紫外分光光度法测定维生素c片含量结果的不确定度评定

'　　紫外分光光度法测定维生素C片含量结果的不确定度评定Abstract：ObjectiveToestablishamethodfortheevaluationoftheuncertaintyofthecontentdeterminationofvitaminCinvitaminCtabletsbyUV.MethodsThesourcesoftheuncertaintyinthecontentdeterminationofvitaminCtabletsinationeasurements,theple,thedilatedvolumeofsample,themeasurementbyultravioletvisibleabsorptionspectroscopy.ResultsTheexpandeduncertaintyU95inC;contentdetermination;uncertaintyofmeasurement不确定度的测量是判定测量结果可信度的依据，在药物质量分析运用不确定度测量中有助于分析各种不确定对试验结果的影响，对药物分析检测具有重要意义。根据《测量不确定度评定与表示》［1］，并参考《化学分析中不确定度的评估指南》［2］，对紫外分光光度法测定维生素C片含量的方法进行测量不确定度的分析与评定，以控制测量结果的有效性与适宜性。1材料与方法1.1仪器与试药UV-1102型紫外分光光度仪(天美公司)；AE240电子天平(双量程瑞士梅特勒-托利多仪器公司，实际标尺分度值(d)：0.1mg)。维生素C片均为市售品(A厂：批号060404，B厂：批号060415，C厂：批号060421)，硫酸为分析纯，水为纯化水。1.2主要方法1.2.1对照品溶液制备取维生素C对照品25mg，精密称定，置100mL量瓶中，加0.005mol/L硫酸液适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。1.2.2供试品溶液制备取维生素C片20片精密称定，测得平均片重=0.1430g．研细，精密称取本品0.0712g(约相当于维生素C0.05g)，置100mL量瓶中，加0.005mol/L硫酸液适量,振摇使维生素C溶解，再加0.005mol/L硫酸液至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液；精密量取续滤液5mL置100mL量瓶中，用0.005mol/L硫酸液稀释至刻度，摇匀，即得。取供试品溶液置1cm吸收池内，在200～300nm波长范围内进行扫描。结果显示，在243.6nm波长处有最大吸收，故选择244nm作为测定波长，以Ｅ1%cm=560计算，测得吸收度A=0.5421。由含量公式计算得维生素C标示量=96.80%．2结果2.1建立数学模型X=Ax×V１００×V＇100×V５×m×Ｅ％cm×P% 式中：X：维生素C片中C为标示量的百分含量：%；Ax：吸收度：A；V100：贮备试液体积：mL；m：测试溶液体积：mL；：平均片重：g；V5：制备测试溶液吸取贮备试液的体积：mL；m：样品称取量：g；P：标示量：0.1mg．2.2方差运算方差:u2(x)=C2(Ax)·u2(Ax)+C2(V100)·u2(V100)+C2(V′100)·u2(V′100)+……C2()·u2()+C2(V5)·u2(V5)+C2(m)·u2(m)2.3分析各不确定度分量2.3.1样品称量m带入的不确定度2.3.1.1天平的示值重复性根据试验统计数据，使用万分之一天平，称量在20～30g左右时，示值重复性标准偏差为0.070mg，属B类不确定度，故u1(m)=0.070mg．2.3.1.2天平示值误差由于采用加量法称取，且两次所称质量相差仅0.2g左右，根据JJF1059-1999公式(25)［3］，故示值误差带入的不确定度分量u2(m)=0mg．2.3.1.3天平称量的误差根据检定证书，最大允许误差MPE=±0.1mg，按均匀分布计算：u3(m)=0.1//31/2=0.058mg．由于是加量法称样，应计算两次，所以：u(m)=［2(0.0702+0.05782)］1/2=0.129mg灵敏系数：C(m)＝Ａx×V100×V＇100×Ｖ５×m２×E１％ｃｍ×P%＝0.5421×100×100×0.14305×0.0712２×560×0.1%=546×10-3mg-1.%故标准不确定度为C(m)·u(m)=546×10-3×0.129=0.070%2.3.2平均片重带入的不确定度灵敏系数：C()=Ａｘ×V１００×V＇100V５×m×E１％ｃｍ×P%=0.5421×100×1005×0.0712×560×0.1%＝272×10-3mg-1.%u()与§2.3.1u(m)相同评定为u()=0.129mg，每片维生素C片称量带入的标准不确定度为C（）·u（）=1/20×0.129mg,故u(=［20(1/20×0.129)2］1/2=0.029mg，故标准不确定度为C（）·u（)=272×0.029×10-3=0.008%2.3.3试液制备、稀释体积测量带入的不确定度2.3.3.1贮备试液体积V100测量带入的不确定度2.3.3.1.1校正实验使用100mLA级量瓶，依据JJG196-90计量检定规程，容量允差为±0.10mL，按均匀分布计算，：u1(V100)=0.10/31/2=0.058mL2.3.3.1.2温度实验时环境温度为25℃，故与量瓶校正时20℃的差异引入的不确定度，按均匀分布计算属，B类不确定度：u2(V100)=(25-20)×2.1×10-4×100/31/2=0.061mL2.3.3.1.3重复性 体积示值的重复性,根据试验统计数据：u3(V100)=0.015mL所以u(V100)=(0.0582+0.0612+0.0152)1/2=0.085mL灵敏系数：C（Ｖ100)=Ax×V＇100×V５×m×E１％cm×P%＝0.5421×100×0.14305×0.0712×560×0.1%=0.388mL-1%故标准不确定度为C(V100)·u(V100)=0.388×0.085=0.033%2.3.3.3.1校正实验使用5mLA级单标线吸管，依据JJG-196-90计量检定规程，容量允差为±0.015mL，按均匀分布计算，属于B类不确定度：u1(V5)=0.015/31/2=0.0087mL2.3.3.3.2温度实验时环境温度为25℃，按均匀分布计算：u2(V5)=(25-20)×2.1×10-4×5/31/2=0.0030mL2.3.3.3.3重复性体积示值的重复性，根据试验统计数据：u3(V5)=0.0080mL所以u(V5)=(0.00872+0.00302+0.00802)1/2=0.012mL灵敏系数：C（Ｖ5)=Ax×V100×V＇100×〖〗V２５×m×E１％cm×P%＝0.5421×100×100×0.143025×0.0712×560×0.1%=7.76mL-1%故标准不确定度为C(V5)·u(V5)=7.76×0.012=0.093%，由此，试液制备和稀释的体积测量带入的总不确定度为：（0.0332+0.0332+0.0932）1/2＝0.104%2.3.4使用紫外分光光度仪带入的不确定度u仪器检定证书给出的定量测量重现性为0.3%，按均匀分布，属B类不确定度,u仪器=0.3%/31/2=0.173％2.3.5供试液测定重复性带入的不确定度u(AX)称取2份供试品配成供试液，在紫外分光光度仪上每份测定9次，得到18个吸收度数据，为随机测量，按正态分布，属A类不确定度。第1份供试液的吸收度：0.5424、0.5407、0.5418、0.5429、0.5417、0.5425、0.5432、0.5419、0.5414，标准差s=7.76×10-4；第2份供试液的吸收度：0.5231、0.5246、0.5248、0.5245、0.5263、0.5240、0.5239、0.5255、0.5252，标准差s=9.48×10-4。则u(AX)=［(7.76×10-4)2+(9.48×10-4)2］1/2=0.123％．2.4不确定度各分量及分析一览表表1不确定度一览表Tab．1UncertaintyTableSourcetypeStandarduncertainty(%)pleB0.070averageplepreparationandmeasuementofdilatedvolumeB0.104UVB0.173repeatedlymeasurementofVitaminCA0.1232.5合成标准不确定度u(x)=(0.0702+0.0082+0.1042+0.1732)1/2=0.214% uc(x)=(0.2142+0.1232)1/2=0.247%2.6扩展不确定度U(x)=uc(x)×k=0.247×2=0.494%=0.49%(覆盖因子k=2)本次维生素C片中C含量为标示量的检测结果=(96.8±0.49)%(P=95%,k=2)。3讨论在药物分析检测中评定不确定度时,应尽可能地分析产生不确定度的所有可能。本文分析了维生素C片含量测定过程中不确定度的分量，主要包括重复性、供试品称样量、试剂制备及稀释体积、平均片重、紫外分光光度仪等分量。从不确定度的分析过程来看，重复性、紫外分光光度计及试剂制备、稀释体积测量是不确定度分析中的主要。故在操作中，应在测定中严格按照实验室操作规范，选用接近使用量或准确度高的量器，选用灵敏度高的仪器，这样可以大大减小测量不确定度。同时尽可能地减少稀释过程给测定结果带来的影响，能有效降低带入的不确定度,保证测量结果的准确性。从而更好的控制药物分析测量结果的有效性与适宜性。【参考文献】［1］李慎安，JJF1059-1999.测量不确定度评定与表示［S］.国家质量技术监督局，1999，7～12.［2］魏昊.化学分析中不确定度的评估指南［M］.北京：中国计量出版社，2002，11.［3］李宁，李秀明.碘量法测定药物含量的不确定度［J］.安徽医药，2006，10（9）：672-673'