紫外分光光度法测定虎杖中白藜芦醇的含量

'　　紫外分光光度法测定虎杖中白藜芦醇的含量【关键词】虎杖白藜芦醇紫外分光光度法　　Abstract:ObjectiveToestablishthedeterminationmethodforresveratrolinextractofPolygonumcuspidatum.MethodsUVspectrophotometry.ResultsThereethodissimple，rapid，accurate.　　Keycuspidatum；Resveratrol；UVspectrophotometry　　虎杖PolygonumcuspidatumSied.etZucc，又名斑根紫金龙、活血龙、阴阳莲［1］，其根茎具有活血定痛、清热利湿、止咳化痰作用。主要用于关节麻痹、湿热黄疸、经闭、咳嗽痰多、水火烫伤、跌打损伤等症的治疗［2］。现代药理研究表明其主要有效活性成分白藜芦醇具有抗癌、抗氧化、抗血小板凝聚、抗菌、调节脂类代谢等多种功能。目前定量检测白藜芦醇的方法主要有高效液相色谱法（HPLC）［3］、气相色谱/质谱法(GC/MS)［4］以及气相色谱法(GC)［5］等。国内还未见有关用紫外分光光度法测定虎杖中白藜芦醇含量的报道。本实验应用紫外分光光度法测定了虎杖提取液中白藜芦醇含量。现报道如下。　　1仪器与试药　　1.1仪器　　GoldS54紫外可见分光光度计（上海棱光技术有限公司）；AB204-N电子天平(Mettler-Toledo设备有限公司)；FC-160型锤式粉碎机（上海中药机械厂制造）。　　1.2试剂　　虎杖药材购自江西省药材公司（产地江西樟树），经江西医学院冯江教授鉴定为正品虎杖，白藜芦醇对照品由中国药品生物制品检验所提供，水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。　　2方法与结果　　2.1对照品溶液的制备精密称取干燥恒重的白藜芦醇对照品5.4mg，于50ml棕色容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀，即得到0.108mg·ml-1的对照品溶液。　　2.2供试品溶液的制备准确称量细块状虎杖10.0g，加10倍量的水，在沸腾状态下提取180min，提取1次，冷却后将提取液过滤，滤液定容至一定体积，即为供试样品液。精密称取一定量试液于50ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。　　2.3 测定波长的选择将白藜芦醇对照品和供试品溶液按实验方法操作，在200～500nm进行波长扫描。结果表明，对照品和供试品溶液均在305nm处有最大吸收，且两者光谱形状极为相似，满足分光光度法测定的基本要求。因此，选定305nm作为测定波长。　　2.4标准曲线的绘制分别精密吸取“2.1”项下对照品溶液0，0.3，0.6，0.9，1.2，1.5ml各置于10ml容量瓶中，以甲醇定容至刻度，摇匀，即得浓度分别为0，3.24，6.48，9.72，12.96，16.20μg/ml的对照品溶液。以甲醇做参比，分别测定305nm吸光度，以吸光度(A)对浓度(C)进行线性回归，得回归方程A=0.13427C+0.04859(r=0.9990)。结果表明，白藜芦醇检测浓度在3～16μg/ml范围内与吸光度线性关系良好。见表1及图1。表1白藜芦醇标准溶液的浓度与吸光度（略）　　2.5重复性实验取同一批虎杖样品，精密称取4份，按“2.2”项下方法分别制备成4份供试品溶液。在305nm下分别测定其吸光度并计算白藜芦醇的含量。结果(见表2)表明，4份提取液中白藜芦醇的平均含量为1.46％，RSD=2.41％（n=4）。表2白藜芦醇含量测定结果（略）　　2.6回收率实验采用加样回收法，精密吸取已知含量为3.32μg/ml虎杖提取液2ml于25ml容量瓶中，加入3.24μg/ml对照品溶液2ml，各4份，用甲醇稀释至刻度，摇匀，测定吸光度，计算回收率。结果得到平均回收率为98.8％，RSD为1.35％。　　3小结　　本实验建立了紫外分光光度法测定虎杖提取物中白藜芦醇的方法。实验表明,本法具有操作简单、速度快、准确度高的优点。其加样回收率和重复性均较好，可作为一种虎杖提取液中白藜芦醇含量测定的方法。【参考文献】　　［1］苏文强,杨磊,朱明华,等.中压柱层析法分离白藜芦醇的研究［J］.林产化学与工业,2004,24(1):40.　　［2］江海燕,朱华,黄慧学,等.炮制对虎杖中白藜芦醇苷和大黄素的影响［J］.中草药,2003,34(3):412.　　［3］杨红美,陈波,曾建国,等.HPLC同时测定虎杖及其提取物中4种有效成分的含量［J］.中国中药杂志,2006,31(3):202.　　［4］马 亭,李攻科,李晓东,等.葡萄酒中白藜芦醇的固相萃取GC/MS法测定及其生理活性的初步研究［J］.高等学校化学学报,2000,20(7):1023.　　［5］于贞,张影陆,赵光鳌.葡萄酒中白藜芦醇的分析［J］.工业微生物,2001,31(4):34.'