可见分光光度法测定微量铁.doc

'实验5-10可见分光光度法测定微量铁检查预习情况：1．检查预习笔记2．提问：（1）朗伯-比耳定律的物理意义是什么?什么叫吸收曲线?什么叫标准曲线?（2）邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验中，用（）作还原剂，其化学反应方程式为（）；（）作显色剂，其化学反应方程式为（）。目的要求(1)了解利用可见分光光度法进行定量分析的原理和方法；(2)初步掌握分光光度计的使用方法，学习测绘光吸收曲线和选择测定波长；(3)掌握利用标准曲线法进行定量分析的操作与数据处理方法。实验原理还原剂：抗坏血酸显色剂：邻二氮菲实验用品分光光度计容量瓶(50mL、100mL)吸量管(5mL、10mL)移液管(25mL)pH试纸铁标准溶液(0.010mg·mL-1)试样水溶液（含Fe3+）邻二氮菲溶液(2g·L-1)抗坏血酸溶液(20g·L-1)乙酸-乙酸钠缓冲溶液(pH=4.5)盐酸溶液(1+1)氨水(1+3)实验步骤(1)配制标准系列(2)测绘吸收曲线(3)测绘标准曲线总结上次实验：1,10-邻二氮菲在pH=2~9的水溶液中，能与Fe2+生成稳定的橙红色配合物。试样中Fe3+可预先用还原剂还原为Fe2+。本实验中用抗坏血酸还原Fe3+，控制溶液pH为4~6，用邻二氮菲显色。通过测绘显色溶液的光吸收曲线，求得λmax作为测定波长，测量一组铁标准溶液的吸光度，绘制标准曲线，并在相同条件下测定试样水中杂质铁的含量。用吸量管分别吸取0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL铁标准溶液于6个100mL容量瓶中，加入50mL水，用盐酸溶液或氨水调节pH为2，在各容量瓶中分别加入2.5mL抗坏血酸溶液，摇匀，再加入10mL乙酸-乙酸钠缓冲溶液、5mL邻二氮菲溶液，用水稀释至刻度，混匀。用3cm玻璃吸收池，取上述含4.00mL铁标准溶液的显色溶液，以未加铁标准溶液的试剂溶液作参比，在分光光度计上从波长440～600nm之间测定吸光度，一般每隔20nm测定一个数据；在最大吸收波长附近，每隔5nm测定一个数据。以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线。从而选择测定铁的适宜波长。在选定波长下，用3cm (4)测定试样中的铁含量数据记录与处理(1)将标准溶液的铁含量及实验中测得的数据填入下表：容量瓶编号01234567移取溶液体积/mL0.001.00标液2.00标液3.00标液4.00标液5.00标液50.00水样50.00水样100mL溶液含铁量/mg——吸光度(2)以100mL溶液中铁含量(mg)为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制吸光度对铁含量的标准曲线，从标准曲线上查出试样水的铁含量。(3)按下式计算试样水中铁的质量浓度：式中m——根据试样溶液的吸光度，从标准曲线上查出的铁含量，mg；V——实验所取试样水的体积，L。作业：实验报告玻璃吸收池分别取配制的标准系列显色溶液，以未加铁标准溶液的试剂溶液作参比，测定各溶液的吸光度。用移液管移取试样水50.00mL，置于100mL容量瓶中，按配制标准系列同样的操作，顺序加入各种试剂进行还原和显色，并在同样条件下以未加铁标准溶液的试剂溶液作参比，测定试样溶液的吸光度。平行测定两份。注意事项：(1)抗坏血酸性质不稳定，易氧化变质，最好现用现配。用抗坏血酸还原Fe3+时，酸度高些为宜(pH约为2)，因此应在加入抗坏血酸后，摇匀，再加缓冲溶液和显色剂。(2)本实验所用的水试样，可以是天然水、工业用水或人工配制的含铁样。待测水样应无色透明，如有浑浊必须预先过滤。(3)在标准系列的配制中，用（1+1）盐酸或（1+3）氨水调节溶液的pH时，可用以下操作方法预试：另取一个100mL容量瓶，加3.00mL铁标准溶液,再加水至约50mL，然后逐滴加入(1+1)盐酸或（1+3）氨水，用玻璃棒沾取溶液在pH试纸上试验，记录调至溶液pH为2时试剂的加入量（注意该瓶溶液不能用作绘制标准曲线）。在正式实验中，每个容量瓶加入同样量即可。思考题：(1)实验中加入抗坏血酸和乙酸-乙酸钠缓冲溶液的作用如何?为什么要预先调节溶液的pH为2?(2)根据实验数据计算邻二氮菲-亚铁配合物的摩尔吸光系数。'