cpa矩阵紫外分光光度法测定复方利福平微乳注射剂中三组分的含量

'　　CPA矩阵紫外分光光度法测定复方利福平微乳注射剂中三组分的含量【摘要】目的：研究应用CPA矩阵紫外分光光度法测定复方利福平微乳注射剂中三组分的含量的可行性。方法：采用CPA矩阵法测定，计算程序采用Excel进行Vab编程。结果利福平、异烟肼、左氧氟沙星的平均回收率和相对标准偏差分别为98.02%，0.34%；97.70%，0.50%；101.7%，1.37%。结论：该法可不经分离，简单易行，结果准确，可作为复方利福平微乳注射剂的含量测定方法。【关键词】CPA矩阵；利福平微乳注射剂；含量测定复方利福平微乳注射剂为我院自研制剂，其组成为利福平、异烟肼和左氧氟沙星3种药物，溶解于适量的油、水、表面活性剂和助表面活性剂中配制而成的微乳剂，具有极高的稳定性和对溶质的高度分散性及吸附能力［1］等优点。临床运用该制剂采用经肺部支纤镜介入给药的方式治疗，对耐多药结核菌的肺结核患者，疗效显著。为了对该制剂进行生产质量控制，本研究对该制剂的含量测定方法进行了探讨。 紫外分光光度法常用的方法有双波长、三波长、导数分光光度法等，但对吸收光谱严重重叠，各组分相互干扰较大，用这些方法无法处理。随着计算机在药学领域中的广泛应用，CPA矩阵紫外分光光度法可用于多组分的分析［2］。本研究采用此方法同时测定了复方利福平微乳注射剂中三主药的含量。该法简便快速，结果准确可靠，可用于该制剂的质量控制。1原理CPA矩阵紫外分光光度法是建立在多元统计分析基础上的处理二维数据的一种计算方法，是最小二乘法的改进方法［3］，它将朗伯-比尔定律改写为：C=PA(1)式中P为比例常数矩阵,可由下式求得:P=CAT(AAT)-1(2)式中C表示标准混合液浓度矩阵,A表示标准混合液吸收值矩阵,T为待测组分的数目。配制一系列标准混合溶液,在所选定的测定波长下测得吸收值矩阵A,代入(2)式中计算便可求得系数矩阵P,再由样品的吸收值代入(1)式中计算样品的浓度。2实验部分2.1仪器与试药UV760CRT紫外可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司分析仪器总厂）；利福平对照品、异烟肼对照品、左氧氟沙星对照品（中国 药品生物制品检定所，批号分别为130496-200001、100578-200401、130455-200640）；磷酸盐缓冲液（上海康仪仪器有限公司，批号20071010）；空白微乳（本院制剂室提供，由油酸乙酯、聚氧乙烯醚、聚乙二醇600按一定的配比组成）；复方利福平微乳注射剂（本院制剂室提供）。2.2标准贮备液的制备精密称定经105℃干燥至恒重的利福平、异烟肼、左氧氟沙星对照品适量，用磷酸盐缓冲液（pH=6.86）分别配成100ug/ml的贮备液。将空白微乳稀配1000倍备用。2.3吸收光谱和波长的选择将上述贮备液分别稀配成10ug/ml，将3种稀配好的贮备液、稀配1000倍的空白微乳和这4组标准混合溶液，以磷酸盐缓冲液为空白溶液，在200~500nm波长范围内扫描绘制各组分及混合液的紫外吸收光谱，其紫外吸收光谱相互重叠，见图1、图2。选择各组分最大吸收特征波长227、255、286和329nm，采用CPA矩阵分光光度法进行测定。1利福平;2异烟肼;3左氧氟沙星;4空白微乳图1各组分吸收光谱图2标准混合微乳液吸收光谱2.4P矩阵的计算 用标准贮备液和空白微乳精密配制5组不同浓度的标准混合液，见表1。在上述最大吸收波长下测定吸光度，结果见表2。根据所得数据，按CPA矩阵原理，利用计算机，通过Excel进行Vab编程计算,求得P矩阵：P=-2.13910.161-24.51547.220-6.81038.909-0.060-38.037-0.727-6.24021.331-9.53710.430-9.0118-0.047-2.5032.5回收率试验模拟生产处方，用标准对照品精密配制（稀配法）5份混合微乳液，在上述4个波长处测定吸光度，输入计算机计算。利福平、异烟肼和左氧氟沙星RSD分别为0.34%、0.50%和1.37%，结果见表3。表1混合微乳液各组分浓度表2各波长下混合溶液吸光度表33种药物的回收率试验2.6精密度试验取利福平对照品、异烟肼对照品、左氧氟沙星对照品和空白微乳适量，加磷酸盐缓冲液配制成，每ml中含利福平3μg，含异烟肼4μg，含左氧氟沙星4μg的微乳液，按上述方法测定，重复测5次，输入计算机计算。利福平、异烟肼和左氧氟沙星RSD分别为0.15%、0.24%、0.56%，表明本测定方法精密度良好。2.7样品的含量测定 精密量取3批复方利福平微乳注射剂适量，用磷酸盐缓冲液稀释至一定浓度，按上述方法，进行含量测定，得到相当于标示量的百分含量，结果见表4。表4复方利福平微乳注射剂的含量测定3讨论该制剂中的3组分和辅料，分离困难、繁琐，所以采用CPA矩阵法可以不经分离进行各组分的含量测定。本制剂中的微乳对3组分的测定干扰很大，如果只设定3组分的矩阵计算方法，无法测定，所以我们将空白微乳设定为一个组分，编程为4组分的矩阵计算进行测定，得到较为理想的结果。由于酸碱性对利福平的稳定性影响较大，所以我们采用中性的磷酸盐缓冲液作为溶剂，进行含量测定。CPA矩阵法通常是用MATLAB软件进行计算，而我们采用Excel进行Vab编程计算更简单易行，方便可靠，适用于多组分复方制剂的分析，有一定的应用价值。【参考'