较强的一类，属于三苯甲烷类染料。在市售的商品中，孔雀石绿主要以草酸盐和盐酸盐的形式存在。孔雀石绿盐酸盐的分子式为C23H25N2Cl，分子量364.9，其结构式为：在浓硫酸或盐酸的催化下，孔雀石绿可由一分子苯甲醛和两分子N,N-二甲基苯胺缩合生成四甲基二氨基三苯甲烷的隐性碱体，在酸性介质中进一步被二氧化铅氧化制得。孔雀石绿结晶呈深绿色，因其外观颜色酷似孔雀绿而得名。孔雀石绿易溶于水、乙醇，水溶液呈蓝绿色。结晶紫(crystalviolet，CV)又称龙胆紫、氯化甲基玫瑰苯胺、甲紫盐基结晶紫、碱性青莲等，和孔雀石绿同属于碱性三苯甲烷类染料。结晶紫盐酸盐的分子式为C25H30N3Cl，分子量407.98，其结构式为：结晶紫为绿色带有金属光泽结晶或深绿色结晶性粉末，易溶于醇，能溶于氯仿，尚溶于水，不溶于醚。在细胞学、组织学和细菌学等方面应用极广，是一种优良的染色剂。1.2浊点萃取的原理随着科学技术的发展，在进行生物、环境等样品的分析时，分析测试对象的浓度已达到mg·L-1级甚至是μg·L-1第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文级，虽然光谱分析技术具有很高的灵敏度，但要直接测定这些试样中的痕量组分往往会遇到困难，有时甚至是不可能的，这是因为，一方面，样品本身的物理化学状态有的不适合直接测定，或者分析方法对极低含量的组分灵敏度不够;另一方面是存在基体干扰，或者缺乏相应的校正标准和试剂。因此需要借助于分离富集技术来提高分析方法的灵敏度和选择性[6]。萃取法作为痕量富集的手段，在分析化学中得到了广泛的应用。但常规的液-液萃取存在明显不足，如需要使用大量高纯和有毒的有机试剂、富集倍数低、操作烦琐费时和易对环境造成污染等。为了克服这些问题，适应现代分析科学发展的要求，近年来，在原有的基础上，化学工作者不断创新，开发了固相萃取、固相微萃取、膜萃取、超临界液体萃取以及微波萃取等新型萃取技术[7]。浊点萃取(Cloudpointextraction，CPE)是以表面活性剂胶束水溶液的浊点现象为基础，通过改变实验参数引发相分离，将疏水性物质和亲水性物质分离的液-液萃取技术。同经典的液-液萃取技术相比，CPE法具有很多优点:(1)应用范围广、萃取效率高、富集因子大；(2)安全、经济(不使用有机溶剂、用量少)；(3)表面活性剂易于处理(可用透析回收利用或与废丙酮焚烧)；(4)生物分子在萃取过程中不易变性；(5)易与其它分析仪器联用[8]。在分析中作为样品的前处理已与分光光度法[9]、原子吸收法[10]、高效液相色谱法[11]等结合用于测定金属及金属混合物[12]、染料[13]、生物大分子[14]等的测定，使方法的灵敏度比常规法得到了较大的提高。本实验采用的表面活性剂为TritonX-114，其水溶液在温度升高到浊点以上时，会引发相分离出现两相—表面活性剂TritonX-114相和水相，溶解在溶液中的孔雀石绿和结晶紫与表面活性剂TritonX-114的疏水基团异辛基苯基结合，被萃取进入TritonX-114相，亲水性物质留在水相，从而使样品中孔雀石绿和结晶紫和亲水性物质分离。分离萃取后的TritonX-114相经过无水乙醇稀释后用紫外可见分光光度计测定其吸光度，在光谱曲线上每隔10nm读取多个吸光度值，组成吸光度矩阵，用matlab7.0软件自编程序处理数据。1.3κ-矩阵(κ-Matrix)法的原理第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文分光光度法一直是与浊点萃取联用的主要检测手段之一，但分光光度法同时测定多组份时，常存在背景影响和各组份的吸收光谱的部分或完全重叠而难以对每一种待测组分单独定量，通常采用的方法难以克服上述问题而使应用受到一定的限制，通过和化学计量学方法结合，能够较好地解决这一问题。化学计量学是化学的分支学科，它应用数学、统计学和计算机科学的工具与手段设计或选择最优化学量测方法，并通过解析化学量测数据最大限度的获取化学及其他相关信息。多元校正也称多元量校正，它是化学计量学中应用最广泛、最富有成果和特色的重要分支之一，分为直接校正和间接校正两大类。直接校正指的是系数矩阵直接由各个纯组分的灵敏度系数表示，而直接对未知样本各组分浓度进行同时估计的多元校正方法。比如多元线性回归校正和卡尔曼滤波校正等。间接校正是首先以已知校正集（包括n个已知浓度的含m个组分的标准样本组成的浓度集和对该浓度集量测得到的响应集）通过最小二乘法原理估计出各组分灵敏度系数，然后再代入量测模型对未知试样进行预测的校正方法，比如κ-矩阵法、主成分回归法、P-矩阵法等。本文所采用的κ-矩阵法属于间接校正方法，其用于校正的基本过程如下：（1）量测模型设有n个由m种组分组成的样本（校正集），其浓度矩阵为X，在p个分析通道测得相应的响应矩阵Y，若响应矩阵Y与浓度矩阵X之间有线性关系，则由量测模型，如下式：Yn×p=Xn×mΚm×p+En×p（4-3）式中Κ在有一定相互作用的实际体系中，包含了组分间相互作用对体系的影响。（2）校正因为校正集浓度矩阵X及其量测矩阵Y都是已知的，故可根据式（4-4）确定κ-矩阵。Κm×p=(XTm×nXn×m)-1XTn×mYn×p（4-4）（3）预测对于Q个未知样本的量测响应矩阵Y，其浓度的估计可由校正步骤得到的模型参数进行预测。对于量测模型式（4-3），Y和Κ已知，且Κ就是校正步骤中估计的特性参数，是不随组分浓度的变化而变化的，X为未知，再次应用最小二乘原理求X，如式(4-5）所示：XQ×m=YQ×pΚTp×m(Κm×pΚTp×m)-1（p≥m)第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文（4-5）浊点萃取预富集结合分光光度法测定孔雀石绿的文献[15]有报道，但有关浊点萃取和κ-矩阵分光光度法联用，不经分离同时测定孔雀石绿和结晶紫两组分还未见报道。本文详细研究了以非离子表面活性剂TritonX-114浊点萃取微量孔雀石绿和结晶紫的适宜条件，以κ-矩阵法解析光谱重叠问题，提出了浊点萃取-κ-矩阵法同时测定孔雀石绿和结晶紫的新方法，方法简单、灵敏，结果令人满意。2实验部分2.1仪器和试剂UV-Vis8500紫外/可见分光光度计（上海天美科学仪器有限公司）；AY120型电子天平（SHIMADZUCOOPERATION）；ProfessionalMeterPP-15型pH计（sartorius）；超声波清洗机（宁波新芝科器研究所）；电热恒温水浴锅（天津泰斯特仪器有限公司）；80-2型离心沉淀器（上海手术器械厂）;孔雀石绿溶液：称取0.1g孔雀石绿（AR，分子式C23H25N2Cl，分子量为364.92，天津市福晨化学试剂厂）置于100ml容量瓶中，加水至刻度，配置成1000μg·mL−1的储备液，工作液稀释成10μg·mL−1；结晶紫溶液：称取0.1g结晶紫（AR，分子式C25H30N3Cl，分子量为407.98，上海山浦化工有限公司）置于100ml容量瓶中，加水至刻度，配置成1000μg·mL−1的储备液，工作液稀释成10μg·mL−1；TritonX-114溶液：量取5mlTritonX-114（AR，进口Amresco公司）置于100ml容量瓶中，加热水至刻度，配置成5%(v/v)的溶液；盐酸-柠檬酸钠缓冲溶液：用0.1mol·L−1盐酸(AR,分子式HCl,36-38%，衡阳化学试剂厂)和0.1mol·L−1柠檬酸钠（AR，分子式Na3C6H5O7·2H2O，分子量为294.10广州化学试剂厂）调至所需pH（2-6）；无水乙醇（AR）：衡阳化学试剂厂；冰水混合液：自制；实验用水：自制超纯水。第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文2.2实验方法准确移取一定量的孔雀石绿和结晶紫工作液到10ml离心管中，分别加入pH为2.7的盐酸-柠檬酸钠缓冲溶液1.2mL，5%TritonX-l14溶液1.5mL，加超纯水稀释至10mL，超声振荡10min，按实验方法在40℃水浴中加热20min。分相后的溶液在冰水混合液中冷冻使表面活性剂相变成粘滞的液相，弃去水相，加无水乙醇0.3mL，振荡使表面活性剂相溶解。用1cm微量比色皿在550-650nm处以对应的空白试剂为参比，用UV-Vis8500测定吸光度。3结果与讨论3.1吸收光谱曲线取孔雀石绿和结晶紫溶液，按试验方法显色，在400-800nm内绘制萃取后的吸收曲线，如图1。　　　　　　　　　　图1孔雀石绿和结晶紫的吸收曲线Fig.1AbsorptionSpectraofMGandCV由图1可知，孔雀石绿和结晶紫的络合物最大吸收峰值分别在624nm和579nm。吸收光谱在550-650nm范围内重叠严重。为保证测定方法的灵敏度及孔雀石绿和结晶紫同时测定时吸光度加和性较好，选取在550-650nm波长范围内每隔10nm读取一次吸光度。3.2条件优化实验第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文3.2.1pH的选择一般要获得较好的萃取效率需要选择合适的pH来控制溶液的酸度以使络合物配位完全同时又有利于浊点萃取。实验中考察了不同pH对孔雀石绿和结晶紫的萃取后吸光度的影响，结果如图2。图2pH对吸光度(A)的影响Fig.2TheeffectofpHonA由图形可知，在实验条件下，pH在2.5-2.8范围之间吸光度值较高且稳定，所以实验选择的HCl-柠檬酸钠缓冲溶液的酸度为2.7。3.2.2缓冲溶液用量的选择固定HCl-柠檬酸钠缓冲溶液pH为2.7时，考察改变缓冲溶液体积对络合物的形成和浊点萃取的效率的影响，结果如图3。第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文图3缓冲液的用量对吸光度(A)的影响Fig.3TheeffectofbuffersolutionsvolumesonA由图形可知，在实验条件下，缓冲溶液用量在1.0-1.4ml范围之间吸光度值较高且稳定，所以实验选择的缓冲溶液的用量为1.2ml。3.2.3TritonX-114用量的选择按试验方法，考察了不同浓度的TritonX-l14对萃取效率的影响，结果如图4。图4表面活性剂TX-114的用量对吸光度(A)的影响Fig.4TheeffectofTX-114solutionsvolumesonA第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文由图形可知，在实验条件下，TritonX-l14用量在1.4-1.7ml范围之间吸光度值较高且稳定，所以实验选择的缓冲溶液的用量为1.5ml。3.2.4平衡温度和萃取时间的选择若要萃取完全，选择的平衡温度低，萃取时间就长；平衡温度高，则萃取时间短。试验了水浴温度30-50℃和平衡时间5-30min对体系吸光度的影响。实验表明，随着平衡时间的增长，富胶束相萃取越完全，达到20min即可萃取完全。实验选择40℃水浴中加热20min。3.3分析特性配制一系列的孔雀石绿和结晶紫的标准溶液，在试验选取的最佳条件下，分别在579nm和624nm处进行吸光度测定，得到孔雀石绿和结晶紫标准曲线分别为A=0.1198C+0.0391（r=0.9962），线性范围为118-1500ng·mL−1，检出限为35ng·mL−1；A=0.5303C+0.0104（r=0.9981），线性范围为135-1500ng·mL−1，检出限为40ng·mL−1。由于实验前将一定量的孔雀石绿和结晶紫工作液加入到10ml离心管中，浊点萃取预富集后到0.5ml（0.2ml表面活性剂相+0.3ml无水乙醇），所以富集倍率为20倍。3.4共存离子的干扰对孔雀石绿和结晶紫各0.5μg·mL−1的混合体系，在相对误差≤±5%时，下列为常见共存离子的允许倍数：K+、Na+、Co2+,Cu2+,Fe3+、Cl-、SO42-、NO3-（1000）；四苯硼酸根，苯甲酸根（500）；NO2−（120）对孔雀石绿和结晶紫的测定无干扰，结果见表1。表1共存离子的干扰Table1.TolerancelimitsofinterferingspeciesForeignionsToleranceratioaCo2+,Cu2+,Fe3+,Pb2+,Cl−,Mg2+,K+,Na+,SO42−,NO3−1000四苯硼酸根，苯甲酸根500NO2−1203.5校正集、预测集的浓度组成分别选取3个浓度水平的孔雀石绿和结晶紫标准溶液，按L9(34)第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文正交试验方案配制9个κ-矩阵法的校正集，其浓度组成如表2所示。另外配制5个合成样品，对5个合成样品浓度进行预测，其预测结果和其结果的回收率分别列于表3。从表3可知κ-矩阵法预测结果比较令人满意。表2校正样中各物质的浓度Table2theconcentrationofvarioussubstancesofcalibrationsamples123456789VMG/μg/mL0.50.50.51111.51.51.5VCV/μg/mL0.511.50.511.50.511.5表3合成样中各物质的浓度，预测结果以及各自的回收率Table3Theconcentrationofthematerial,theforecastresultsandtherecoveryrateofthesynthesissamples合成样品合成样品(μg·mL−1)预测结果(μg·mL−1)Recovery(%)MGCVMGCVMGCV10.510.51741.1021103.5%110.2%20.51.50.35641.394773.76%92.98%3110.90370.936590.37%93.65%41.511.30030.862586.69%86.25%51.50.51.74740.5117116.5%102.3%3.6实际样品的测定池塘水经离心分离后，取上清液备用。按上述实验方法在最佳条件下测定，重复5次测定，结果见表4。表4实际样品分析（n=5）Table4Theanalysisofactualsample样品加入量(μg·mL−1)测定值a(μg·mL−1)回收率(%)MGCVMGCVMGCV池塘水00----0.50.50.56±0.120.42±0.08112%84%111.04±0.160.91±0.07104%91%a五次测定的平均值±标准偏差第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文4结语本实验提出了用表面活性剂TritonX-114作为萃取剂，浊点萃取水样中的孔雀石绿和结晶紫，采用分光光度法测定，化学计量学κ-矩阵法解析所得数据的新方法，该方法简单，安全，无污染，灵敏度高，用于测定实际样品，其回收率84%-112%，结果令人满意。参考文献[1]AldermanDJ.Malachitegreen:areview[J].Journaloffishdiseases,1985,8:289-298[2]张志刚，施冰，陈鹭平等.液相色谱法同时测定水产品中孔雀石绿和结晶紫残留[J].分析化学,2006,34(5):663-667[3]LarryG.Rushing,HaroldC.Thompson.Simultaneousdeterminationofmalachitegreen,gentianvioletandtheirleucometabolitesincatfishortrouttissuebyhighperformanceliquidchromatographywithvisibledetection[J].JournalofChromatographyB,1997,688:325-330[4]高华鹏,李永夫,沈维军等.高效液相色谱-串联质谱联用测定鳗鱼中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留量[J].理化检验-化学分册,2008,44(2):103-106,122[5]KirsiHalme,ErjaLindfors,KimmoPeltonen.Aconfirmatoryanalysisofmalachitegreenresiduesinrainbowtroutwithliquidchromatography-electrospraytandemmassspectrometry[J].JournalofChromatographyB,2007,845:74-79[6]朱圆圆,苏耀东.非离子表面活性剂浊点萃取痕量金属元素的研究[J].上海：同济大学,2008[7]邹红,朱若华.分析化学中的分离技术[J].分析试验室,2001,20(3):96-108[8]马岳,阎哲,黄骏雄.浊点萃取在生物大分子分离及分析中的应用[J].化学进展,2001,13(l):25-32[9]TayyebehMadrakian,AbbasAfkhami,AfrouzMousavi,Spectrophotometricdeterminationoftraceamountsofuranium(VI)inwatersamplesaftermixedmicelle-mediatedextraction[J].Talanta,2007,71:610–614[10]XiashiZhu,ZhengZhu,ShaoboWu,Determinationoftracevanadiuminsoilbycloudpointextractionandgraphitefurnaceatomicabsorptionspectroscopy[J].MicrochimActa,2008,161:143-148第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文[11]谢夏丰，陈建荣,郭伟强.TAN浊点萃取一高效液相色谱法测定铁、钴、镍[J].浙江大学学报(理学版),2007,34(1):62-65[12]杨晓东，肖珊美，雷宇等.浊点萃取-分光光度法测定水样中微量钒[J].光谱实验室，2007,24(6):1191-1194[13]WeiLiu,WeijunZhao,JianboChen,Ming-minYang,AcloudpointextractionapproachusingTritonX-100fortheseparationandpreconcentrationofSudandyesinchillipowder[J].analyticachimicaacta,2007,605:41-45[14]马岳,阎哲,黄骏雄.浊点萃取在生物大分子分离及分析中的应用[J].化学进展,2001,13(l):25-32[15]N.Pourreza,Sh.Elhami，SpectrophotometricdeterminationofmalachitegreeninfishfarmingwatersamplesaftercloudpointextractionusingnonionicsurfactantTritonX-100[J].AnalyticaChimicaActa,2007,596:62-65第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文综述浊点萃取的原理及应用余柏威综述邓健审校摘要：本文简要介绍了浊点萃取技术和浊点现象，表面活性剂的作用和选取原则，浊点萃取的原理、操作方法、影响因素,浊点萃取法的分离机理及其在测定环境样品中痕量金属离子的前处理时的应用。关键词：表面活性剂、浊点现象、浊点萃取、分光光度法萃取是一种常用的分离手段，萃取方法则多种多样。工业中常用的萃取技术有：超临界萃取、微波萃取、水蒸汽蒸馏和索氏提取等等。这些方法各有所长，又各有一定的局限：有的设备和投资昂贵；有的需要使用较多的易挥发性有机溶剂；有的长时、高温易使具有生物活性的被分离物失活或损失。特别是在进行食品中微量成份分析时，用上述方法进行分析前的预处理均受到一定的限制。浊点萃取技术（CloudPointExtraction，简称CPE）是近年来出现的一种新兴的环保型液－液萃取技术，它以表面活性剂的浊点现象为基础，通过改变实验参数(如溶液的pH值、温度等)引发相分离，作为测定环境样品中痕量金属离子的前处理手段，在分离和富集痕量金属离子方面起着重要作用。浊点萃取分离技术的操作在两水相之间进行，避免了对人体有害的有机溶剂的使用，也避免了挥发性有机溶剂对环境的影响，而且表面活性剂用量小，萃取分离速度快，萃取富集率最高可达100%，因此它具有经济、安全、高效、操作简便且应用范围广等优点，是高灵敏度、高选择性的“绿色分析方法”该法已成功的应用于金属离子、生物物质、环境样品的前处理[1-3]和分离、纯化技术中。1表面活性剂与浊点现象表面活性剂的重要功能之一是它的增溶作用[4]第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文。增溶作用是表面活性剂在水溶液中浓度达到临界胶束浓度，而形成胶束后，能使不溶或微溶于水的有机物的溶解度显著增大，形成澄清透明溶液的现象。形成的增溶体系是热力学稳定体系。浊点萃取法除利用了表面活性剂的增溶作用外，还利用了表面活性剂的另一重要性质-浊点现象。所谓浊点(CP)[5]现象，是指在一定的温度范围内，表面活性剂易溶于水成为澄清的溶液，而当温度升高（或降低）一定程度时，溶解度反而减小，会在水溶液中出现混浊、析出、分层的现象。溶液由透明变为混浊时的温度称为浊点。这种混浊的溶液静置一段时间（或离心）后形成透明的两液相，一相为量少且含有较多被萃取物的表面活性剂相，另一相为量大且表面活性剂的浓度处于CMC的水相。这种现象是可逆的，一经冷却又可恢复为均相的溶液。产生浊点现象的温度依表面活性剂的类型、浓度和外界条件的变化而变化的。一般说来，表面活性剂的浊点随其憎水部分的碳链的增长而降低，随亲水链的增长而升高；随浓度的增大而升高。表面活性剂溶液的相分离行为与表面活性剂的种类有关。当表面活性剂为非离子型时，体系的温度要加热到浊点温度以上时才产生浊点分离现象，温度在浊点温度以下为单相；当表面活性剂为两性离子型时，体系的温度则要降低到浊点温度以下时才产生浊点分离现象，浊点温度以上为单相[6]。2浊点萃取技术的原理当超过胶束浓度(CMC)时，表面活性剂分子聚集成相互关联的缔合体，形成胶束溶液。当温度超过浊点时，胶束溶液明显分为两相，一相是表面活性剂脱离水相开始下沉，最后沉积为很小的体积(一般为100～200μL)，另一相主要是浓度为CMC的表面活性剂水溶液。造成这种异常的溶解性质的内在原因是非离子表面活性剂分子内的聚氧乙烯链中的醚键结构。链中的醚键氧原子容易与水分子缔合而形成氢键，但又很不稳定，温度升高时容易破坏。于是，发生分层、析出而不溶的现象，由此导致非离子表面活性剂在浊点和高温下发生相分离。溶液中的疏水性物质与表面活性剂的疏水基团结合，被萃取进入表面活性剂相，而亲水性物质仍留在水相中，再经两相分离，就可将样品中的物质分离出来，这种萃取方法就是浊点萃取[7]。当溶液中存在金属螯合物时，大部分金属螯合物具有微溶于水的特性，而表面活性剂对金属螯合物只有较好的增溶作用，因此金属螯合物容易与表面活性剂一起沉积为富胶束相，达到分离富集目的。浊点萃取效率取决于配合体的疏水性和螯合体形式，配合体的疏水性越低则富集效率越小，反之就越大，其富集效率最高可达到100％。当温度低于CP时，溶液恢复均相，富集被打破[8]。第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文3浊点萃取的操作方法和影响因素3.1操作方法CPE的操作流程见图1图1CPE处理流程图Fig.1TheprocessingflowofCPE盐或其他成分样品表面活性剂在适当的温度下保持平衡离心分离表面活性剂相分析稀释或净化由图可见浊点萃取的一般过程为:样品—加表面活性剂—加添加剂—水浴加热至浊点—离心—冷却分离—稀释或净化表面活性剂相—分析。3.2影响浊点萃取的各种因素3.2.1表面活性剂的类型及性质的影响就非离子型表面活性剂（CnEm）而言，CPE效率受其憎水和亲水两部分的影响。当亲水部分相同时，在n<12以前是随碳链的长度增加而萃取效率增大。但n<12时则出现相反的结果。若憎水部分相同，萃取效率是随m的增加而减小。应用CPE技术时，理想的表面活性剂应是：n的数目适中，m的数目较小。从而C8E3、C7E3是人们认为较理想的物质。3.2.2平衡温度和时间的影响第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文平衡温度和时间对CPE效率的影响要视表面活性剂及被萃取物的结构而定。一般说来，若要达到较好的萃取效率，平衡温度至少要比表面活性剂的浊点温度高出15-20℃。增长平衡时间会提高萃取效率，通常平衡时间在30min左右就具有较好的萃取效率。3.2.3pH的影响体系的pH值对非离子型表面活性剂的萃取效率影响不大，但如果是离子型表面活性剂体系，对其影响却十分显著。要获得较好的萃取效率，体系的pH应控制在被萃取物处于电中性状态，如在萃取氯酚时，体系的pH在接近9和大于9时萃取效率很低，而pH小于9时，则具有很高的萃取效率。而在萃取生物大分子如蛋白质时，体系的pH应控制在等电点附近，此时蛋白质具有较强的疏水性，易被萃取。3.2.4添加剂的影响添加剂的加入对萃取效率影响不大，但很多添加物如电解质、有机物等都在很大程度上影响表面活性剂的CP，引发表面活性剂水溶液的相分离。其影响情况大致如下：（1）使非离子型表面活性剂的CP降低。这些添加剂有盐析型的电解质（氯化物、硫酸盐、碳酸盐、叠氮化合物等）和一些有机物（如与水能完全互溶的有机脂肪醇、脂肪酸；苯酚；多元醇包括葡萄糖、蔗糖、丙三醇）及水溶性聚合物如聚乙二醇、环糊精等）。这些电解质和有机物能使非离子型表面活性剂的#F降低的原因，主要是由于使胶束中氢键断裂脱水，导致表面活性剂分子沉淀而引发相分离[9]。（2）使表面活性剂的CP升高。具有这种作用的物质有盐溶型的电解质（如硝酸盐、碘化物、硫氰酸盐等）、可溶于胶束的非极性有机物、蛋白质变性剂（尿素、硫尿衍生物等）、阴离子型表面活性剂和其它水溶助剂（如甲苯磺酸钠）。（3）对于两亲性型表面活性剂，添加剂的作用与对非离子型表面活性剂的作用时的情况完全相反。4浊点萃取法的分离机理改变温度是CPE中最常用的引发相分离的方法。不同体系中，表面活性剂胶束溶液浓度与浊点温度的共溶曲线形状不同(见图2)。图2A为非离子表面活性剂胶束溶液，当胶束溶液温度低于CPT时，溶液呈均相(L，均相区)，高于CPT时则呈两相(2L第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文，双相区)，曲线最低点对应的浓度与温度分别为表面活性剂的CMC和CMT。目前对于产生两相分离的机理有两种观点，一是非离子表面活性剂的亲水基如聚氧乙烯链在加热时脱水，使胶团间因水合作用产生的排斥力被范德华引力取代，导致胶团絮凝而分相；二是温度升高使聚氧乙烯链的构象发生变化，从而引起胶束溶液分层。图2B为两性离子表面活性剂胶束溶液，当胶束溶液温度低于CPT时溶液呈两相，高于时则呈均相，与图2A相反。5浊点萃取技术的应用5.1浊点萃取技术在金属元素分析中的应用浊点萃取技术最早是由HirotoisWatanabe[9]用于金属离子的测定的，他用聚氧乙烯壬基苯基醚7.5（PONPE7.5）作表面活性剂，研究并从水中富集了Zn2+。作为痕量元素分离富集的一种手段，浊点萃取技术在分析化学中得到广泛应用，通过表面活性剂对样品中痕量金属离子进行分离和预富集，再结合火焰原子吸收分光光度法(FAAS)、石墨炉原子吸收分光光度法(GFAAS)、等离子发射光谱(ICP)、及紫外、可见分光光度法(UV/VIS)等分析方法或与多种检测技术联用，实现了环境样品中痕量金属离子的准确测定。最近也有将其与色谱技术(高效液相色谱HPLC和毛细管电泳CE)联用进行金属离子的分离、富集和形态分析的报道[10-12]。该方面的相关研究见表1：第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文5.2浊点萃取技术在生物样品分析中的应用浊点萃取技术可用于分离膜蛋白、酶、动植物和细菌的受体，还可与色谱法联用替代硫酸铵分级法作为纯化蛋白质的最初步骤。BordierL[13]最早将浊点萃取技术用于生物学领域，用非离子表面活性剂TritonX-l14成功分离出乙酰胆碱酯酶、噬菌调理素、细菌视紫红质、细胞色素C氧化酶等内嵌膜蛋白，其操作步骤较简单。应用浊点萃取技术分离纯化蛋白质已可实现规模操作，Minuth[14]等成功进行了胆固醇氧化酶的浊点萃取的中试研究，取得了较理想的效果，虽然他们采用的方法耗时较长(约20h)，但是投资少、劳动强度低，萃取效率及浓缩因子与实验室制备结果类似。另外，该技术在临床治疗药物监测、有机毒物分离分析、中药成分提取分离分析等方面均有报道。具体应用实例见表2：第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文5.3浊点萃取技术在有机化合物分析中的应用近年来，浊点萃取通过与多种检测技术联用实现了对多环芳烃[15]和阳离子表面活性剂[16]的测定。非离子型表面活性剂，如辛基酚聚氧乙烯醚(TritonX)系列，壬基酚聚氧乙烯醚(PONPE)系列，聚氧乙烯脂肪醇醚(Brij)系列，羟基合成醇聚氧乙烯醚(Genapo1)系列，是广泛用于从水、土壤、血浆和中药材等萃取和浓缩多环芳烃、多氯化合物、酚及其衍生物、合成杀虫剂、氢化芳香系列化合物和药物等的浊点萃取化合物。近年来，一些两性表面活性剂，如3-(壬基二甲基胺)丙基硫酸盐和3-(癸基二甲基胺)丙基硫酸盐等，以及阴离子性表面活性剂，如SDS、SDBSA和SDSA也得以在浊点萃取技术中加以应用，表面活性剂的存在阻止了一些有机共存物(如腐殖酸等)对待分析物的破坏作用。浊点萃取技术也被用于毛细管电泳和毛细管电色谱分析三嗪类除草剂和PAHs、PCDDS、邻苯二甲酸酯类环境污染物[17]前的浓缩处理，所采用的表面活性别分别为TritonX-114和GenapolX-80。具体应用实例见表3：第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文6结论与展望浊点萃取是一种简单、安全、快捷的分离富集方法，已经成功环境、医学、食品等许多领域替代传统的萃取方法。它具有以下优点：(1)应用范围广，萃取效率高，富集倍数大。(2)安全、经济。(3)表面活性剂易于处理。(4)样品在萃取过程中不易变性。(5)便于操作。(6)易与其他分析仪器联用。(7)可实现大批量连续分析。但是作为一种新兴的分离及样品前处理方法，浊点萃取技术在理论基础和应用方面都有许多研究仍需深入，与其他检测仪器联用进行分析的手段也需不断改进，例如表面活性剂所具有的粘性以及测定时产生气泡，均会对试信号的连续性和稳定性产生负面影响，另外，浊点萃取技术与气相色谱的联用没有得到充分的发展，而气相色谱分析是一种应用范围广、检测器种类多、分析结果灵敏的检测方法。确定其反应机理，提高其应用范围，将会极大的促进该技术的发展及普及。第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文参考文献[1]WLHinze,EPramauro.Acriticalreviewofsurfactant-mediatedphaseseparations(cloud-pointextractions):TheoryandApplications,CriticalReviewsinAnalyticalChemistry[J].1993,24(2):133.[2]CLiu,DTKamei,JAKingetal.Separationofproteinsandvirusesusingtwo-phaseaqueousmicellarsystems,JournalofChromatographyB[J].1998,711:127.[3]FHQuina,WLHinze.Surfactant-Mediatedcloudpointextractions:Anenvironmentallybenignalternativeseparationapproach,Industrial&EngineeringChemistryResearch[J].1999,38(11):4150-4168.[4]梁治齐.功能性乳化剂与乳状液[M].北京:中国轻工业出版社，2000.[5]侯万国.应用胶体化学[M].北京：科学出版社，1998.[6]ICasero,DSiciliaandSRubioetal.,Anacid-inducedphasecloudpointseparationapproachusinganionicsurfactantsfortheextractionandpreconcentrationoforganiccompounds,AnalyticalChemistry[J].71(1999),pp.4519-4526.[7]李干佐，郭荣．微乳液理论及其应用[M]．北京：石油工业出版社，1995，15-16．[8]PaleologosEK，VlessidisAG，KarayannisMI，eta1．On-linesorptionpreconcentrationofmetalsbasedonmixedmicellecloudpointextractionpriortotheirdeterminationwithmicellarchemiluminescence:Applicationtothedeterminationofchromiumatngl−1levelsAnalyticaChimicaActa[J].2003，477：223-231．[9]H.Watanabe,H.Tanaka.Anon-ionicsurfactantasanewsolventforliquid-liquidextractionofzinc(II)with1-(2-pyridylazo)-2-naphthol[J].Talanta，1978，25：585[10]TangAN，JiangDQ，YanXP，eta1．CloudpointextractionpreconcentrationforcapillaryelectrophoresisofmetalionsAnalyticaChimicaActa[J].2004，507：199-204．[11]TangAN,JiangDQ，YanJ．Cloudpointextractionforhigh-performanceliquidchromatographicspeciationofCr(III)andCr(VI)inaqueoussolutions,JournalofChromatographyA[J].2004，1036：183-188．[12]ClaudiaOrtega,SoledadCerutti,RobertoA.Olsina，eta1．Simultaneousdeterminationofdysprosiumandironinurinebycapillaryzoneelectrophoresiscoupledtocloudpointextraction,Journalofpharmaceuticalandbiomedicalanalysis[J].2004,36:721-727．第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文[13]BordierC．PhaseseparationofintegralmembraneproteinsinTritonX-114solution,JournalofBiologicalChemistry[J].1981,256(4):1604-1607．[14]MinuthT，GierenH，PapeU，eta1．Pilotscaleprocessingofdetergent-basedaqueoustwo-phasesystems,Biotechnologyandbioengineering[J].1997,55(2):339-347．[15]D.Sicilia,S.Rubio,D.Pérez-Bendito,eta1．Anionicsurfactantsinacidmedia:anewcloudpointextractionapproachforthedeterminationofpolycyclicaromatichydrocarbonsinenvironmentalsamples,AnalyticaChimicaActa[J].1999,392(1):29-38．[16]MerinoF，RubioS，PerezbenditoD．Solid-PhaseExtractionofAmphiphilesBasedonMixedHemimicelle/AdmicelleFormation: ApplicationtotheConcentrationofBenzalkoniumSurfactantsinSewageandRiverWaterJournalofChromatographyA[J],2003,998(1-2):143-154．[17]R.Carabias-Martínez,E.Rodríguez-Gonzalo,J.Domínguez-Alvarez,eta1．CloudPointExtractionasaPreconcentrationStepPriortoCapillaryElectrophoresis,AnalyticalChemistry[J].1999,71:2468-2474．第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文英文文献译文及原文英文文献译文：非离子表面活性剂TX-100浊点萃取-分光光度测定鱼塘水中孔雀石绿的含量摘要本文提出了用TritonX-100在pH=2.5的条件下浊点萃取-分光光度法测定痕量孔雀石绿的新方法。富胶束相用乙醇稀释，在630nm处测定其吸光度。研究了pH、TritonX-100、浊点温度、时间和不同离子等对实验的影响。标准曲线的线性范围是4–500ng·mL−1，r=0.9996(n=10)，检测限是1.2ng·mL−1，20和300g·mL−1的孔雀石绿的相对标准偏差分别为1.48and1.13%(n=8)。该方法可以测定应用于测定不同养鱼场的水和河水。关键词浊点萃取;孔雀石绿;分光光度法;TritonX-1001.引言孔雀石绿被用作水产养殖和渔业中的杀菌剂和防腐剂，也被广泛用来染色棉花，羊毛，皮革等。人们怀疑孔雀石绿可以导致肿瘤，并且研究表明它对淡水鱼具有很高的毒性。研究还表明高浓度的孔雀石绿(0.1mgL−1)还会严重破坏鱼的内部器官和鱼卵的发育。大约有20%的染料没经过任何处理就被倒入河流。因为它在工业中的重要性以及它可能接触到人类，它潜在的危害到人类的健康并影响环境。因此有必要提出一种灵敏可靠的测定孔雀石绿的新方法。测定孔雀石绿的一些方法已有报道。这些方法包括：磁性亲和吸附剂固相萃取-分光光度法，液相色谱-可见分光光度法，液相色谱-质谱法(LC-MS)，气相色谱-质谱法(GC-MS)和毛细管电泳。其中一些方法的操作比较麻烦、需要复杂的仪器，如LC-MS。萃取时，用非离子表面活性剂进行浊点萃取是一个高效富集痕量组分的方法，近几年该方法被广泛的研究。一些非离子表面活性的水溶液剂在超过某一温度时会表现出浊点或浑浊现象。此时的温度叫做浊点温度，当含有非离子表面活性剂的溶液被加热到浊点温度，溶液就被分为两相。一个是含有大量表面活性剂和被分析物的富胶束相，另一个是含有低浓度表面活性剂的水相，该分离方法就叫浊点萃取。含有被分析物的富胶束相被分离、稀释，然后用合适的方法测定。第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文浊点萃取是一个容易、安全、快速和便宜的方法，该方法已被用于分离、纯化和富集包括金属离子和有机化合物在内的各种物质。本文提出了一种简便、灵敏的测定渔场水样中孔雀石绿的浊点萃取-分光光度萃取法。该方法基于孔雀石绿被萃取进入非离子表面活性剂TritonX-100胶束中，然后用乙醇溶解富胶束相，并在630nm左右测量其吸收度。2.实验2.1仪器一台适用于1cm玻璃比色皿的Jasco型UV-visible7850分光光度计用来记录吸收光谱和吸光度。一个带有玻璃电极的型号为632的Metrohm数显酸度计用来测定pH。一个用于浊点温度实验时控制温度的Colora型水浴自动调温器。2.2试剂所有试剂均为分析纯，且未经纯化处理。1000μg·mL−1的孔雀石绿储备液的制配：称取0.1g孔雀石绿试剂置于100mL的容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度。所需的溶液用储备液稀释制得。pH=2.5的柠檬酸盐缓冲酸的制配：称取2.1015g柠檬酸并溶解于100mL水中，加入0.1mol·L-1的NaOH，用酸度计调节pH至2.5。0.5mol·L-1ofTritonX-100(Aldrich)的制配：称取80.8590gTritonX-100于250mL的容量瓶里，用水溶解并稀释至刻度。苯甲酸（1mol·L-1）的制配：称取30.5309g的苯甲酸(Merck)于250mL的容量瓶里，用乙醇溶解并稀释至刻度。2.3实验步骤一份孔雀石绿溶液（其最终的浓度在4-500ngmL-1范围内），6mLpH2.5的柠檬酸缓冲液，2.5mL0.5mol·L-1的TritonX-100和6mL1mol·L-1的苯甲酸被依次加到50mL的容量瓶中并用水稀释到刻度。然后将该溶液转移的50mL试管中，放入40℃在恒温槽中恒温20min。为了相分离完全，将溶液放在冰浴中冷却，移除水相。富胶束相用乙醇稀释至2mL。在630nm处测定其吸光度。标准加入法时，在标准溶液中先加入以上试剂，再加入35mL水样，然后按上述的浊点萃取程序进行实验。第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文3.实验和讨论做这个实验目的是研究一种简单、灵敏的利用浊点萃取-分光光度法测定孔雀石绿的方法。记录的吸收光谱显示浊点萃取后孔雀石绿的最大吸收波长在630nm。因此，所有的测定都在这一个波长下进行。为了达到最高的灵敏度，各种参数的影响都在提出的这种方法下进行了研究。3.1.pH的影响研究了浊点萃取100ng·mL-1的孔雀石绿时的不同pH的影响，通过添加HCl来调节了不同pH，研究范围是pH2-6。图1显示了在最大波长630nm处不同pH对孔雀石绿吸光度的影响，在pH2.5时有最大吸收，高于pH2.5时溶液颜色逐渐变浅，吸光度不断下降。因此，接下来的研究都在pH2.5这一条件下进行。研究了pH2.5时的各种缓冲体系，如柠檬酸盐、磷酸盐和甲酸盐缓冲体系，最终选择了柠檬酸盐缓冲体系，因为它不改变浊点萃取后的吸光度。所以，6mlpH2.5的柠檬酸缓冲液用来保持样品液在pH2.5。3.2.TritonX-100的浓度的影响一个好的浊点萃取是通过减小相体积比来达到最大的萃取效率，也就是说要达到最大的富集因子。因此，研究了在提出的方法下表面活性剂浓度对萃取体系的影响。图2显示了不同TritonX-100浓度对吸光度的影响。观察了TritonX-100浓度超过0.020mol·L-1的定量萃取。最佳表面活性剂TritonX-100浓度第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文为0.025mol·L-1，选择此浓度是为了达到最佳的分析信号以便于有尽可能最大的萃取效率。3.3.苯甲酸的影响一些添加剂如酚类化合物及电解质对非离子表面活性剂浊点萃取的影响已有报告。据报道，加入苯酚、苯甲酸和二甲苯可以降低浊点温度，同时可以获得一个更高的萃取率。在此基础上，研究了苯酚和苯甲酸对实验的影响，结果发现苯甲酸可以影响回收率。因此，研究了在0.04-0.16mol·L-1范围内苯甲酸浓度对实验的影响。结果如图3所示，吸光度随着苯甲酸浓度的提高而增加，在0.10mol·L–1时达到最大，随后保持不变。因此，选定0.12mol·L-1为苯甲酸的最佳浓度。3.4.反应温度和时间的影响选用最短的平衡时间和尽可能低的平衡温度，来达到较好的萃取率和相分离。因此，研究了30-50℃温度范围内平衡温度对实验的影响，结果发现40℃就足够了。研究了5-30min内平衡时间对萃取率的影响，选择20min为最佳平衡时间。第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文3.5.分析性能在最优条件下，孔雀石绿的线性范围是4-500ng·ml-1。线性方程是A=2.9×10−3C+9.7×10−3，其中A是吸光度，C是孔雀石绿的浓度（单位是ng·ml-1），相关系数（R）为0.9996（n=10）。检出限（3sb/m）为1.2ng·ml-1，20和300ng·ml-1孔雀石绿的相对标准偏差（RSD）分别是1.48和1.13%（n=8）。3.6.干扰实验研究外加离子大部分会出现在水样中从而影响了浊点萃取孔雀石绿的选择性。本文将100ngml-1孔雀石绿和不同量的外加离子按一般步骤进行实验。容忍限度定义为外加离子的量引起的吸光度变化不超过5%，结果见表1。可以看到本实验达到了一个较好的灵敏度。第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文4.实际应用为了要测试提出方法的可信度，在鱼塘水和河水样品中加入孔雀石绿用于实验。为了实现这个目的，35ml的样品液按上述步骤进行实验。为了校正目的，工作标准液按相同的预富集步骤用来作为样品液。对提出的步骤的有效性的确认进行了孔雀石绿的加标回收。结果见表2，显示出了良好的回收率，确认了提出的方法应用于实际样品的有效性。5.结论本文提出了一种新的、简便、灵敏的预富集孔雀石绿的浊点萃取法。之所以选择TritonX-100是因为它浊点温度低，富胶束相密度高有利于相分离而不需要离心，容易商业化，价格相对较低，低毒性。该方法可以测定应用于测定不同养鱼场的水和河水。感谢作者由衷感谢ShahidChamran大学研究理事会为这项工作提供的研究基金(1384)。第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文英文文献原文AnalyticaChimicaActa596(2007)62–65SpectrophtometricdeterminationofmalachitegreeninfishfarmingwatersamplesaftercloudpointextractionusingnonionicsurfactantTritonX-100N.Pourreza∗,Sh.ElhamiDepartmentofChemistry,CollegeofScience,ShahidChamranUniversity,Ahvaz,IranReceived10January2007;receivedinrevisedform9April2007;accepted23May2007Availableonline29May2007Abstract:Anovelandsensitivecloudpointextractionprocedureforthedeterminationoftraceamountsofmalachitegreenbyspectrophotometrywasdeveloped.MalachitegreenwasextractedatpH2.5mediatedbymicellesofnonionicsurfactantTritonX-100.Theextractedsurfactant-richphasewasdilutedwithethanolanditsabsorbancewasmeasuredat630nm.TheeffectofdifferentvariablessuchaspH,TritonX-100concentration,cloudpointtemperatureandtimeanddiverseionswasinvestigatedandoptimumconditionswereestablished.Thecalibrationgraphwaslinearintherangeof4–500ngmL-1ofmalachitegreenintheinitialsolutionwithr=0.9996(n=10).Detectionlimitbasedonthreetimesthestandarddeviationoftheblank(3Sb)was1.2ngmL-1andtherelativestandarddeviation(R.S.D.)for20and300ngmL-1ofmalachitegreenwas1.48and1.13%(n=8),respectively.Themethodwasappliedtothedeterminationofmalachitegreenindifferentfishfarmingandriverwatersamples.1.IntroductionMalachitegreenisstillusedasfungicidesandantisepticinaquacultureandfisheries[1].Ithasalsobeenusedextensivelyasfoodcoloringagent,dyeingcotton,wool,andleather.Malachitegreenissuspectedtoactasatumorpromoterandstudieshaveshownthatitishighlytoxictofreshwaterfish[2–4].Ithasalsobeenshownthathighconcentrationofmalachitegreen(morethan0.1mgL-1)causesseverdamagetofishinternalorgansandalsotogrowthoffisheggs[5].About20%ofthedyestuff第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文producedintheworldisdischargedintostreamswithoutanypretreatment.Therefore,becauseofitsindustrialimportanceandpossibleexposuretohumanbeing,malachitegreenposesapotentialhealthhazardandisofenvironmentalconcern.Thus,developmentofsensitiveandreliablemethodisnecessaryforthedeterminationofmalachitegreeninenvironmentalsamplessuchaswastewaters.Severalmethodsforthedeterminationofmalachitegreenhavebeenreported.Theseincludespectophotometricaftersolidphaseextractionusingmagneticaffinityadsorbent[6]liquidchromatographywithvisibledetection[7,8],liquidchromatography-massspectrometry(LC–MS)[9,10],GasChromatography–MS(GC–MS)[11]andcapillaryelectrophoresis[12].SomeofthesemethodsarelaboriousandrequiresophisticatedinstrumentslikeLC–MS[9,10].Micellarextractionwithnonionicsurfactantsatcloudpointisahighlyeffectivemethodformicrocomponentspreconcentration,whichhasbeendeveloped,intensivelyinrecentyears.Theaqueoussolutionsofsomenonionicsurfactantsexhibitcloudpointorturbidityaboveacertaintemperature.Thetempera-tureatwhichthisphenomenonoccursiscalledcloudpointtemperatureandthemethodologyisknownascloudpointextraction[13,14].Whensolutionscontainingnonionicsurfactantsareheatedabovethecloudpointtemperature,twophasesareformed.Thefirstoneisasurfactant-richphasecontaininghighconcentrationofsurfactantandtheanalyte,theotheroneistheaqueousphasecontaininglowconcentrationofsurfactant,thesurfactant-richphasecontainingtheanalyteisseparated,dilutedwithsmallvolumeofasolventandtheanalyteisdeter-minedbyasuitabletechnique.Cloudpointextractionprocedureisaneasy,safe,rapidandinexpensivemethodologywhichhasbeendesignedfortheseparation,purificationandpreconcentrationofavarietyofsub-stancesincludingmetalionsandorganiccompounds[15–17].Thispaperdescribesanovel,simpleandsensitivecloudpointextractionmethodforthedeterminationofmalachitegreeninfishfarmingwatersamples.ThemethodisbasedontheextractionofmalachitegreenmediatedbymicellesofnonionicsurfactantTritonX-100,dissolvingthesurfactant-richphaseinethanolandmeasuring第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文itsabsorbancebyspectrophotometryat630nm.2.Experimental2.1.ApparatusAJascoModel7850UV-visiblespectrophotometerwasusedforrecordingabsorptionspectraandabsorbancemeasurementsusing1cmglasscells.AMetrohmdigitalpHmeterModel632withacombinedglasselectrodemeasuredthepH.AthermostatbathmodelColoramaintainedatthedesiredtemperaturewasusedforthecloudpointtemperatureexperiments.2.2.ReagentsAllreagentswereanalyticalgradeandusedwithoutfurtherpurification.Astocksolutionof1000gmL-1ofmalachitegreen(Merck)waspreparedbydissolving0.1gofthereagentinwateranddilutingto100mLinavolumetricflask.Thedesiredconcentrationswereobtainedbysuccessivedilutions.AcitratebufferpH2.5waspreparedbydissolving2.1015gofcitricacid(Merck)in100mLofwaterandadding0.1molL-1NaOH(Merck)toadjustthepHto2.5usingapHmeter.0.5molL-1ofTritonX-100(Aldrich)waspreparedbydissolving80.8590ginwateranddilutingto250mLinavolumetricflask.Asolutionofbenzoicacid(1molL-1)waspreparedbydissolving30.5309gofbenzoicacid(Merck)inethanolanddilutingto250mLinavolumetricflask.2.3.ProcedureAnaliquotofthemalachitegreensolution(sothatitsfinalconcentrationwouldbeintherangeof4–500ngmL-1),6mLofcitratebufferpH2.5,2.5mLof0.5molL-1ofTritonX-100and6mLof1molL-1benzoicacidwereaddedtoa50mLvolumetricflaskanddilutedtothemarkwithwater.Theresultantsolutionwastransferredtoa50mLtubeandequilibratedat40ºCinathermostatbathfor20min.Inordertoseparatethephasescompletelythesolutionwascooledinanicebath.Theremovalofaqueousphasewascarriedoutbydecantation.Thesurfactant-richphasewasdilutedwithethanolina2mLvolumetricflask.Theabsorbanceofthesolutionwasmeasureat630nm.Forthestandardadditionprocedures,35mLaliquotsofthesamplewereaddedtothestandardsbeforetheadditionofthereagentsmentionedaboveandthe第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文samecloudpointextractionprocedurewasfollowed.3.ResultsanddiscussionsTheexperimentswerecarriedouttodevelopasimpleandsensitivecloudpointextractionmethodforspectrophotometricdeterminationofmalachitegreen.TheabsorptionspectraofmalachitegreenrecordedaftercloudpointextractionwithTritonX-100showedamaximumabsorptionbandat630nm.Therefore,allthemeasurementswerecarriedoutatthiswavelength.Theeffectofvariousparametersontheperformanceofthemethodwasinvestigatedinordertoachievehighestsensitivity.3.1.EffectofpHTheeffectofpHonthecloudpointextractionof100ngmL-1ofmalachitegreenwasstudiedintherangeof2–6bytheadditionofhydrochloricacid.Fig.1showstheinfluenceofpHontheabsorbanceofthemalachitegreenat630nm.AsitisobservedmaximumabsorbanceisobtainedatpH2.5.AthigherpHvalues,malachitegreenbecomescolorlessanditsabsorbanceisdecreased.Therefore,pH2.5waschosenforfurtherwork.DifferentbuffersystemswithpH2.5suchascitrate,phosphateandformatewereexaminedandcitratebufferwasselectedbecauseitdidnotchangetheabsorbanceofthesolutionaftercloudpointextraction.Thus,6mLofcitratebufferpH2.5wasaddedtothesamplesolutionstomaintainthepHat2.5.第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文3.2.EffectofTritonX-100concentrationAsuccessfulCPEwouldbethatwhichmaximizestheextractionefficiencythroughminimizingthephasevolumeratiothus,maximizingitsenrichmentfactor.Therefore,theeffectofsurfactantconcentrationontheperformanceoftheextractionsystemwasstudied.ThevariationofabsorbanceasafunctionofTritonX-100concentrationisshowninFig.2.QuantitativeextractionwasobservedwhentheTritonX-100concentrationwasabove0.020molL-1.Theoptimumsurfactantconcentrationof0.025molL-1ofTritonX-100,wasselectedinordertoachievetheoptimalanalyticalsignalinconjunctionwiththehighestpossibleextractionefficiency.第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文3.3.EffectbenzoicacidconcentrationStudiesoftheeffectsofsomeadditives,suchasphenols[18]andelectrolytes[19,20]onthecloudpointbehaviorofnonionicsurfactantshavebeenreported.Itwasobservedthatthepresenceofphenol,benzoicacidandxylenesdecreasethecloudpointtemperature,resultinginamoreefficientextraction.Basedonthisdiscussion,theeffectofphenolandbenzoicacidonthecloudpointbehaviorofthesystemwasinvestigatedandbenzoicacidwasfoundtoaffecttherecoveryofextraction.Therefore,itseffectintheconcentrationrangeof0.04–0.16molL-1wasstudied.AsitisshowninFig.3,theabsorbancewasincreaseduptobenzoicacidconcentrationof0.10molL-1andremainedconstantabovethat.Thus,aconcentrationof0.12molL-1ofbenzoicacidwaschosenasoptimum.3.4.EffectsofequilibrationtemperatureandtimeItwasdesirabletoemploytheshortestequilibrationtimeandthelowestpossibleequilibrationtemperature,asacompromisebetweencompletionofextractionandefficientseparationofphases.Therefore,theeffectofequilibrationtemperatureintherangeof30–50ºCwasstudied.Itwasfoundthat40ºCisadequatefortheanalysis.第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文Thedependenceofextractionefficiencyuponequilibrationtimewasalsostudiedforatimeintervalof5–30min.Anequilibrationtimeof20minwaschosenasanoptimumvalue.3.5.AnalyticalperformanceAlinearcalibrationgraphintherangeof4–500ngmL-1ofmalachitegreenintheinitialsolutionwasobtainedusingtheoptimizedconditions.TheequationforthelineisA=2.9×10-3C+9.7×10-3withregressioncoefficient(r)of0.9996(n=10)whereAistheabsorbanceandCistheconcentrationofmalachitegreeninngmL-1.Detectionlimitbasedonthreetimesthestandarddeviationoftheblank(3Sb)was1.2ngmL-1andtherelativestandarddeviation(R.S.D.)for20and300ngmL-1ofmalachitegreenwas1.48and1.13%(n=8),respectively.3.6.Interferencestudies第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文Performingtheprocedureinthepresenceofforeignionsmostlythosepresentinwatersamplevalidatedtheselectivityofthecloudpointextractionformalachitegreen.Solutioncontaining100ngmL-1ofmalachitegreenandvariousamountsofforeignionswerepreparedandthegeneralprocedurewasfollowed.Thetolerancelimitwasdefinedastheamountofforeignioncausingachangeintheabsorbanceoflessthan±5%.Table1showstheresults.Ascanbeseenaverygoodselectivityisachieved.4.ApplicationsInordertotestthereliabilityoftheproposedmethodology,itwasappliedtothedeterminationofconcentrationsofmalachitegreeninfishfarmingwaterandriverwatersamples.Forthispurpose,35mLofeachofthesampleswastreatedunderthegeneralprocedure.Forcalibrationpurposes,theworkingstandardsolutionsweresubjectedtothesamepreconcentrationprocedureasusedforthesamplesolutions.Spikingmalachitegreentothesamplesperformedthevalidityoftheprocedure.TheresultspresentedinTable2showthatgoodrecoveriesareobtainedandconfirmthevalidityoftheproposedmethodforrealsamples.5.ConclusionsAnovelsensitiveandselectivecloudpointextractionprocedurehasbeen第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文developedasasafe,rapidandinexpensivemethodologyforpreconcentrationofmalachitegreen.TritonX-100waschosenfortheformationofthesurfactant-richphaseduetoitslowCPtemperature;highdensityofthesurfactant-richphase,whichfacilitatesphaseseparationeasilywithoutanyneedforcentrifugation,thecommercialavailabilityandrelativelylowpriceandlowtoxicity.Theproposedmethodcanbeappliedtothedeterminationofmalachitegreeninvariousfishfarmingandriverwatersamples.AcknowledgementTheauthorswishtothankShahidChamranUniversityResearchCouncilforawardingaResearchGrant(1384)forthiswork.References[1]A.Stammati,C.Nebbia,I.D.Angelis,A.G.Albo,M.Carltti,C.Rebecchi,F.Zampaglioni,M.DacastoToxicol.InVitro19(2005)853.[2]B.Bose,L.Motiwale,K.V.K.Rao,CancerLett.230(2005)260.[3]J.J.Jones,J.O.Falkinham,Antimicrob.AgentsChemother.47(2003)2323.[4]S.Srivastava,R.Sinha,D.Roy,Aquat.Toxicol.66(2004)319.[5]R.Peyghan,M.A.Mesbah,A.Rasekh,M.Mohamadi-Dehcheshmeh,ShahidChamranUniv.J.Sci.15(2006)72.[6]I.Safarik,M.Safarikova,WaterRes.36(2002)196.[7]K.Mitrowska,A.Posyniak,J.Zmudzki,J.Chromatogr.A1089(2005)187.[8]W.C.Andersen,S.B.Turnipseed,J.E.Roybal,J.Agric.FoodChem.54(2006)4517.[9]S.B.Turnipseed,W.C.Andersen,J.E.Robal,J.AOAC88(2005)1312.[10]K.C.Lee,J.L.Wu,Z.Cai,J.Chromatogr.B843(2006)247.[11]S.B.Turnipseed,J.E.Robal,J.A.Hurlbut,A.R.Long,J.AOACInt.78(1995)971.[12]C.H.Tsai,P.H.Chan,C.H.Lin,T.C.Chang,C.T.Chia,Electrophoresis27(2006)4688.[13]R.Carabias-Martinez,E.Rodriguez-Gonzalo,B.Moreno-Cordero,J.L.Perez-Pavon,C.Garcia-Pinto,E.F.Laespada,J.Chromatogr.A902(2000)251.[14]C.D.Stalikas,TrendsAnal.Chem.21(2002)343.[15]M.O.Luconi,M.F.Silva,R.A.Olsina,L.P.Fernandez,Talanta51(2000)123.[16]A.N.Tang,D.Q.Jiang,X.P.Yan,Anal.Chim.Acta507(2004)203.第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文[17]M.A.Bezerra,R.E.Bruns,S.L.C.Ferreira,Anal.Chim.Acta580(2006)251.[18]M.Max,E.Azaz,J.ColloidInterfaceSci.57(1976)20.[19]C.C.Nascentes,M.A.Z.Arruda,Talanta61(2003)759–768.[20]L.MeloCoelho,M.A.ZezziArruda,Spectrochim.ActaB60(2005)743.第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文致谢本论文是在邓健老师的精心指导下完成的，从论文的选题，实验现象的讨论到每一个成果的取得,无不凝聚着导师的心血。近三个月的实验让我学到了丰富的专业知识，也炼就了我的心性。当我在实验中遇到困难时，是邓老师给了我信心和鼓励，为我指明方向，让我能顺利完成实验。另外，邓老师渊博的知识、严谨的科研精神、宽容平和的性格都令我受益匪浅，在此我向邓健老师表示最诚挚的谢意！本论文也是在安林学长的帮助下共同完成的，学长扎实的专业知识和一丝不苟的实验态度，让我深深折服，非常感谢学长对我诚挚的帮助！同时，实验室里的刘传湘和李辉两位老师，也为我的实验提供了便利条件，在此，一并表示最诚挚的谢意！也感谢家人对我的支持！再次感谢在完成这篇论文的过程中给予我帮助和关心的所有人！第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下进行的研究工作所取得的成果。尽我所知，除文中已经特别注明引用的内容和致谢的地方外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式注明并表示感谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者（本人签名）：年月日学位论文出版授权书本人及导师完全同意《中国博士学位论文全文数据库出版章程》、《中国优秀硕士学位论文全文数据库出版章程》(以下简称“章程”)，愿意将本人的学位论文提交“中国学术期刊（光盘版）电子杂志社”在《中国博士学位论文全文数据库》、《中国优秀硕士学位论文全文数据库》中全文发表和以电子、网络形式公开出版，并同意编入CNKI《中国知识资源总库》，在《中国博硕士学位论文评价数据库》中使用和在互联网上传播，同意按“章程”规定享受相关权益。论文密级：□公开□保密（___年__月至__年__月）(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)作者签名：_______导师签名：______________年_____月_____日_______年_____月_____日第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文独创声明本人郑重声明：所呈交的毕业设计(论文)，是本人在指导老师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，成果不存在知识产权争议。尽我所知，除文中已经注明引用的内容外，本设计（论文）不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中以明确方式标明。本声明的法律后果由本人承担。 作者签名:二〇一〇年九月二十日 毕业设计（论文）使用授权声明本人完全了解滨州学院关于收集、保存、使用毕业设计（论文）的规定。本人愿意按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版，同意学校保存学位论文的印刷本和电子版，或采用影印、数字化或其它复制手段保存设计（论文）；同意学校在不以营利为目的的前提下，建立目录检索与阅览服务系统，公布设计（论文）的部分或全部内容，允许他人依法合理使用。（保密论文在解密后遵守此规定） 作者签名:二〇一〇年九月二十日第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文致谢时间飞逝，大学的学习生活很快就要过去，在这四年的学习生活中，收获了很多，而这些成绩的取得是和一直关心帮助我的人分不开的。首先非常感谢学校开设这个课题，为本人日后从事计算机方面的工作提供了经验，奠定了基础。本次毕业设计大概持续了半年，现在终于到结尾了。本次毕业设计是对我大学四年学习下来最好的检验。经过这次毕业设计，我的能力有了很大的提高，比如操作能力、分析问题的能力、合作精神、严谨的工作作风等方方面面都有很大的进步。这期间凝聚了很多人的心血，在此我表示由衷的感谢。没有他们的帮助，我将无法顺利完成这次设计。首先，我要特别感谢我的知道郭谦功老师对我的悉心指导，在我的论文书写及设计过程中给了我大量的帮助和指导，为我理清了设计思路和操作方法，并对我所做的课题提出了有效的改进方案。郭谦功老师渊博的知识、严谨的作风和诲人不倦的态度给我留下了深刻的印象。从他身上，我学到了许多能受益终生的东西。再次对周巍老师表示衷心的感谢。其次，我要感谢大学四年中所有的任课老师和辅导员在学习期间对我的严格要求，感谢他们对我学习上和生活上的帮助，使我了解了许多专业知识和为人的道理，能够在今后的生活道路上有继续奋斗的力量。另外，我还要感谢大学四年和我一起走过的同学朋友对我的关心与支持，与他们一起学习、生活，让我在大学期间生活的很充实，给我留下了很多难忘的回忆。最后，我要感谢我的父母对我的关系和理解，如果没有他们在我的学习生涯中的无私奉献和默默支持，我将无法顺利完成今天的学业。四年的大学生活就快走入尾声，我们的校园生活就要划上句号，心中是无尽的难舍与眷恋。从这里走出，对我的人生来说，将是踏上一个新的征程，要把所学的知识应用到实际工作中去。回首四年，取得了些许成绩，生活中有快乐也有艰辛。感谢老师四年来对我孜孜不倦的教诲，对我成长的关心和爱护。学友情深，情同兄妹。四年的风风雨雨，我们一同走过，充满着关爱，给我留下了值得珍藏的最美好的记忆。在我的十几年求学历程里，离不开父母的鼓励和支持，是他们辛勤的劳作，无私的付出，为我创造良好的学习条件，我才能顺利完成完成学业，感激他们一直以来对我的抚养与培育。最后，我要特别感谢我的导师赵达睿老师、和研究生助教熊伟丽老师。是他们在我毕业的最后关头给了我们巨大的帮助与鼓励，给了我很多解决问题的思路，在此表示衷心的感激。老师们认真负责的工作态度，严谨的治学精神和深厚的理论水平都使我收益匪浅。他无论在理论上还是在实践中，都给与我很大的帮助，使我得到不少的提高这对于我以后的工作和学习都有一种巨大的帮助，感谢他耐心的辅导。在论文的撰写过程中老师们给予我很大的帮助，帮助解决了不少的难点，使得论文能够及时完成，这里一并表示真诚的感谢。第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文毕业设计（论文）原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重承诺：所呈交的毕业设计（论文），是我个人在指导教师的指导下进行的研究工作及取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或组织已经发表或公布过的研究成果，也不包含我为获得及其它教育机构的学位或学历而使用过的材料。对本研究提供过帮助和做出过贡献的个人或集体，均已在文中作了明确的说明并表示了谢意。作者签名：　　　　　日　期：　　　　　指导教师签名：　　　　　日　　期：　　　　　使用授权说明本人完全了解大学关于收集、保存、使用毕业设计（论文）的规定，即：按照学校要求提交毕业设计（论文）的印刷本和电子版本；学校有权保存毕业设计（论文）的印刷本和电子版，并提供目录检索与阅览服务；学校可以采用影印、缩印、数字化或其它复制手段保存论文；在不以赢利为目的前提下，学校可以公布论文的部分或全部内容。作者签名：　　　　　日　期：　　　　　第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权　　　　大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。涉密论文按学校规定处理。作者签名：日期：年月日导师签名：日期：年月日第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文独创声明本人郑重声明：所呈交的毕业设计(论文)，是本人在指导老师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，成果不存在知识产权争议。尽我所知，除文中已经注明引用的内容外，本设计（论文）不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中以明确方式标明。本声明的法律后果由本人承担。 作者签名:二〇一〇年九月二十日 毕业设计（论文）使用授权声明本人完全了解**学院关于收集、保存、使用毕业设计（论文）的规定。本人愿意按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版，同意学校保存学位论文的印刷本和电子版，或采用影印、数字化或其它复制手段保存设计（论文）；同意学校在不以营利为目的的前提下，建立目录检索与阅览服务系统，公布设计（论文）的部分或全部内容，允许他人依法合理使用。（保密论文在解密后遵守此规定） 作者签名:二〇一〇年九月二十日第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文基本要求：写毕业论文主要目的是培养学生综合运用所学知识和技能，理论联系实际，独立分析，解决实际问题的能力，使学生得到从事本专业工作和进行相关的基本训练。毕业论文应反映出作者能够准确地掌握所学的专业基础知识，基本学会综合运用所学知识进行科学研究的方法，对所研究的题目有一定的心得体会，论文题目的范围不宜过宽，一般选择本学科某一重要问题的一个侧面。毕业论文的基本教学要求是：1、培养学生综合运用、巩固与扩展所学的基础理论和专业知识，培养学生独立分析、解决实际问题能力、培养学生处理数据和信息的能力。2、培养学生正确的理论联系实际的工作作风，严肃认真的科学态度。3、培养学生进行社会调查研究；文献资料收集、阅读和整理、使用；提出论点、综合论证、总结写作等基本技能。毕业论文是毕业生总结性的独立作业，是学生运用在校学习的基本知识和基础理论，去分析、解决一两个实际问题的实践锻炼过程，也是学生在校学习期间学习成果的综合性总结，是整个教学活动中不可缺少的重要环节。撰写毕业论文对于培养学生初步的科学研究能力，提高其综合运用所学知识分析问题、解决问题能力有着重要意义。毕业论文在进行编写的过程中，需要经过开题报告、论文编写、论文上交评定、论文答辩以及论文评分五个过程，其中开题报告是论文进行的最重要的一个过程，也是论文能否进行的一个重要指标。撰写意义：第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文1.撰写毕业论文是检验学生在校学习成果的重要措施，也是提高教学质量的重要环节。大学生在毕业前都必须完成毕业论文的撰写任务。申请学位必须提交相应的学位论文，经答辩通过后，方可取得学位。可以这么说，毕业论文是结束大学学习生活走向社会的一个中介和桥梁。毕业论文是大学生才华的第一次显露，是向祖国和人民所交的一份有份量的答卷，是投身社会主义现代化建设事业的报到书。一篇毕业论文虽然不能全面地反映出一个人的才华，也不一定能对社会直接带来巨大的效益，对专业产生开拓性的影响。但是，实践证明，撰写毕业论文是提高教学质量的重要环节，是保证出好人才的重要措施。2.通过撰写毕业论文，提高写作水平是干部队伍“四化”建设的需要。党中央要求，为了适应现代化建设的需要，领导班子成员应当逐步实现“革命化、年轻化、知识化、专业化”。这个“四化”的要求，也包含了对干部写作能力和写作水平的要求。3.提高大学生的写作水平是社会主义物质文明和精神文明建设的需要。在新的历史时期，无论是提高全族的科学文化水平，掌握现代科技知识和科学管理方法，还是培养社会主义新人，都要求我们的干部具有较高的写作能力。在经济建设中，作为领导人员和机关的办事人员，要写指示、通知、总结、调查报告等应用文；要写说明书、广告、解说词等说明文；还要写科学论文、经济评论等议论文。在当今信息社会中，信息对于加快经济发展速度，取得良好的经济效益发挥着愈来愈大的作用。写作是以语言文字为信号，是传达信息的方式。信息的来源、信息的收集、信息的储存、整理、传播等等都离不开写作。第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文论文种类：毕业论文是学术论文的一种形式，为了进一步探讨和掌握毕业论文的写作规律和特点，需要对毕业论文进行分类。由于毕业论文本身的内容和性质不同，研究领域、对象、方法、表现方式不同，因此，毕业论文就有不同的分类方法。按内容性质和研究方法的不同可以把毕业论文分为理论性论文、实验性论文、描述性论文和设计性论文。后三种论文主要是理工科大学生可以选择的论文形式，这里不作介绍。文科大学生一般写的是理论性论文。理论性论文具体又可分成两种：一种是以纯粹的抽象理论为研究对象，研究方法是严密的理论推导和数学运算，有的也涉及实验与观测，用以验证论点的正确性。另一种是以对客观事物和现象的调查、考察所得观测资料以及有关文献资料数据为研究对象，研究方法是对有关资料进行分析、综合、概括、抽象，通过归纳、演绎、类比，提出某种新的理论和新的见解。按议论的性质不同可以把毕业论文分为立论文和驳论文。立论性的毕业论文是指从正面阐述论证自己的观点和主张。一篇论文侧重于以立论为主，就属于立论性论文。立论文要求论点鲜明，论据充分，论证严密，以理和事实服人。驳论性毕业论文是指通过反驳别人的论点来树立自己的论点和主张。如果毕业论文侧重于以驳论为主，批驳某些错误的观点、见解、理论，就属于驳论性毕业论文。驳论文除按立论文对论点、论据、论证的要求以外，还要求针锋相对，据理力争。第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文按研究问题的大小不同可以把毕业论文分为宏观论文和微观论文。凡届国家全局性、带有普遍性并对局部工作有一定指导意义的论文，称为宏观论文。它研究的面比较宽广，具有较大范围的影响。反之，研究局部性、具体问题的论文，是微观论文。它对具体工作有指导意义，影响的面窄一些。另外还有一种综合型的分类方法，即把毕业论文分为专题型、论辩型、综述型和综合型四大类：1．专题型论文。这是分析前人研究成果的基础上，以直接论述的形式发表见解，从正面提出某学科中某一学术问题的一种论文。如本书第十二章例文中的《浅析领导者突出工作重点的方法与艺术》一文，从正面论述了突出重点的工作方法的意义、方法和原则，它表明了作者对突出工作重点方法的肯定和理解。2．论辩型论文。这是针对他人在某学科中某一学术问题的见解，凭借充分的论据，着重揭露其不足或错误之处，通过论辩形式来发表见解的一种论文。3．综述型论文。这是在归纳、总结前人或今人对某学科中某一学术问题已有研究成果的基础上，加以介绍或评论，从而发表自己见解的一种论文。4．综合型论文。这是一种将综述型和论辩型两种形式有机结合起来写成的一种论文。如《关于中国民族关系史上的几个问题》一文既介绍了研究民族关系史的现状，又提出了几个值得研究的问题。因此，它是一篇综合型的论文。写作步骤：毕业论文是高等教育自学考试本科专业应考者完成本科阶段学业的最后一个环节，它是应考者的总结性独立作业，目的在于总结学习专业的成果，培养综合运用所学知识解决实际问题的能力。从文体而言，它也是对某一专业领域的现实问题或理论第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文问题进行科学研究探索的具有一定意义的论说文。完成毕业论文的撰写可以分两个步骤，即选择课题和研究课题。首先是选择课题。选题是论文撰写成败的关键。因为，选题是毕业论文撰写的第一步，它实际上就是确定“写什么”的问题，亦即确定科学研究的方向。如果“写什么”不明确，“怎么写”就无从谈起。教育部自学考试办公室有关对毕业论文选题的途径和要求是“为鼓励理论与工作实践结合，应考者可结合本单位或本人从事的工作提出论文题目，报主考学校审查同意后确立。也可由主考学校公布论文题目，由应考者选择。毕业论文的总体要求应与普通全日制高等学校相一致，做到通过论文写作和答辩考核，检验应考者综合运用专业知识的能力”。但不管考生是自己任意选择课题，还是在主考院校公布的指定课题中选择课题，都要坚持选择有科学价值和现实意义的、切实可行的课题。选好课题是毕业论文成功的一半。第一、要坚持选择有科学价值和现实意义的课题。科学研究的目的是为了更好地认识世界、改造世界，以推动社会的不断进步和发展第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文。因此，毕业论文的选题，必须紧密结合社会主义物质文明和精神文明建设的需要，以促进科学事业发展和解决现实存在问题作为出发点和落脚点。选题要符合科学研究的正确方向，要具有新颖性，有创新、有理论价值和现实的指导意义或推动作用，一项毫无意义的研究，即使花很大的精力，表达再完善，也将没有丝毫价值。具体地说，考生可从以下三个方面来选题。首先，要从现实的弊端中选题，学习了专业知识，不能仅停留在书本上和理论上，还要下一番功夫，理论联系实际，用已掌握的专业知识，去寻找和解决工作实践中急待解决的问题。其次，要从寻找科学研究的空白处和边缘领域中选题，科学研究。还有许多没有被开垦的处女地，还有许多缺陷和空白，这些都需要填补。应考者应有独特的眼光和超前的意识去思索，去发现，去研究。最后，要从寻找前人研究的不足处和错误处选题，在前人已提出来的研究课题中，许多虽已有初步的研究成果，但随着社会的不断发展，还有待于丰富、完整和发展，这种补充性或纠正性的研究课题，也是有科学价值和现实指导意义的。第二、要根据自己的能力选择切实可行的课题。毕业论文的写作是一种创造性劳动，不但要有考生个人的见解和主张，同时还需要具备一定的客观条件。由于考生个人的主观、客观条件都是各不相同的，因此在选题时，还应结合自己的特长、兴趣及所具备的客观条件来选题。具体地说，考生可从以下三个方面来综合考虑。首先，要有充足的资料来源。“巧妇难为无米之炊”，在缺少资料的情况下，是很难写出高质量的论文的。选择一个具有丰富资料来源的课题，对课题深入研究与开展很有帮助。其次，要有浓厚的研究兴趣，选择自己感兴趣的课题，可以激发自己研究的热情，调动自己的主动性和积极性，能够以专心、细心、恒心和耐心的积极心态去完成。最后，要能结合发挥自己的业务专长，每个考生无论能力水平高低，工作岗位如何，都有自己的业务专长，选择那些能结合自己工作、发挥自己业务专长的课题，对顺利完成课题的研究大有益处。第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文致谢这次论文的完成，不止是我自己的努力，同时也有老师的指导，同学的帮助，以及那些无私奉献的前辈，正所谓你知道的越多的时候你才发现你知道的越少，通过这次论文，我想我成长了很多，不只是磨练了我的知识厚度，也使我更加确定了我今后的目标：为今后的计算机事业奋斗。在此我要感谢我的指导老师——***老师，感谢您的指导，才让我有了今天这篇论文，您不仅是我的论文导师，也是我人生的导师，谢谢您！我还要感谢我的同学，四年的相处，虽然我未必记得住每分每秒，但是我记得每一个有你们的精彩瞬间，我相信通过大学的历练，我们都已经长大，变成一个有担当，有能力的新时代青年，感谢你们的陪伴，感谢有你们，这篇论文也有你们的功劳，我想毕业不是我们的相处的结束，它是我们更好相处的开头，祝福你们！我也要感谢父母，这是他们给我的，所有的一切；感谢母校，尽管您不以我为荣，但我一直会以我是一名农大人为荣。通过这次毕业设计，我学习了很多新知识，也对很多以前的东西有了更深的记忆与理解。漫漫求学路，过程很快乐。我要感谢信息与管理科学学院的老师，我从他们那里学到了许多珍贵的知识和做人处事的道理，以及科学严谨的学术态度，令我受益良多。同时还要感谢学院给了我一个可以认真学习，天天向上的学习环境和机会。即将结束*大学习生活，我感谢****大学提供了一次在**大接受教育的机会，感谢院校老师的无私教导。感谢各位老师审阅我的论文。毕业设计（论文）原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重承诺：所呈交的毕业设计（论文），是我个人在指导教师的指导下进行的研究工作及取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或组织已经发表或公布过的研究成果，也不包含我为获得第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文及其它教育机构的学位或学历而使用过的材料。对本研究提供过帮助和做出过贡献的个人或集体，均已在文中作了明确的说明并表示了谢意。作者签名：　　　　　日　期：　　　　　指导教师签名：　　　　　日　　期：　　　　　使用授权说明本人完全了解大学关于收集、保存、使用毕业设计（论文）的规定，即：按照学校要求提交毕业设计（论文）的印刷本和电子版本；学校有权保存毕业设计（论文）的印刷本和电子版，并提供目录检索与阅览服务；学校可以采用影印、缩印、数字化或其它复制手段保存论文；在不以赢利为目的前提下，学校可以公布论文的部分或全部内容。作者签名：　　　　　日　期：　　　　　第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权　　　　大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。涉密论文按学校规定处理。作者签名：日期：年月日导师签名：日期：年月日第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文独创声明本人郑重声明：所呈交的毕业设计(论文)，是本人在指导老师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，成果不存在知识产权争议。尽我所知，除文中已经注明引用的内容外，本设计（论文）不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中以明确方式标明。本声明的法律后果由本人承担。 作者签名:年月日 毕业设计（论文）使用授权声明本人完全了解**学院关于收集、保存、使用毕业设计（论文）的规定。本人愿意按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版，同意学校保存学位论文的印刷本和电子版，或采用影印、数字化或其它复制手段保存设计（论文）；同意学校在不以营利为目的的前提下，建立目录检索与阅览服务系统，公布设计（论文）的部分或全部内容，允许他人依法合理使用。（保密论文在解密后遵守此规定） 作者签名:年月日第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文基本要求：写毕业论文主要目的是培养学生综合运用所学知识和技能，理论联系实际，独立分析，解决实际问题的能力，使学生得到从事本专业工作和进行相关的基本训练。毕业论文应反映出作者能够准确地掌握所学的专业基础知识，基本学会综合运用所学知识进行科学研究的方法，对所研究的题目有一定的心得体会，论文题目的范围不宜过宽，一般选择本学科某一重要问题的一个侧面。毕业论文的基本教学要求是：1、培养学生综合运用、巩固与扩展所学的基础理论和专业知识，培养学生独立分析、解决实际问题能力、培养学生处理数据和信息的能力。2、培养学生正确的理论联系实际的工作作风，严肃认真的科学态度。3、培养学生进行社会调查研究；文献资料收集、阅读和整理、使用；提出论点、综合论证、总结写作等基本技能。毕业论文是毕业生总结性的独立作业，是学生运用在校学习的基本知识和基础理论，去分析、解决一两个实际问题的实践锻炼过程，也是学生在校学习期间学习成果的综合性总结，是整个教学活动中不可缺少的重要环节。撰写毕业论文对于培养学生初步的科学研究能力，提高其综合运用所学知识分析问题、解决问题能力有着重要意义。毕业论文在进行编写的过程中，需要经过开题报告、论文编写、论文上交评定、论文答辩以及论文评分五个过程，其中开题报告是论文进行的最重要的一个过程，也是论文能否进行的一个重要指标。撰写意义：第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文1.撰写毕业论文是检验学生在校学习成果的重要措施，也是提高教学质量的重要环节。大学生在毕业前都必须完成毕业论文的撰写任务。申请学位必须提交相应的学位论文，经答辩通过后，方可取得学位。可以这么说，毕业论文是结束大学学习生活走向社会的一个中介和桥梁。毕业论文是大学生才华的第一次显露，是向祖国和人民所交的一份有份量的答卷，是投身社会主义现代化建设事业的报到书。一篇毕业论文虽然不能全面地反映出一个人的才华，也不一定能对社会直接带来巨大的效益，对专业产生开拓性的影响。但是，实践证明，撰写毕业论文是提高教学质量的重要环节，是保证出好人才的重要措施。2.通过撰写毕业论文，提高写作水平是干部队伍“四化”建设的需要。党中央要求，为了适应现代化建设的需要，领导班子成员应当逐步实现“革命化、年轻化、知识化、专业化”。这个“四化”的要求，也包含了对干部写作能力和写作水平的要求。3.提高大学生的写作水平是社会主义物质文明和精神文明建设的需要。在新的历史时期，无论是提高全族的科学文化水平，掌握现代科技知识和科学管理方法，还是培养社会主义新人，都要求我们的干部具有较高的写作能力。在经济建设中，作为领导人员和机关的办事人员，要写指示、通知、总结、调查报告等应用文；要写说明书、广告、解说词等说明文；还要写科学论文、经济评论等议论文。在当今信息社会中，信息对于加快经济发展速度，取得良好的经济效益发挥着愈来愈大的作用。写作是以语言文字为信号，是传达信息的方式。信息的来源、信息的收集、信息的储存、整理、传播等等都离不开写作。第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文论文种类：毕业论文是学术论文的一种形式，为了进一步探讨和掌握毕业论文的写作规律和特点，需要对毕业论文进行分类。由于毕业论文本身的内容和性质不同，研究领域、对象、方法、表现方式不同，因此，毕业论文就有不同的分类方法。按内容性质和研究方法的不同可以把毕业论文分为理论性论文、实验性论文、描述性论文和设计性论文。后三种论文主要是理工科大学生可以选择的论文形式，这里不作介绍。文科大学生一般写的是理论性论文。理论性论文具体又可分成两种：一种是以纯粹的抽象理论为研究对象，研究方法是严密的理论推导和数学运算，有的也涉及实验与观测，用以验证论点的正确性。另一种是以对客观事物和现象的调查、考察所得观测资料以及有关文献资料数据为研究对象，研究方法是对有关资料进行分析、综合、概括、抽象，通过归纳、演绎、类比，提出某种新的理论和新的见解。按议论的性质不同可以把毕业论文分为立论文和驳论文。立论性的毕业论文是指从正面阐述论证自己的观点和主张。一篇论文侧重于以立论为主，就属于立论性论文。立论文要求论点鲜明，论据充分，论证严密，以理和事实服人。驳论性毕业论文是指通过反驳别人的论点来树立自己的论点和主张。如果毕业论文侧重于以驳论为主，批驳某些错误的观点、见解、理论，就属于驳论性毕业论文。驳论文除按立论文对论点、论据、论证的要求以外，还要求针锋相对，据理力争。第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文按研究问题的大小不同可以把毕业论文分为宏观论文和微观论文。凡届国家全局性、带有普遍性并对局部工作有一定指导意义的论文，称为宏观论文。它研究的面比较宽广，具有较大范围的影响。反之，研究局部性、具体问题的论文，是微观论文。它对具体工作有指导意义，影响的面窄一些。另外还有一种综合型的分类方法，即把毕业论文分为专题型、论辩型、综述型和综合型四大类：1．专题型论文。这是分析前人研究成果的基础上，以直接论述的形式发表见解，从正面提出某学科中某一学术问题的一种论文。如本书第十二章例文中的《浅析领导者突出工作重点的方法与艺术》一文，从正面论述了突出重点的工作方法的意义、方法和原则，它表明了作者对突出工作重点方法的肯定和理解。2．论辩型论文。这是针对他人在某学科中某一学术问题的见解，凭借充分的论据，着重揭露其不足或错误之处，通过论辩形式来发表见解的一种论文。3．综述型论文。这是在归纳、总结前人或今人对某学科中某一学术问题已有研究成果的基础上，加以介绍或评论，从而发表自己见解的一种论文。4．综合型论文。这是一种将综述型和论辩型两种形式有机结合起来写成的一种论文。如《关于中国民族关系史上的几个问题》一文既介绍了研究民族关系史的现状，又提出了几个值得研究的问题。因此，它是一篇综合型的论文。写作步骤：毕业论文是高等教育自学考试本科专业应考者完成本科阶段学业的最后一个环节，它是应考者的总结性独立作业，目的在于总结学习专业的成果，培养综合运用所学知识解决实际问题的能力。从文体而言，它也是对某一专业领域的现实问题或理论第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文问题进行科学研究探索的具有一定意义的论说文。完成毕业论文的撰写可以分两个步骤，即选择课题和研究课题。首先是选择课题。选题是论文撰写成败的关键。因为，选题是毕业论文撰写的第一步，它实际上就是确定“写什么”的问题，亦即确定科学研究的方向。如果“写什么”不明确，“怎么写”就无从谈起。教育部自学考试办公室有关对毕业论文选题的途径和要求是“为鼓励理论与工作实践结合，应考者可结合本单位或本人从事的工作提出论文题目，报主考学校审查同意后确立。也可由主考学校公布论文题目，由应考者选择。毕业论文的总体要求应与普通全日制高等学校相一致，做到通过论文写作和答辩考核，检验应考者综合运用专业知识的能力”。但不管考生是自己任意选择课题，还是在主考院校公布的指定课题中选择课题，都要坚持选择有科学价值和现实意义的、切实可行的课题。选好课题是毕业论文成功的一半。第一、要坚持选择有科学价值和现实意义的课题。科学研究的目的是为了更好地认识世界、改造世界，以推动社会的不断进步和发展第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文。因此，毕业论文的选题，必须紧密结合社会主义物质文明和精神文明建设的需要，以促进科学事业发展和解决现实存在问题作为出发点和落脚点。选题要符合科学研究的正确方向，要具有新颖性，有创新、有理论价值和现实的指导意义或推动作用，一项毫无意义的研究，即使花很大的精力，表达再完善，也将没有丝毫价值。具体地说，考生可从以下三个方面来选题。首先，要从现实的弊端中选题，学习了专业知识，不能仅停留在书本上和理论上，还要下一番功夫，理论联系实际，用已掌握的专业知识，去寻找和解决工作实践中急待解决的问题。其次，要从寻找科学研究的空白处和边缘领域中选题，科学研究。还有许多没有被开垦的处女地，还有许多缺陷和空白，这些都需要填补。应考者应有独特的眼光和超前的意识去思索，去发现，去研究。最后，要从寻找前人研究的不足处和错误处选题，在前人已提出来的研究课题中，许多虽已有初步的研究成果，但随着社会的不断发展，还有待于丰富、完整和发展，这种补充性或纠正性的研究课题，也是有科学价值和现实指导意义的。第二、要根据自己的能力选择切实可行的课题。毕业论文的写作是一种创造性劳动，不但要有考生个人的见解和主张，同时还需要具备一定的客观条件。由于考生个人的主观、客观条件都是各不相同的，因此在选题时，还应结合自己的特长、兴趣及所具备的客观条件来选题。具体地说，考生可从以下三个方面来综合考虑。首先，要有充足的资料来源。“巧妇难为无米之炊”，在缺少资料的情况下，是很难写出高质量的论文的。选择一个具有丰富资料来源的课题，对课题深入研究与开展很有帮助。其次，要有浓厚的研究兴趣，选择自己感兴趣的课题，可以激发自己研究的热情，调动自己的主动性和积极性，能够以专心、细心、恒心和耐心的积极心态去完成。最后，要能结合发挥自己的业务专长，每个考生无论能力水平高低，工作岗位如何，都有自己的业务专长，选择那些能结合自己工作、发挥自己业务专长的课题，对顺利完成课题的研究大有益处。第65页共40页 南华大学化学化工学院毕业论文致谢这次论文的完成，不止是我自己的努力，同时也有老师的指导，同学的帮助，以及那些无私奉献的前辈，正所谓你知道的越多的时候你才发现你知道的越少，通过这次论文，我想我成长了很多，不只是磨练了我的知识厚度，也使我更加确定了我今后的目标：为今后的计算机事业奋斗。在此我要感谢我的指导老师——***老师，感谢您的指导，才让我有了今天这篇论文，您不仅是我的论文导师，也是我人生的导师，谢谢您！我还要感谢我的同学，四年的相处，虽然我未必记得住每分每秒，但是我记得每一个有你们的精彩瞬间，我相信通过大学的历练，我们都已经长大，变成一个有担当，有能力的新时代青年，感谢你们的陪伴，感谢有你们，这篇论文也有你们的功劳，我想毕业不是我们的相处的结束，它是我们更好相处的开头，祝福你们！我也要感谢父母，这是他们给我的，所有的一切；感谢母校，尽管您不以我为荣，但我一直会以我是一名农大人为荣。通过这次毕业设计，我学习了很多新知识，也对很多以前的东西有了更深的记忆与理解。漫漫求学路，过程很快乐。我要感谢信息与管理科学学院的老师，我从他们那里学到了许多珍贵的知识和做人处事的道理，以及科学严谨的学术态度，令我受益良多。同时还要感谢学院给了我一个可以认真学习，天天向上的学习环境和机会。即将结束*大学习生活，我感谢****大学提供了一次在**大接受教育的机会，感谢院校老师的无私教导。感谢各位老师审阅我的论文。第65页共40页'