紫外分光光度法在黄酮类化合物含量测定中的应用

'维普资讯http://www.cqvip.com新疆中医药2006年第24卷第3期(总第103期)85紫外分光光度法在黄酮类化合物含量测定中的应用新疆维吾尔自治区人民医院(830001)刘文丽于鲁海马燕自然界中，黄酮类化合物是广泛存在于天然植产生的位移改变程度也不同，因此，存在以下几种反物中的一大类化合物，多具有颜色，在植物体内多为应类型。次生代谢产物，除部分以游离形式存在外。大部分与2．1与A13的络合反应糖结合以苷的形式存在。药理和临床试验表明：芦张公亮等以1％A130％乙醇溶液为络合丁、葛根素等黄酮类化合物有益于心脑血管疾病的剂，经10min络合反应后于420nm处测定吸光度值，预防和治疗，大豆异黄酮、金雀异黄素等化合物均有以芦丁表示仙人掌中总黄酮含量。齐曼丽等[5】以槲雌性激素样作用，黄芩素和黄芩苷等有一定程度的皮素为对照品，精密加入5％A1Q1，乙醇溶液2mL，抗菌作用，另外在抗炎、抗病毒、止咳平喘、祛痰等方放置20min后于415nm波长处测定吸光度值，计算面均有相应的黄酮类化合物存在⋯。由于黄酮类化五味沙棘冲剂中总黄酮含量。而席荣英等[6】对半枝合物具有多种多样的生理活性。因此，针对该类化合莲中总黄酮的测定，采用的络合试剂为4％A1物定量分析的研究报道很多，如高效毛细管电泳法、(N03)溶液，对照品为芦丁，以芦丁和样品的铝络高效液相色谱法、薄层扫描法、极谱法等乜】。但测定合物测定液的共有最大吸收波长271nm为检测波长黄酮类化合物含量使用最多的方法仍为紫外分光光进行定量分析。度法。本文对国内近10年400余篇以不同形式紫2．2在醋酸一醋酸盐溶液下与Al¨的络合反应外分光光度法测定黄酮类化合物含量的文献报道进席先蓉等n和张进棠等[8】分别芦丁和槲皮素行归纳总结。为对照品。在pH5．5的醋酸一醋酸钠缓冲溶液和醋1直接扫描测定酸一醋酸钾缓冲溶液(pH5．5)的条件下，均加入尽管黄酮类化合物种类繁多，但其基本母核为0．1mol·LA1Cl~溶液。其最大吸收波长均在272nm2一苯基色原酮，都具有C6一I：3一C6的结构，因此，处。郭素华等】贝0在1．0tool·L醋酸钠一1．0mol·L多数黄酮类化合物存在两个特征吸收，即在300～醋酸(3：1)溶液条件下，加入0．1mol·LA1C13溶液，400nln区间由B环桂皮酰基系统电子跃迁引起的带在430nm处测定吸光度值，以槲皮素计算养心草的I和在240～285nm之间由A环苯甲酰基系统电子总黄酮含量。跃迁引起的带Ⅱ。约有6％的文献采用供试品溶液2．3在醋酸钾或醋酸钠条件下的络合反应与对照品溶液通过紫外光谱扫描在以上区间获得共穆赫塔尔·伊米尔艾山等[1叫在芦丁对照品溶液有吸收作为检测波长进行含量测定。韦英杰等[3采和样品溶液中加入0．1mol·L～A1Cl~，溶液和1．0md·用化橘红中成份柚皮苷为对照品，经扫描，供试品溶L醋酸钠溶液，50％乙醇溶液定容，放置40mill后，液和对照品溶液在283nm处均有最大吸收，因此，确于420nm处测定，计算心草中总黄酮含量。杜薇定283nm为化橘红总黄酮含量测定的检测波长。等n则在测定液中加入2．5％A1C13溶液和10％醋2与Al¨形成络合物后测定酸钾溶液。放置40rain后，同样于在420nm处测定，在黄酮类化合物定量分析方法的研究中，约有以芦丁表示刺梨中总黄酮含量。88％的文献报道采用黄酮类化合物母核中某些位置2．4NAN02一AI(N03)3一NaOH反应条件的羟基与Ar发生络合反应形成络合物后进行测文献报道中有76％的研究采用NAN02一AI定。由于所选择的反应条件不同，形成的络合物所[J]．中国民族医药杂志，1996，l(2)：23—24．民族医药杂志，2O02，l(S)：21—22．2热洋古力·沙特，司马义·买买提．维医蒸汽药浴在类风湿性关节4罗俊，谢阳．维药刺山柑果治疗痛风风湿病l5例[J]．中国民族炎中的应用【J]．中国民族医药杂志。2001，2：26—27．医药杂志。1999，2(5)：3—4．3尼牙孜·艾山．新疆吐鲁番沙疗治疗风湿类疾病的研究[J]．中国(收稿日期*2005—09—09) 维普资讯http://www.cqvip.com86新疆中医药2006年第24卷第3期(总第103期)(No3)，一NaOH反应方法，孙佩霞等n2采用(3)则总黄酮含量常以芦丁或槲皮素表示。测定波长存正交试验设计，对5％NaN02、10％A1(N03)3、4％在差异的可能原因：(1)被测物结构差异；(2)反应溶NaOH溶液在反应过程中的用量进行考察，结果表媒差异；(3)反应条件差异；(4)仪器性能差异。明在测定液的反应过程中加人5％NaNo2溶液尽管使用紫外分光光度法测定总黄酮含量的方法由于专属性不强，未必能全面客观地反映测定对O．3mL，摇匀，放置6min，10％AI(No3)3溶液0．3mL，象的真实情况，但对成份复杂的天然植物来说，在未摇匀，放置6min，4％NaOH溶液4mL，摇匀，放置获得准确可靠的分析方法时，紫外分光光度法仍不10min后，在500rim波长处测得吸光度值最大。但失为一种可供借鉴的总黄酮含量测定方法。郭亚健等[1】选择了一些黄酮类成份和非黄酮类成参考文献份，按上述方法在波长400—700nm范围内进行扫描1王宪楷．天然药物化学[M]．北京：人民卫生出版社，1988．272—测定，结果表明黄酮类成份黄芩苷、黄芩素、香蒲新278．苷、山奈酚、槲皮素、橙皮苷等在500rim左右无最大2周洪水，刘向红．黄酮类生药成份定量分析方法研究近况[J]．山吸收或吸收较弱，而非黄酮类成份咖啡酸、原儿茶东中医药大学学报，1998，22(5)：389—392．3韦英杰，舒斌，陈玉俊，等．分光光度法测定化橘红总黄酮含量醛、绿原酸、原儿茶酸在500nm左右有最大吸收或吸[J]．中成药，20O5，27(3)：354—355．收较强，香草醛、阿魏酸等也有一定吸收，说明以芦4张公亮，朱靖博，朱蓓薇．仙人掌黄酮类化合物的超声波提取和丁为对照品，以№No2一A1(No3)3一NaOH为显色剂纯化[J]．食品与发酵工业，2004，3o(12)：137—140．在500nm进行总黄酮含量测定的方法专属性不强。5齐曼丽，何春松，韩来敏，等．五味沙棘冲剂中总黄酮的含量测定同时，也表明化合物是否具有邻二酚羟基结构可能[J]．中国民族医药杂志，2000，6(12)：81．6席荣英。孙祥德．半枝莲中总黄酮含量测定[J]．新乡医学院学与此条件的显色反应有关。报，2003，2o(1)：29—30．3计算紫外分光光度法7席先蓉，张晓蓉，张红萍，等．石淋通片中黄酮类化合物的含量测双波长分光光度法、三波长分光光度法以及系定[J]．贵阳中医学院学报，1995，17(3)：59—6(J．数倍率分光光度法等方法的共同特点是待测样品可8张进棠，姚本林，刘伏煌，等．银杏叶提取物中总黄酮的紫外分光不经分离处理，直接测定。它通过在光谱曲线上选光度测定[J]．武汉化工学院学报，1998，20(3)；26—28．9郭素华，黄建福，郑连梅，等．养心草及其制剂的研究[J]．福建中择适宜的2个或3个测定波长，测其吸光度值，通过医学院学报，2001，11(4)：35—38．计算消除某些成份的干扰以求得被测组分的含量。1O穆赫塔尔·伊米尔艾山，摩尔班·吾斯曼．心草中总黄酮含量的周海梅等[14用系数倍率法测定银杏叶中总黄酮含测定[J]．中草药，2001，32(10)：90o．量，所测结果与分光光度法测定结果比较，其总黄酮11杜薇。任永全．刺梨中微量元素和总黄酮的含量测定[J]．中国含量分别为1．30-t-O．10％和1．68-t-O．14％，回收率医院药学杂志。2003，23(9)：530—532．12孙佩霞。叶丽卡。张晓丽。等．比色法测定淫羊藿胶囊中总黄酮分别为95．7％和93．8％，说明系数倍率分光光度法的含量[J]．辽宁药物与临床，1998，1(2)：59—60．通过波长组合，利用两波长处的吸光度值倍数和差13郭亚健，范莉，王晓强，等．关于NaNO2一AICNO3)3一NaOH比色值进一步消除了干扰，取得较好结果。法测定总黄酮方法的探讨[J]．药物分析杂志，2002。22(2)：97—4结语99．在利用紫外分光光度法对天然植物黄酮类化合14周海梅，马锦琦。李朴，等．系数倍率分光光度法测定银杏叶中物含量测定的方法研究中，通过对有关文献的归纳总黄酮的含量[J]．洛阳医专学报。1999，17(20)：100一101．分析，得到以下几点认识：对照品的使用主要有以下(收稿日期：2006—02一o5)两种方式：(1)测定对象本身所具有的；(2)测定对象本身的化学成份不明确、不易获得或无合适对照品，您的良师益'