紫外分光光度法测定当归补血汤中的总苷含量

'安徽医学第32卷第5期636AnhuiMedicalJournal2011年5月·药学研究·紫外分光光度法测定当归补血汤中的总苷含量严安定高建王培培夏泉许杜娟[摘要】目的建立用紫外分光光度法测定当归补血汤中总苷含量的方法。方法采用紫外分光光度法，以黄芪甲苷为对照品，在波长540am处测定当归补血总苷含量。结果黄芪甲苷的线性范围为4．167—41．667Ixg·ml(r=0．9986)，平均回收率为99．3％，RSD=0．74％(n=5)。结论本方法准确、简便、快速可行，适用于当归补血汤中总苷的含量测定。[关键词】紫外分光光度法；当归补血总苷；黄芪甲苷；含量测定doi：10．3969／j．issn．1000—0399．2011．05．030DeterminationofthetotalglucosidesofdangguibuxuetangbyUVspectrophotometryYanAnding，GaoJian，WangPeipei，etalTheFirstAfiliatedHospitalofAnhuiMedicalUn&ersi~，theThird—GradePharmaceuticalChemistryLaboratoryofStateAdministrationofTraditionalChineseMedicine，Hefei230022，China[Abstract]ObjectiveToestablishamethodforthedeterminationofthetotalglucosidesofDangguiBuxuetangbyUVspectropho—tometry．MethodsBasedOnthereferencesubstanceofastraglosideIV，thedeterminationwasperformedbyUVspectrophotometryatthewavelengthof540am．ResultsThecalibrationculveoftheabsorbencewaslinearwiththeconcentrationofastraglosideIVintherangeof4．167—41．667~g‘ml(r2=0．9986)．TheaveragerecoveryrateofastraglosideIVwas99．3％withtheRSDof0．74％(n=5)．Condu-sionThemethodisaccurate，simple，fast，feasibleandcanbeappliedtothedeterminationoftotalglucosidesofDangguiBuxuetang．[Keywords]UVSpectrophotometry；TotalGlucosidesofDangguiBuxueTang；AstraglosideIV；Determination当归补血汤出自《内外伤辩惑论》，为金元四大家ius。旋转蒸发仪RE一52—98，上海亚荣生化仪器厂。之一李东垣所创制，由黄芪、当归以5：1的配伍组成，大孔吸附树脂柱(1．5cm×30cm，5．0cm×80功能补气生血，主治劳倦内伤、气弱血虚、阳浮外cm)，中国科学技术大学玻璃仪器厂。越¨．2J，黄芪是该复方的君药。现代研究表明3I4j，黄1．2试药黄芪、当归均购于安徽医科大学第一附属芪总皂苷是黄芪中的主要有效成分，而黄芪甲苷作为医院中药房，经安徽中医学院彭华胜副教授鉴定分别黄芪中的指标成分，在中国药典中作为黄芪质量控制为豆科植物膜荚黄芪Astragalusmembranaceus的定量指标。苷类成分是当归补血汤发挥药理作用的(Fisch．)Bge．的根和伞形科植物当归Angelicasinensis物质基础，也是质量控制常用的指标物，结合本方组成(Oliv．)Diels的根。两昧药材经切片后60clC减压干的特点，笔者通过研究建立了测定当归补血汤中总苷燥12h后，打成粗粉置干燥器内备用。黄芪甲苷标准含量的uV法，发现用黄芪甲苷标定总苷成分含量，二品(中国药品生物制品检定所，批号(0781—200210)；者最大吸收基本一致，为有效地控制其质量提供了依双蒸水自制，其余试剂均为分析纯。据，从而为该方的进一步开发应用奠定基础。1．3实验方法1．3．1当归补血总苷的制备取黄芪、当归药材1材料与方法粗粉，精确称量黄芪、当归(5：1)1200g，10倍量70％1．1仪器CTG一10提取器(湖南省衡阳市药物机乙醇回流提取2次(每次2h)，合并醇提液趁热抽滤械厂)；Tu一1800SPC紫外可见分光光度计(北京普析并浓缩，减压回收乙醇，浓缩物加适量蒸馏水使溶解，通用仪器有限责任公司)；Tsl4—2型光学读数天平，用水饱和的正丁醇(1：1)萃取4次；合并正丁醇萃取湘仪天平仪器厂产品。电子天平BP211D，德国Sartar-液，回收正丁醇后60℃减压干燥得粗总苷72g(得率基金项目：国家自然科学基金资助项目(No．30801535)；安徽省高校省级教学质量与教学改革工程项目(20100346)作者单位：230022合肥安徽医科大学第一附属医院药剂科，国家中医药管理局中药化学三级实验室(TCM一2009202)(严安定，高建，王培培，夏泉，许杜娟)230032合肥安徽医科大学药学院(高建，王培培，夏泉，许杜娟)通信作者：高建，gaojianayfy@163．COIXI 第32卷第5期2011年5月严安定等：紫外分光光度法测定当归补血汤中的总苷含量637为6．0％)。大孔吸附树脂吸附后，分别以蒸馏水，恒温水浴中，保温20min后，置冷水浴中冷却至室温，40％乙醇和70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱液并浓于540nm波长处测吸光度。同时以随行试剂作空白。缩，浓缩物回收乙醇并60％减压干燥得到棕黄色粉以吸光度(Y)为纵坐标，黄芪甲苷的浓度g·ml末，即得。(x)为横坐标，绘制标准曲线(图3)，计算回归方程1．3．2样品溶液的制备精密称取当归补血粗总苷为：Y=0．0035X一0．0032，r=0．9986。其中黄芪甲约10mg，置25ml容量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释苷对照品的浓度范围为4．167—41．667I．zg·ml～，说至刻度，作为供试品溶液。明黄芪甲苷在此浓度范围内呈良好的线性关系。1．3．3对照品溶液的制备精密称取黄芪甲苷标准1品5．0mg，置于10m1的容量瓶中，用甲醇溶解并稀释0，80．6至刻度，摇匀即得。0．42结果0．2O2．1吸收曲线。。吸取供试品溶液及对照品溶液05O100150200250300各0．2ml，加无水乙醇补足体积至0．5ml，再分别加入质量(g)8％的香草醛无水乙醇试液0．5ml和72％的硫酸5．0图3黄芪甲苷标准曲线ml摇匀，立即放入62℃恒温水浴中，保温20min后，2．3试验回收率精密量取0．1ml供试品溶液，再精置冷水浴中冷却至室温，以试剂作空白对照，用紫外分密加入0．1ml黄芪甲苷对照品溶液(25m1)，按供试光光度计在400～700nm范围扫描。黄芪甲苷与供试品溶液项下方法制备得供试品溶液，依法在540nm处品在540nm波长均有最大吸收(图1和2)，故选择测定吸光度，由回归方程计算回收率，结果见表1。540nm为测定波长。回收率=[测得量(mg)一样品中含量(mg)]／加Ah0入对照品的量(mg)×100％。表1回收率试验结果(n=5)，—＼—／，／——～＼＼／＼统计学处理X=99．3％图1当归补血总苷紫外吸收图谱2．7样品测定3批当归补血粗总苷中当归补血苷的含量以黄芪甲苷计算，含量分别为85．4％、87、3％和86．2％，平均含量为86．3％，RSD为1．1％。3讨论／厂＼当归补血汤由黄芪和当归两味中药组成，成分较＼复杂，用HPLC法测定复方中单一成分含量不能很好＼一地控制其质量。方中黄芪是该复方的君药，黄芪总皂苷是黄芪中的主要有效部位，而黄芪甲苷作为黄芪中图2黄芪甲苷对照品紫外吸收图谱的指标成分，在中国药典中作为黄芪质量控制的定量2．2标准曲线精密吸取对照品溶液0．05、0．1、0．指标。故本研究采用紫外法测定其中总皂苷的含量测2、0．3、0．4和0．5ml，置具塞试管中，加无水乙醇补足定方法，直接测定的结果即为复方中总苷类成分的含体积至0．5ml，再分别加入8％的香草醛无水乙醇试量，以总苷来考察当归补血汤质量的稳定和可控性，比液0．5ml和72％的硫酸5．0ml摇匀，立即放入62％单一成分指标全面，更符合中医药理论。该方法简便、 安徽医学第32卷第5期638AnhuiMedicalJournal2011年5月替吉奥联合奥沙利铂二线治疗晚期胃癌的临床观察张从军孙国平熊福星彭万仁[摘要】目的观察替吉奥联合奥沙利铂二线治疗晚期胃癌的临床疗效和安全性。方法一线治疗失败的22例晚期胃癌患者，采用替吉奥80ms／m，分2次口服，d1—14；奥沙利铂130ms／m，静脉滴注，dl；28d为1个周期，至少完成2个周期。结果22例均可评价疗效，其中完全缓解1例，部分缓解6例，稳定10例，进展5例，有效率为31．82％。不良反应主要为骨髓抑制，胃肠道反应及周围神经毒性，多为I一Ⅱ级。结论替吉奥联合奥沙利铂方案对一线治疗失败的晚期胃癌疗效肯定，不良反应可以耐受，值得进一步研究应用。[关键词]替吉奥；奥沙利铂；晚期胃癌doi：10．3969／j．issn．1000—0399．2011．O5．031S一1plusoxaliplatinaSasecondlinechemotherapyforpatientswithadvancedgastriccancerZhangCong~un，SunGuoping，XiongFuxing，etalDepartmentD厂Oneology，theFirstAfiliatedHospitalofAnhuiMedicalUniversity，Hefei230022，China]1J[Abstract]ObjectiveToevaluatetheeffectandtoxicityofS一1combinedwithoxaliplatinasasecondlinechemotherapyregimenforpatientswithadvancedgastriccancer．MethodsTwenty—twopatientswithadvancedgastriccancerwhohadfailedinfirst—linechemo—therapywereenrolledinthisstudy．S一1wasadministeredorallytwicedailyatthedoseof80mg／mondl一14．Oxalipatinwasadministeredat130mg／mininfusionond1．Every28dayswassetasonecycleandatleast2cyclesweregiven．ResultsTwenty—twopatientswereevaluableforeficacy．Theresponseratewas31．82％，with1CR，6PR，10SD，and5PD．Themainadverseeffectsincludedboneman"~wsuppression，gastrointestinalreaction，andperipheralneuropathy，mostoftimeweredegreeI一1．ConclusionS一1combinedwithoxali—platiniseffectiveasasecondarylineregimenforpatientswithadvancedgastriceaneer．Thisprotocolisactiveandwelltolerated．Furtherclinicalstudiesarewarranted．[Keywords]S一1；Oxaliplatin；Advancedgastriccancer作者单位：230022合肥安徽医科大学第一附属医院肿瘤内科快速、准确、可行，是测定黄芪及其复方制剂中总皂苷展．甘肃中医学院学报，2005，22(5)：48—50．含量较理想的方法。国家药典委员会．中华人民共和国药典．北京：化学工业出版社，2010：142—143．当归补血汤为益气活血的经典名方，黄芪、当归的高建，李俊，麻兵继，等．正交试验法优选玉屏风总苷的提主要活性成分基本明确，且也有较成熟的定量方法。取工艺．中国实验方剂学杂志，2007，13(12)：15—17．本研究的目的主要是考察实验中所提取的当归补血总谢秀琼．中药新制剂开发与应用．2版．北京：人民卫生出苷质量是否稳定、可控。结果表明，3个不同批次的当版社，2002：136．归补血总苷的平均含量为86．3％，RSD为1．1％，说明高建，李俊，童成亮，等．玉屏风散中总苷的制备及含量测总苷质量基本稳定，该法能有效体现出当归补血总苷定．中国中药杂志，2006，31(6)：515—516．的特征性和专属性。该方法可控，重现性良好，能准确熊义涛，蒋启明，陶福华．夕阳春口服液中黄芪总皂苷的地评价当归补血总苷的质量，为有效控制当归补血总含量测定．中国医院药学杂志，1995，15(12)：553．苷的质量提供了初步的试验依据。江燕，晁若冰．黄芪药材中黄芪甲苷和总皂苷含量的比较．华西药学杂志，2007，22(3)：322—324．参考文献唐军．比色法测定黄芪中黄芪总皂苷含量．安徽中医学院学报，2004，23(5)：37—38．许济群，王锦之．方剂学．上海：上海科技出版社，1995：(2011-01-30收稿2011-02-27修回)121．[2]刘伯成，刘良，王永禄，等．当归补血汤的药理学研究进'