磺基水杨酸-铁(ⅲ)分光光度法测定vc探究

'磺基水杨酸-铁(III)分光光度法测定Vc探究摘要：磺基水杨酸与Fe(111)在pH=2.00〜3.00的溶液中形成紫红色磺基水杨酸合铁(III)配离子，维生素C在酸性条件下具有还原性，可将Fe(III)定量还原为Fe(II),使Fe(III)-磺基水杨酸体系的吸光度降低，其降低值与Vc含量在一定范围内呈线性关系，据此提出测定Vc含量的新方法，并对影响吸光度的不同变量和参数进行了研究和选择。在最佳的实验条件下，该方法的线性范围为2.0X10-6-1.2X10—4mol/L,检出限为1.46X10-6mol/L0本方法操作简单，灵敏度高，选择性好，测定果蔬样品的结果满意。关键词：分光光度法维生素C果蔬测定方法中图分类号：0657.3文献标识码：A文章编号：1003-9082(2013)11-0168-02维生素C(以下简称Vc),分子式为C6H806,可直接参与氧化还原反应和释化反应。Vc的固体较稳定，水溶液最容易受氧化，所以测定Vc的准确性很大程度上取决于分析技术。目前，测定Vc的方法主要有2,6-二氯靛酚滴定法、碘量法、HPLC法、电化学法、库仑滴定法等。这些方法各有其长处，但有些需要贵重仪器或药品，或者是前处理十分烦琐。本实验利用Vc的还原性，使Fe(III)还原为Fe(II),从而Fe(III)与磺基水杨酸所生成的配合物减少，吸光度值相应减少，测得 的吸光度与Vc含量在一定范围内呈线性，以此建立Vc含量的测定方法。2、实验部分2.1仪器与试剂。UVmini-1240紫外可见分光光度计；电子分析天平；交直流两用离心沉淀机。维生素C标准溶液：0.001mol/L,准确称取0.0452g抗坏血酸，以10.OOmL体积分数为0.1的盐酸溶解，用二次蒸馆水定容至250mL容量瓶中，摇匀，避光保存，使用时再稀释到所需浓度；磺基水杨酸标准溶液：0.Olmol/L,准确称取1.2837&磺基水杨酸溶于二次蒸馆水中并定容至500mL容量瓶中；Fe(111)标准溶液：0.01mol/L,准确称取2.4455g十二水硫酸铁铁[NH4Fe(S04)2•12H20],用10.OOmL6mol/L的盐酸溶解，加热溶解后用二次蒸馆水定容至500mL容量瓶中；高氯酸标准溶液：0.lmol/L,准确量取4.20mL高氯酸,用二次蒸馆水定容至500mL容量瓶中。2.2实验方法。于25mL容量瓶中依次加入0.Olmol/L的Fe(III)标准溶液0.50mL,适量维生素C标准溶液，0.Olmol/L的磺基水杨酸标准溶液5.OOmL,0.lmol/L高氯酸标准溶液1.OOmL,用二次蒸馆水定容至刻度，摇匀，在紫外可见分光光度计上用lcni比色皿，以试剂空白溶液(即上述不加维生素C标 准溶液的溶液)为参比溶液，在502nm定波长下测定溶液的吸光度A。3、结果与讨论2.1吸收曲线。于25mL容量瓶中依次加入0.01mol/L的Fe(III)标准溶液0.50mL,0.001mol/L的维生素C标准溶液l.OOmL,0.Olmol/L的磺基水杨酸标准溶液5.OOmL,0.lmol/L高氯酸标准溶液1.OOmL,用二次蒸億水定容至刻度，摇匀；同样，于25mL容量瓶中依次加入0.Olmol/L的Fe(III)标准溶液0.50mL,0.01mol/L的磺基水杨酸标准溶液5.OOmL,0.lmol/L髙氯酸标准溶液1.OOmL,定容至刻度,摇匀。用1cm比色皿，于400〜600nm范围内分别进行扫谱,由实验结果可知，在502nm处吸光度最大，维生素C标准溶液存在时，其将Fe(III)还原为Fe(II),使吸光度值有所下降，但最大吸收波长未变。3.2反应条件的选择2.2.1Fe(III)用量的选择。于7支25mL容量瓶中依次加入0.Olmol/L的Fe(III)标准溶液0.10mL、0.50mL.l.OOmL、2.00mL、5.OOmL、8.00mL>10.OOmL,0.0008mol/L的维生素C标准溶液3.OOmL,0.Olmol/L的磺基水杨酸标准溶液5.OOmL,0.lmol/L高氯酸标准溶液1.OOmL,用二次蒸馄水定容至刻度，摇匀。以试剂空白溶液为参比溶液，在502nm处测定其吸光度。由实验结果可知，Fe(III)溶液的用量为0.50mL时， 实验条件为最佳。3.2.2高氯酸用量的选择。于6支25mL容量瓶中依次加入0.01mol/L的Fe(III)标准溶液0.50mL,0.0008mol/L的维生素C标准溶液3.OOmL,0.Olmol/L的磺基水杨酸标准溶液5.OOmL,0.lmol/L髙氯酸标准溶液1.OOmL、2.OOmL、5.OOmL.10.OOmL.12.OOmL.13.OOmL,用二次蒸馅水定容至刻度，摇匀。以试剂空白溶液为参比溶液，在502nm处测定其吸光度。由实验结果可知，当高氯酸标准溶液用量在1.00〜5.OOmL时，吸光度值变化不大，所以选用l.OOmL0.1mol/L高氯酸标准溶液作为最佳用量。3.3.1工作曲线。在选定的最佳实验条件下，按实验方法测得维生素C的浓度在2.0X10-6-1.2X10-4mol/L范围内，其浓度与吸光度呈线性关系，线性方程为A二3623.9C+0.0016,相关系数为r二0.9990。3.3.2精密度。于7支25mL容量瓶中依次加入0.Olmol/L的Fe(III)标准溶液0.50mL,0.0001mol/L的维生素C标准溶液l.OOmL,0.Olmol/L的磺基水杨酸标准溶液5.00mL,0.lmol/L髙氯酸标准溶液1.00mL,用二次蒸憎水定容至刻度，摇匀。以试剂空白溶液为参比溶液，在502nm处测定其吸光度，相对标准偏差RSD为0.44%。3.3.3检出限 在所选的最佳实验条件下，取11份空白溶液进行平行测定，其标准偏差为0.18%,根据IUPAC的规定，以3S/S0计算，本法对维生素C的检出限为1.46X10作者简介：赵美，女，现供职于榆林职业技术学院。mol/Lo4、样品分析2.1样品处理4.1.1黄瓜汁样品制备。将黄瓜洗净、擦干、切碎,取6.00g左右于研钵中，加入10.OOmL体积分数为0.01的盐酸，快速捣成匀浆，然后用交直流两用离心机以3500i7min离心15min,将澄清液过滤至盛有1.00mL体积分数为0.1盐酸的100mL容量瓶中，用二次蒸憎水定容至刻度，摇匀备用。2.1.2西红柿汁样品制备。将西红柿洗净、擦干、切碎,称取17.50g左右于研钵中，加入10mL体积分数为0.01的盐酸，快速捣成匀浆，然后用交直流两用离心机以3500r/min离心15min,将澄清液过滤至盛有1.00mL体积分数为0.1盐酸的100mL容量瓶中，用二次蒸憎水定容至刻度，摇匀备用。4.2样品测定。准确量取3.OOmL样品溶液于25niL容量瓶中，取5份，以试剂空白溶液为参比溶液，按实验方法测定。黄瓜汁中Vc含量平均为8.63mg/100g；西红柿汁中Vc含量平均为7.12mg/100go结论实验结果表明，在HC104缓冲溶液中，利用维生素C的还原性，可将Fe(III)定量还原为Fe4(II),根据吸光 度值的变化测定维生素C含量，该方法操作简便、灵敏度高、选择性好、检出限低，适于果蔬中还原型Vc的测定，结果准确。参考文献[1]中国大百科全书出版社编辑部，编•中国大百科全书•化学[M].中国大百科全书出版社，1989.1001.[2]方雪梅，曹稳根.豆腐柴鲜叶B-胡萝卜素及维生素C的含量测定[J].淮北煤炭师范学院学报，2004,25(4)：66-68.[3]黄伟坤.食品检验与分析[M].北京：中国轻工业出版社，1989.96〜9&作者简介：赵美，女，现供职于榆林职业技术学院。'