紫外分光光度法测定牛蒡子提取物总木脂素含量

'　　紫外分光光度法测定牛蒡子提取物总木脂素含量【关键词】牛蒡子总木脂素牛蒡苷紫外分光光度法牛蒡子为菊科牛蒡属植物牛蒡（ArctiumlappaL.）的干燥成熟果实[1]，是常用中药，始载于《名医别录》。现代历版中国药典均有收载。传统中医药理论认为，牛蒡子味苦辛，性寒，归肺胃二经，具有疏散风热，宣肺透疹，解毒利咽之功效，可用于治疗风热感冒，咳嗽痰多，麻疹，风疹，咽喉肿痛，痄腮丹毒，痈肿疮毒等。近年来研究表明:牛蒡子提取物中主要成分是总木脂素类化合物，其具有降血糖[2]，有效抑制甲型流感病毒FM1株[3]，抗肿瘤及免疫活性等作用。但对牛蒡子提取物分析方法研究报道不多，用HPLC法只分析其中两种成分—牛蒡苷和牛蒡苷元，对牛蒡子提取物中总木脂素的含量分析尚未见报道。本文采用紫外分光光度法测定牛蒡子提取物中总木脂素的含量，方法简便、快速，为寻找和利用植物资源，控制生药质量，提供了一个很好的方法。1仪器与试药仪器：日本岛津UV—265型分光光度仪，CQ—250型超声波清洗器。试药：甲醇（色谱纯），重蒸馏水，牛蒡苷对照品（由中国药品生物制品检定所提供，批号819—9401），牛蒡子药材(沈阳天益堂药房，由辽宁中医药大学中药鉴定教研室翟延君教授鉴定。2方法与结果2.1制法牛蒡子药材粉碎成粗粉，取1.0kg，加95%乙醇提取2次，第1次加6倍量，提取1h，第2次加4倍量，提取1h，滤过，合并两次提取液，回收溶剂，干燥，得牛蒡子提取物。2.2对照品溶液制备精密称取牛蒡苷对照品4.51mg，置50mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取对照品溶液5.0mL置10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1mL含0.0451mg的溶液，作为对照品溶液。2.3供试品溶液制备取牛蒡子提取物0.1g，精密称定，置100mL量瓶中，加甲醇60mL超声使溶解并稀释至刻度，摇匀。精密吸取2mL，置50mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。2.4测定方法分别取供试品溶液、对照品溶液在280nm波长处测定吸收度，计算，即得。2.5线性范围考察 精密称取牛蒡苷对照品4.51mg，置50mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1mL含0.0902mg的对照品溶液，分别精密吸取对照品溶液2.0、4.0、6.0、8.0、10.0置10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，在280nm波长处测定吸收度。以对照品浓度为横坐标，吸收度为纵坐标，绘制标准曲线，经线性回归，得回归方程为：C=10.7816A-0.0053，r=0.9999，由此可见，牛蒡苷的浓度在0.01804～0.0902mg/mL内线性关系良好。取同一供试品溶液（批号080602），连续测定6次。结果RSD为0.4%（n=6），表明仪器精密度良好。2.8重复性试验考察精密称取6份（批号080602）样品0.1g，按供试品溶液的制备项下方法操作，测定结果总木脂素平均含量为931.6mg/g，RSD为1.3%（n=6），表明本试验测定方法的重复性良好。2.9加样回收率试验考察精密称取已知准确含量的样品（批号080602，含量931.6mg/g）0.07g，精密加入牛蒡苷对照品溶液（1.604mg/mL）15mL，按供试品溶液的制备项下方法操作，测定结果见表1。表1加样回收率试验考察结果序号取样量上述测定结果提示，回收率在97.0%～101.2%之间，RSD为1.7%，符合有关规定。2.10提取物含量测定数据取3批提取物，按供试品溶液制备项下的方法操作，测定3批样品中总木脂素含量，测定结果见表2。表23批样品总木脂素含量批次总木脂素含量根据上述测定结果，暂定提取物中每克含总木脂素以牛蒡苷计，不得低于800mg。3讨论3.1总木脂素类含量测定的定量指标与定量方法的建立本提取物由牛蒡子一味药经提取加工制成，经查阅文献[2,3]，牛蒡子含有的木脂素类化合物为其主要活性成分，含量测定方法研究中发现，总木脂素与牛蒡苷对照品在同一峰位有吸收，故以牛蒡苷为对照品，采用紫外分光光度法测定提取物中总木脂素的含量。3.2通过紫外分光光度法测定提取物中总木脂素含量，方法的精密度、稳定性、重现性均良好，简便易行，为牛蒡子提取物的研制开发奠定了基础。【参考文献】［1］国家药典委员会.中国药典一部[S].北京：化学工业出版社，2005:48. [2]徐朝晖，赵爱华，高先富，等.具降糖活性的牛蒡子提取物的化学成分[J].中国天然药物，2006，4（6）：444-447.[3]王雪峰，潘曌曌，闫丽娟，等.牛蒡子提取物体外抗甲型流感病毒FM1株的实验研究[J].中医研究，2007，20（6）：18-21.'