分光光度法测定芦荟中微量元素锌

'第27卷增刊分析试验室Vol.27.Suppl.























2008年5月ChineseJournalofAnalysisLaboratory2008-5分光光度法测定芦荟中微量元素锌
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斌,蒋刚彪,陈六平(1.湘南学院化学与生命科学系,郴州423000;2.华南农业大学制药工程系,广州510642;3.中山大学化学与化学工程学院,广州510275)摘
要:研究了表面活性剂十二烷基苯磺酸钠存在下,以1
(2
吡啶偶氮)
2
萘酚(PAN)为显色剂,分光光度法测定芦荟中微量元素锌的最佳显色条件及应用。结果表明,在pH6.8~8.5的KH2PO4
NaOH缓冲溶液中,Zn()与PAN形成红色的络合物,该络合物在常温下可稳定24h以上。其最大吸收波长为5504-1-1nm,表观摩尔吸光系数为5.2610L!mol!cm,检出限为0.01
g
mL,Zn()含量在0~25
g
mL范围内符合比尔定律。适用于基层单位测定芦荟样品中微量锌的含量。关键词:芦荟;微量锌;1
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吡啶偶氮)
2
萘酚;分光光度法

芦荟属百合科植物,作为一种天然药材,在量元素锌进行了测量。实验结果表明,芦荟中的我国已有1000余年的历史,关于芦荟的医用功效确含有丰富的微量元素锌,所用方法灵敏度高、古代早有记载,它具有泄热通便、清肝泻火、杀虫准确性好、操作简便、条件容易控制、分析结果可[1]疗疳等作用。在现代临床上更是广泛应用于抗靠,可为芦荟治疗、预防疾病,探讨微量元素锌在菌、消炎、止血、抗肿瘤等疾病以及美容、保健、人体内缺乏所致疾病的治疗提供科学依据。[2][3]食品行业当中。据文献报道,芦荟中化学成分1
实验部分含量颇多,除主要的糖类、蛋白质、氨基酸、多1.1
仪器与试剂肽、有机酸、蒽醌类等有机化合物外,还含有多种721型分光光度计(上海精密仪器厂),pH213无机微量元素,而锌元素便是其中极为重要的一型酸度计(上海雷磁仪器有限公司),试验芦荟(购种。众所周知,锌是人体和许多动植物的必需微于广州市药材公司,经广东药学院生药教研室鉴量元素之一,也是某些酶和结晶胰岛素的重要组定)。锌标准溶液:精密称取高纯锌粉025g,加[4]成成分,被誉为∀生命之花#。现代医学证实,人入一定量1mol
L的HCl使其完全溶解,然后将其体缺锌,会引起生长停滞、贫血、味觉减退,伤口转移至500mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀,愈合减慢,更会导致青少年成长期间性功能发育配成500
g
mL的锌储备液,将此储备液稀释10[5]不全,智力发育迟缓等缺陷。为此为能更好地了倍后,即得浓度为50
g
mL的锌标准溶液;显色解芦荟中微量元素Zn的分布存在状况,促进医用剂1
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吡啶偶氮)
2
萘酚(PAN):称取0100g芦荟资源的进一步开发利用,笔者采用普通的分PAN溶于100mL的95%乙醇中,配成浓度为01%光光度法,以PAN为显色剂,首次在pH6.8~8.5的溶液,保存在棕色瓶中;增溶剂十二烷基苯磺酸的KH2PO4
NaOH缓冲溶液中,以十二烷基苯磺酸钠配制成20g
L的水溶液;pH78的KH2PO4
NaOH钠为增敏、增溶试剂,无需掩蔽干扰离子,直接利缓冲溶液:按常规方法配制;以上试剂除标明外均用锌与1
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吡啶偶氮)
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萘酚(PAN)形成稳定红为分析纯,实验用水为二次蒸馏水。色络合物的特点,在水溶液中对芦荟中含有的微
基金项目:湖南省教育厅优秀青年科研基金(06B089)项目资助作者简介:邓
斌(1972-),男,副教授,理学博士;E
mail:dbhy2006@yahoo.com.cn∃160∃ 第27卷增刊分析试验室Vol.27.Suppl.























2008年5月ChineseJournalofAnalysisLaboratory2008-51.2
实验方法比法和等摩尔连续变化法测得锌()与显色剂准确称取一定量的锌标准溶液于50mL容量PAN的摩尔组成比均为1%2。而在50mL显色体瓶中,依次加入3mL0.1%PAN,3.0mLpH7.8系中,0.1%PAN溶液用量在2.0~5.0mL范围的KH2PO4
NaOH缓冲溶液和2mL20g
L的十二烷内,配合物吸光度最大且基本稳定,但由于PAN基苯磺酸钠水溶液,每加一种试剂应充分摇匀,用量过大容易产生沉淀,故本文在对样品进行测用水稀释至刻度,摇匀放置10min,在550nm波试时选用了3.0mL0.1%的PAN溶液。长处,用1.0cm比色皿以试剂空白作参比测量有2.1.4
表面活性剂的选择与用量的影响
实验过色配合物的吸光度。程中我们比较了
环糊精(
CD)、溴化十六烷基2
结果与讨论三甲基铵(CTMAB)、十二烷基硫酸钠(SDS)、吐温2.1
显色条件的确定280(Tween280)、溴代十四烷基吡啶(TPB)、乳化2.1.1
吸收光谱特性
按实验方法测绘不同波长剂(OP)、溴代十六烷基吡啶(CPB)、曲拉通X2100处试剂空白和有色配合物的吸光度,所得光谱曲(TritonX2100)、十二烷基硫酸钠(SDS)、十二烷基线如图1所示。由图可见,有色配合物的最大吸收苯磺酸钠(SDBS)等多种表面活性剂对试验体系吸波长为550nm,试剂空白的最大吸收波长为450光度的影响,结果发现采用十二烷基苯磺酸钠时nm,对比度为100nm。的增敏、增溶效果最佳。而当20g
L十二烷基苯磺酸钠用量在1.0~4.0mL范围内,配合物吸光度可达最大且可维持恒定,因此实验时20g
L的十二烷基苯磺酸钠溶液加入量取2.0mL是适宜的。2.1.5
配合物的稳定性
以显色时间为考察目标,实验结果表明,Zn()
PAN有色配合物在室温下即可形成,5min后显色完毕,而此后配合物吸光度达到最大且能稳定出现在24h以上,故本图1
吸收光谱曲线文选定的显色时间为10min是科学合理的。a-试剂空白(水为参比);b-Zn
1
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吡啶偶氮)
2
萘酚2.2
标准曲线(试剂空白为参比)配制不同浓度的锌标准系列溶液,按实验方法测定其吸光度,绘制出工作曲线,结果表明:Zn2.1.2
pH的影响
实验表明,在KH2PO4
NaOH()
PAN配合物的表观摩尔吸光系数为5.26缓冲溶液中,pH处于6.8~8.5范围内,配合物吸4-1-110L!mol!cm,Zn()含量在0~25
g
mL范光度可达最大且维持恒定,如图2所示。故本文对[6]围内符合比耳定律。由实验数据按文献计算得消化后的样品,采用加入pH7.8的KH2PO4
NaOH标准曲线线性回归方程为A=0.5123C+0.0105缓冲溶液3.0mL,使其在合适的酸度下显色稳定,2+(C为Zn浓度:
g
50mL),相关系数r=0.9994,以利于检测。由12次空白测定的标准偏差的3倍除以工作曲线的斜率,求得方法检测下限(3)为0.01
g
mL。2.3
共存离子的影响在实验条件下,试验了多种可能共存离子对显色反应的影响,对10
gZn()进行分析,当相对误差小于&5%时,可允许共存离子的量为++2+2+2+2+3+(
g):K、Na、Ca、Mg、Ba、Sr、Al、+---2--NH4、F、Cl、I、SO4、NO3、硫脲、焦磷酸图2
pH对吸收度的影响3-2-2+3+根(1000);PO4、SiO3、(500);Pb、Sb、3+2+2.1.3
显色剂用量的影响
实验表明,采用摩尔Cr、Be(300);V(∋)、Cr(()、W(()(200);∃161∃ 第27卷增刊分析试验室Vol.27.Suppl.























2008年5月ChineseJournalofAnalysisLaboratory2008-53+3+2+2+2+Bi(100);Fe(500);Hg(10);Ni、Pd、实验方法进行分析,结果如表1所示。2++2+2+Co、Ag(5);Cu、Cd(3)。可见大多数离子不干扰Zn离子的测定,考虑到芦荟消化液中除上表1
处理芦荟中Zn()的分析结果述离子外,其他共存离子的含量更是甚微,故无试样芦荟Zn()含量平均值变异系数需进行掩蔽或特殊分离,即可直接采用分光光度编号
g
(
g
g)
(
g
g)RSD
%法进行测定。11.036016.86002.4
样品分析21.037616.8800所购芦荟用蒸馏水洗净晾干,放入100~10531.040216.900016.900.30)烘箱中烘干48h,冷却后研磨成粉末,将恒重的41.041817.0000芦荟粉保存于干燥器中。51.034216.8700称取研细芦荟1.000g左右,置于100mL烧61.038116.8900瓶中,加入4mol
L的HNO3溶液20mL,放置24h以上,低温加热至近干,以除出有机物,再加入0.为验证样品处理和实验方法的准确性,同时5mol
L的HClO4溶液10mL溶解其中的盐类,静还进行了加标回收实验。实验时精密称取5份已知锌含量的芦荟细粉各1.0g,每份中加入锌标准置12h后,仍采用低温加热至HClO4完全挥发尽,溶液10
g,按样品的消解方法进行处理后,同样冷却,加入适量二次蒸馏水至烧杯中,用NaOH溶依据样品的测定方法于550nm处测其吸光度,将液调节体系pH至微碱性,再用快速滤纸过滤,蒸吸光度值代入回归方程计算出含锌量,据此回收馏水洗涤,将滤液和洗涤液合并后,将其转移至率测定结果如表2所示。由表2可知,回收率为100mL容量瓶中,用水稀至刻度,摇匀后用于测98.0%~100.2%。定。每次测量时从中取出5.0mL,按锌标准溶液表2
回收率测定结果试样编号已知量

g投入量

g测得量

g回收率
%平均值
%变异系数RSD
%116.8810.026.5599.5216.9010.026.93100.2316.8910.026.6799.499.80.35416.8810.026.73100.1516.9010.026.8699.8

芦荟中微量元素锌的含量除与生产过程有关实验室无法实现而难以得到普及。分光光度法作外,还与芦荟的产地条件有很大的关系,随着原为一种价格低廉、操作方便、灵敏度高、适用范围料来源的不同,其锌含量亦会有较大的变化,故广,大多数医药公司又均拥有此类仪器,因此只不同的芦荟会有不同的锌含量,也即会呈现出一要选择好适当的分析条件,在目前的情况下,分定的波动状态。目前,测定中草药中微量锌元素光光度法用于芦荟中微量锌含量的测定,仍具有的方法又有很多,这其中主要有分子光谱法、原较大的实际推广意义和市场竞争力。子光谱法、原子吸收分光光度法、电化学分析法、DDTC萃取光度法、BOC光度法、偏最小二乘分光参考文献光度法、电感藕合等离子体发射光谱法、示波极[1]
中华人民共和国卫生部药典委员会编.中华人民共[7,8]谱法、离子选择电极法和伏安法等等。虽然这和国药典.北京:人民卫生出版社,1990.136些方法具有高效能、高速度、高灵敏度、测试元素[2]
郭国华主编.临床中药辞典.长沙:湖南科学技术出多的特点,但因所用仪器昂贵、操作繁琐、测试人版社,1994.249员业务素质要求较高而使得测定成本太大,一般[3]
姚
军,张
力.内蒙古民族大学学报(自然科学∃162∃ 第27卷增刊分析试验室Vol.27.Suppl.























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胡丽华,周
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